ATTO 590 NHS Ester 是一種基于羅丹明(Rhodamine)結(jié)構(gòu)的新型熒光標記物,,具有強吸收、高熒光量子產(chǎn)率,、高熱穩(wěn)定性和光化學穩(wěn)定性,。它適用于單分子檢測和高分辨率顯微鏡技術,如PALM,、dSTORM和STED,。
基礎知識概述:
英文名: ATTO 590 Succinimidyl Ester,ATTO 590 NHS ester
分子式:C41H42ClN3O11
分子量:788.24
規(guī)格標準:1mg,、5mg,、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
相關應用:
ATTO 590 NHS Ester 可用于標記蛋白質(zhì)、抗體和胺修飾的寡核苷酸,。它還可用于流式細胞術(FACS),、熒光原位雜交(FISH)、FRET等生物檢測。此外,,它也可以作為Alexa Fluor 594的替代品,。
使用方法:
1.標記蛋白質(zhì):
準備蛋白質(zhì)溶液:將目標蛋白質(zhì)溶解在PBS緩沖液(pH 7.2-7.4)中,確保蛋白質(zhì)濃度在2-10 mg/mL之間,。
調(diào)整pH值:如果蛋白質(zhì)溶液的pH值低于8.0,,使用1 M碳酸氫鈉溶液或pH 9.0的磷酸鹽緩沖液調(diào)整pH至8.0-9.0。
制備染料溶液:將ATTO 590 NHS Ester溶解在無水DMSO中,,制備10 mM的染料溶液,。
反應:將染料溶液與蛋白質(zhì)溶液按10:1的摩爾比混合,室溫下反應30-60分鐘,。
純化:使用Sephadex G-25凝膠過濾柱去除未結(jié)合的染料,。
2.標記寡核苷酸:
ATTO 590 NHS Ester可用于標記胺修飾的寡核苷酸,適用于熒光成像和FRET應用
注意事項:
溶劑選擇:染料溶液應在無水DMSO或乙腈中制備,,避免使用含有胺的溶劑,。
反應條件:反應pH值應控制在8.0-9.0之間,以確保最佳反應效率,。
儲存條件:染料溶液應避光保存于-20°C,,避免反復凍融。
純化步驟:標記后的蛋白質(zhì)或寡核苷酸需要通過凝膠過濾或色譜法去除未結(jié)合的染料,。
結(jié)構(gòu)式:
質(zhì)量控制:95%+
存儲條件:-20°C,,避光,避濕
用途:僅供科研實驗使用,,不用于診治
注意事項:取用一定要干燥,,避免頻繁的溶解和凍干
取用:現(xiàn)配現(xiàn)用,將包裝從冰箱中取出,,置于干燥器中緩慢升至室溫,,打開瓶蓋,取用,。取用后充入惰性氣體,,封口膜封口,擰緊瓶蓋裝入自封袋,,及時放入冰箱,。
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