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各種動(dòng)物或人外周血造血干細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離液操作說明和使用及保存中的注意事項(xiàng)：

本品為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是Ficoll 400 與泛影酸葡甲胺,。適用于從組織勻漿中（胎牛血清或人血清懸起的勻漿細(xì)胞 1X107/ml）分離所需細(xì)胞,，在醫(yī)療和醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究中廣泛應(yīng)用。

其他人及動(dòng)物多種比重細(xì)胞分離液,。注：因不同種屬不同比重分離液的細(xì)胞離散系數(shù)及細(xì)胞帶電不同,，所以用戶在定制分離液時(shí)應(yīng)提供所需分離液的比重、動(dòng)物的種屬及被分離細(xì)胞的名稱,。

使用方法：

1,，例：取1ml肝素抗凝血與全血及組織勻漿稀釋液（或胎牛血清或人血清懸起勻漿的細(xì)胞 1X108/ml）1：1混合再與1ml的干細(xì)胞重懸液（產(chǎn)品編號(hào)：TBD2012SCB）混勻置20度下自然沉降20-30分鐘。吸取渾濁的上清部分,，棄去底部紅細(xì)胞備用,。（使用本干細(xì)胞重懸液可zui終可獲得全血中約2%干細(xì)胞，若省去重懸步驟則只可獲得小于2%的干細(xì)胞,。）

2,，用吸取渾濁的上清部分液體小心疊加在本分離液之液面上（比例為1：1），20度400g/分鐘,，離心20分鐘（水平轉(zhuǎn)子）,，此時(shí)離心管中由上至下細(xì)胞分四層。

*層：為血漿或組織勻漿液層,。

第二層：為環(huán)狀乳白色含所需干細(xì)胞,。

第三層：為透明分離液層。

第四層,；為極少紅細(xì)胞層,，收集第二層細(xì)胞放入含細(xì)胞洗滌液（Cat#：2010X1118）4-5毫升的試管中，充分混勻后,，以1500-2000轉(zhuǎn)/分離心10-30分鐘,。沉淀經(jīng)反復(fù)洗2次即得所需干細(xì)胞。（此方法效果較好,，推薦使用）

分離圖例：

注意事項(xiàng)

1. 啟封后應(yīng)置4℃保存避免微生物的污染,。

2. 細(xì)胞分離液從冰箱取出后,，不可立即使用，需待溶液溫度升至室溫時(shí),，搖勻后使用,。

3. 整個(gè)分離過程中，溫度應(yīng)控制在18-28℃且在無菌環(huán)境下,，避免微生物的污染,，否則會(huì)影響分離質(zhì)量。

應(yīng)用

-從動(dòng)物組織中分離所需細(xì)胞

特點(diǎn)

-密度變化率依照Ficoll 400,，泛影酸和氫氧化鈉.

-*分離溶液的密度為參照具體產(chǎn)品的標(biāo)簽

-生理學(xué)參數(shù)

-在低粘度時(shí)高密度

-無菌-即用型-溶液

產(chǎn)品質(zhì)控

溶液                         注射用水

pH                             7.0-7.5

滲透壓               280-340mOsmol/kg

內(nèi)毒素                        <5EU/ml

無菌                           已檢測

保存期限                          2年

注意

TBD實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞分離培養(yǎng)基是敏光型的,。這種培養(yǎng)基在運(yùn)輸和貯藏過程中應(yīng)避光保溫。由于各品牌離心機(jī)的性能不同,，國內(nèi)南北地區(qū)溫度環(huán)境和四季的差異,，可能影響分離效果，用戶可以調(diào)節(jié)離心轉(zhuǎn)數(shù),，調(diào)節(jié)離心的時(shí)間,，摸索*的分離條件（具體分離條件各實(shí)驗(yàn)室自定）。組織,，血液,，細(xì)胞要求新鮮,，避免冷凍和冷藏,。

貯藏

18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存,。本品為真空包裝,，未啟封前置于10℃以下易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果,。

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