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染液制備：傳代細胞
1. 稱取0.5g吉姆薩粉和22ml甘油,；
2. 取少量甘油與吉姆薩粉在研缽內(nèi)充分混合，研磨至無顆粒,；
3. 將剩余的甘油倒入研缽,，于56℃保溫2h,；
4. 加入33ml純甲醇混勻，即為吉姆薩母液,，將其保存于棕色試劑瓶內(nèi),；
5. 取9份pH6.80—7.38的Sorensen緩沖液和1份吉姆薩母液混合即得染色液。
貼壁細胞染色步驟：
1. 去除培養(yǎng)器皿內(nèi)的培養(yǎng)液,，用平衡鹽溶液反復(fù)漂洗單層培養(yǎng)物2次,；
2. 加入平衡鹽溶液，再逐滴加入等體積甲醇,，邊加邊混合,，靜置10min；
3. 將50%甲醇-BSS混合液丟棄,，加入新鮮的甲醇液浸泡固定細胞10min,，然后用甲醇漂洗細胞1次；
4. 將瓶內(nèi)細胞干燥后儲存或直接染色,；
5. 按2ml/cm2 的比例滴加吉姆薩染液,，覆蓋細胞層，染色2min,；
6. 移除染液,，用自來水沖洗掉粉紅色背景后，再用去離子水沖洗細胞,；
7. 用顯微鏡觀察單層潮濕細胞,。若細胞已干,，可重新使細胞潮濕后再觀察。
結(jié)果：傳代細胞
細胞核被染成紫紅色或紫藍色,，而細胞質(zhì)則被染成淺紅色,。
吉姆薩染色法注意事項：
1. 染液宜現(xiàn)用現(xiàn)配，舊染液染色效果不佳,。染液保存時間不宜超過48h,；
2. 吉姆薩對pH極敏感，因此,，緩沖液pH要準確,，否則染色效果不佳。如用染色缸染色時,，隨染色時間的延長,，在染液表面常形成一層氧化膜（發(fā)亮）易附著在玻片上形成污穢，且不易除掉,。因此在用染色缸染色,，尤其用的不是現(xiàn)配者時，染色前應(yīng)先用小片濾紙刮除液面的氧化層再進行染色,。染色完畢,，應(yīng)把標本浸入水中漂洗染液。
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