Thermo Scientific RIPA 裂解和提取緩沖液是一種用于培養(yǎng)的哺乳動物細胞的常用細胞裂解試劑的高質(zhì)量,、即用型且披露的配方,。
RIPA 裂解緩沖液的特點:
•便利— 即用型解決方案,;無需自行裝配和制備組成部分
•靈活— 可與許多應(yīng)用兼容,,包括報告基因檢測,、蛋白檢測,、免疫檢測和蛋白純化
•通用— 可提取細胞質(zhì)、細胞膜和細胞核蛋白
•披露的配方— 不含專有組成部分,,用戶可全面控制和了解可能存在的兼容性問題
該 RIPA 緩沖液可從培養(yǎng)的哺乳動物細胞(包括鋪板細胞和團狀懸浮細胞)中高效裂解并提取蛋白,。該常用試劑可提取細胞膜、細胞核和細胞質(zhì)蛋白,,并可與許多應(yīng)用兼容,,包括報告基因檢測、Thermo Scientific BCA 蛋白檢測,、免疫檢測和蛋白純化,。Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制劑混合物(產(chǎn)品編號 78430)和 Halt 磷酸酶抑制劑混合物(產(chǎn)品編號 78420)等抑制劑也可與該 RIPA 緩沖液配方兼容,可在使用前添加以防止蛋白水解并保持蛋白磷酸化,。
RIPA 緩沖液的名稱來源于為其開發(fā)這種緩沖液的原始應(yīng)用:放射免疫沉淀測定,。盡管目前在實驗室中很少使用這種同位素檢測方法,,但該裂解緩沖液配方的首字母縮略詞已被廣泛使用。RIPA 細胞裂解試劑可從各種細胞類型中高效提取蛋白,,因為其含有三種非離子型和離子型去污劑,。該去污劑配方的一大劣勢是,與其他裂解試劑相比,,其與某些下游應(yīng)用相對不兼容,。
RIPA 裂解和提取緩沖液規(guī)格
相關(guān)產(chǎn)品
1、Pierce™ IP 裂解緩沖液
Thermo Scientific Pierce IP 裂解緩沖液針對細胞裂解物的產(chǎn)量,、純度以及與免疫沉淀(IP 和 Co-IP)(作為與細胞裂解物相關(guān)的下游應(yīng)用)的兼容性進行了優(yōu)化,。
IP 裂解緩沖液的特點:
•經(jīng)過優(yōu)化,可與各種免疫沉淀和牽出測定兼容
• 與各種蛋白測定,、報告基因測定和免疫檢測程序兼容
• 現(xiàn)成的配方,,可有效提取細胞質(zhì)、細胞膜和細胞核蛋白
• 溫和的配方可幫助保持蛋白復(fù)合物用于免疫共沉淀
• 不會釋放可導(dǎo)致樣品高粘性的基因組 DNA
IP 裂解緩沖液是一種基于改良 RIPA 緩沖液配方(不含 SDS)的哺乳動物全細胞裂解試劑,。這種中等強度裂解緩沖液可高效溶解細胞蛋白,,但不會像一般 RIPA 緩沖液那樣釋放染色體組 DNA 或破壞蛋白復(fù)合物。Pierce IP 裂解緩沖液經(jīng)過特殊配方,,可用于各種牽出測定和免疫沉淀檢測,。
Pierce IP 裂解緩沖液可從孔板細胞和經(jīng)懸浮培養(yǎng)液粒化的細胞中有效裂解出培養(yǎng)的哺乳動物細胞,。該裂解緩沖液經(jīng)過優(yōu)化可用于各種牽出測定和免疫沉淀檢測,,還可與很多其他應(yīng)用兼容,包括 Thermo Scientific Pierce BCA 和 660 nm 蛋白測定,、蛋白純化和各種免疫檢測(如 ELISA,、Western 印跡)。
Pierce IP 裂解緩沖液由 25 mM Tris-HCl pH 7.4,、150 mM NaCl,、1 mM EDTA、1% NP-40 和 5% 甘油組成,。該緩沖液不含蛋白酶或磷酸酶抑制劑,;但是如果需要,可在使用前添加各種抑制劑,,如 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制劑混合物或磷酸酶抑制劑混合物,,以防止蛋白水解并保持蛋白磷酸化。
2,、M-PER™ 哺乳動物蛋白提取試劑
Thermo Scientific M-PER哺乳動物蛋白質(zhì)抽提試劑用于從培養(yǎng)的哺乳動物細胞中高效抽提總可溶性蛋白,。
M-PER哺乳動物蛋白抽提試劑的特點:
• 作用溫和— 溫和的除垢劑裂解,產(chǎn)生的抽提物直接與考馬斯(Bradford)和BCA蛋白定量分析試劑或SDS-PAGE兼容
• 兼容性強— 抽提的可溶性蛋白處于非變性狀態(tài),可直接用于免疫沉淀反應(yīng)和其他親和純化過程
• 不含胺基并且可透析— 確保其與隨后的分析系統(tǒng)兼容
• 方便— 貼壁細胞直接在板上裂解或者在剝離和洗滌后懸浮于溶液中
• 非變性— 維持熒光素酶,、β-半乳糖苷酶,、CAT和其他報告基因的活性,與其他供應(yīng)商的產(chǎn)品和冷凍/解凍方法一樣好或更出色
這款完整的細胞裂解試劑是一種非變性除垢劑配方,,可在短短5分鐘內(nèi)溶解細胞膜并抽提總可溶性細胞蛋白,。M-PER試劑很少或根本不需要機械破碎,并且相比冷凍/解凍循環(huán)方法和超聲波破碎方法可以獲得更多的蛋白,。這種哺乳動物細胞裂解試劑是如此有效,,不需要從培養(yǎng)皿上剝離貼壁細胞,可以簡單而直接地在生長細胞的24孔和96孔板上進行裂解和分析,。最終無論是貼壁細胞還是懸浮細胞的裂解產(chǎn)物與很多下游分析都兼容,,包括免疫分析、酶分析和各種常見的報告基因分析,。
在任何蛋白質(zhì)組學分析過程中,,蛋白質(zhì)抽提通常都是關(guān)鍵的第一步,首先細胞必須裂解,,以便打開細胞并釋放出感興趣的蛋白質(zhì),。常用的幾種物理裂解細胞方法包括機械破壞、液體均質(zhì)化,、超聲波裂解,、冷凍/解凍循環(huán)和手工研磨。
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