一,、waters液相色譜儀和試劑
檢測單元為Waters液相色譜儀是非常靈活的HPLC系統(tǒng)，包WatersTM 717 plus自動進樣器,；Waters 600E控 制單元,；WatersTM 805數(shù)據(jù) 處理機和 Waters 2410差示折光儀,。液相色譜用試劑為色譜純,。
二、色譜條件
色譜柱為 ODS-AM一303柱 （YMC,，4．6 mm×250 mm,，5肚m），柱溫 40℃,，流動相為含 0．1  三氟已酸的乙腈 一水 （40：60,，v／v），流速1 mL rain～,，高純氦氣脫氣 ,，進樣量 10 L，分析時間為 45 rain,。
三,、標樣配制
大豆皂甙標準品，實驗室自行制備,，通過 IR,、FAS-MS、 H—NMR和”C_NMR鑒定 ,，液相色譜分析為單一峰,。稱取Ba和Bb、Bd和Be,、ag和Dg標準品 ,，加甲醇溶解定容至 10 mL,，分別配成濃度為0．561和 0．588、0．396和 0．503,、0．344和 0．406 mg
mL叫的溶液,，作為對照品溶液。分別吸取標準品液10 L,，供 HPLC分析,。
四、試樣制備
大豆冷凍干燥后剝離胚軸 ,。將 3 kg大豆胚軸研磨粉碎 ,，用15 L 50甲醇常溫提取 ，提取液經(jīng)噴霧干燥得粗粉 562 g,。將粗粉用等體積正丁醇一水溶液萃取,，取正丁醇層，經(jīng)減壓蒸餾,、冷凍干燥,，得總糖甙 223 g。
五,、測定
稱取總糖甙 0．1 g,，用甲醇定容至50 mL，以Milipore FH  0．5肚m過濾膜過濾后作為樣品供試液,。分別吸取供試液 1O L,，供 HPLC分析。
六,、結(jié)論
建立了大豆胚軸中單糖鏈大豆皂甙的液相色譜測定方法,。采用差示折光檢測法，結(jié)果峰面積值和進樣量之間呈良好的線性關(guān)系 ,，用于單糖鏈大豆皂甙的分析中優(yōu)于紫外檢測法,。所建立的檢測方法靈敏度、重現(xiàn)性均能滿足一般分析要求 ,，可用于大豆皂甙樣品中其它大豆皂甙的分析中,。