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常見(jiàn)的兔elisa檢測(cè)試劑盒方法

來(lái)源:上??婆d商貿(mào)有限公司   2012年09月19日 09:32  

                      常見(jiàn)的兔elisa檢測(cè)試劑盒方法

方法一:用于檢測(cè)未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜,。次日洗滌3次,。
   ↓   
加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白,、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
   ↓   
于反應(yīng)孔中,,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,   37℃孵育30-60分鐘,,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌,。
   ↓
加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘,。
     ↓
終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
     ↓
結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,,陽(yáng)性程度越強(qiáng),,陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,,以“+”,、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,,即為陽(yáng)性。

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