ELISA實(shí)驗(yàn)操作中標(biāo)本及采集,、貯運(yùn)因素：

    嚴(yán)重溶血,，以 HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中,，殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過(guò)氧化物酶樣活性，催化底物顯色造成假陽(yáng)性,； 混有紅細(xì)胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈,；如有 細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng),； 標(biāo)本凝固不全，有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),，常在血液還未開(kāi)始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白塊,，易造成假陽(yáng)性結(jié)果,； 采血試管洗滌不*,、反復(fù)使用易交叉污染,； 塑料試管能吸附抗原物質(zhì)，樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性,。

    血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè),，嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。一般說(shuō)來(lái),，在 5 天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,，標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG 聚合,，使間接法的 試劑本底加深。超過(guò)一周測(cè)定的需－20℃保存,。凍結(jié)血清融解后,，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均,，應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡,。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,，澄清后再檢測(cè),。反復(fù)凍融會(huì)使 抗體效價(jià)跌落，所以測(cè) 抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),，宜少量分裝冰存,；使用一次性玻璃試管或真空管采血管；并使用非抗凝標(biāo)本,，肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值,，可能與高濃度肝素具有強(qiáng)大的負(fù)電荷能吸附酶標(biāo)記物不易洗脫有關(guān)；EDTA,、酶抑制劑（如NaN3）可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性,；血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清，或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?/font>

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