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牛血清白蛋白(BSA)制備技術(shù)簡介

來源:南京賽泓瑞生物科技有限公司   2012年11月19日 14:32  
牛血清白蛋白(BSA),是中的一種球蛋白,,包含583個氨基酸殘基,分子量為 66.446kDa,等電點為4.7,。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用,如在免疫分析實驗中作為封閉劑和作為抗體保護劑,。血清
BSA的制備方法主要有以下幾類:
1,、冷乙醇方法:
1940年由哈附大學(xué)的Cohn的發(fā)明的,,多步蒸餾法,血清蛋白可以根據(jù)控制不同的溫度和不同的乙醇濃度進行分離,。他利用兩這種不同來把血清分離成五種組分,,第五部分含有zui多的白蛋白,所以叫做第五組分,。冷乙醇法由于加入了有機溶劑,,需要在溫度極低的情況下在血液中加入乙醇直到白蛋白析出,會有殘留溶劑造成BSA 純度不高?,F(xiàn)代工藝對Cohn冷乙醇法進行了不斷的改進,。
2、熱休克法
heat-shock熱激包含控制溫度和過濾來分離白蛋白?,F(xiàn)在傾向于在幾個關(guān)鍵步驟用熱代替有機溶劑,,因為乙醇有易揮發(fā)和危險性。熱休克法生產(chǎn)的BSA產(chǎn)量高,,純度也高,,逐漸取代Cohn法成為BSA分餾主要方法,但是熱休克法BSA也有一些缺陷:BSA蛋白高溫變性,,活性低,。
3、色譜層析法(Chromatographic)法是目前BSA生產(chǎn)*的方法,,也是zui為溫和的方法,;主要包括三個步驟,超濾,,離子交換色譜層析和硫酸銨沉淀,;整個過程,無加熱,,無乙醇,,無辛酸,zui大程度保護BSA自然結(jié)構(gòu)和功能,,純度高,,細胞培養(yǎng)。但與其他方法比成本較高,。

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