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高通量固相萃取儀操作中的常見問題及解決辦法

來源:上??普苌萍加邢薰?nbsp;  2025年07月09日 10:28  
   高通量固相萃取儀是一種廣泛應(yīng)用于樣品前處理的高效設(shè)備,,但在實(shí)際操作中,,也會(huì)遇到一些常見的問題,以下是一些常見問題及其解決辦法:
 
  一,、篩板堵塞
 
  高通量固相萃取儀的篩板是關(guān)鍵部件之一,,容易因樣品中的顆粒雜質(zhì)而堵塞,。當(dāng)上樣液含有較多顆粒雜質(zhì)時(shí),這些雜質(zhì)會(huì)在篩板上聚集,,最終導(dǎo)致篩板堵死,,溶液無法通過。解決辦法是在上樣前先進(jìn)行高速離心或者過濾,,取上清液或?yàn)V液過固相萃取柱,減少顆粒雜質(zhì)的影響,。例如在食品中人工合成著色劑的測(cè)定中,,對(duì)于糕點(diǎn)、谷物制品等固體樣品,,上樣前需先高速離心或過濾,,否則極易出現(xiàn)篩板堵塞現(xiàn)象。
 
  二,、流速緩慢
 
  流速對(duì)固相萃取效果至關(guān)重要,。流速過快不利于目標(biāo)化合物在填料上的保留及溶劑與目標(biāo)化合物或填料的相互作用,而流速過慢則會(huì)延長(zhǎng)前處理時(shí)間,。造成流速緩慢的原因及解決辦法如下:
 
  -樣品粘度高,,如食品中的濃縮汁、糖果等,,需對(duì)樣品充分稀釋,,降低上樣液濃度。
 
  -填料較多或太緊密,,可增強(qiáng)負(fù)壓或減少填料使用量,。
 
  -溶劑極性不匹配,如在SN/T1924-2011中淋洗固相萃取柱時(shí),,先用水,、甲醇,再用正己烷淋洗,,正己烷與前兩者的極性不同,,導(dǎo)致流速很慢,此時(shí)可增加負(fù)壓或選用合適的溶劑進(jìn)行過渡,。
 
  三,、凈化效果不理想
 
  固相萃取柱的凈化效果取決于填料、淋洗液和洗脫液的選擇,。在保留化合物模式下凈化樣品時(shí),,若淋洗液洗脫強(qiáng)度太弱,不能將雜質(zhì)淋洗掉,,或者洗脫液強(qiáng)度太強(qiáng),,將雜質(zhì)一并洗脫下來,,都會(huì)導(dǎo)致凈化效果不理想。解決辦法是選擇合適的填料,,優(yōu)化淋洗液和洗脫液的種類及用量,。對(duì)于復(fù)雜樣品,可選擇串聯(lián)固相萃取柱或采用混合填料的方式進(jìn)行操作,。
 
  四,、重現(xiàn)性差
 
  固相萃取中重現(xiàn)性差通常與產(chǎn)品質(zhì)量、流速以及操作有關(guān),。填料的質(zhì)量,、均勻性和松緊度會(huì)影響方法的重現(xiàn)性,因此選擇質(zhì)量可靠的廠家很重要,。同時(shí),,固相萃取過程中流速的快慢也是影響重現(xiàn)性的關(guān)鍵因素之一,上樣,、淋洗,、洗脫過程中適當(dāng)降低流速,通常流速低于5mL/min時(shí)結(jié)果較為穩(wěn)定,。此外,,操作者的操作技能也會(huì)影響到結(jié)果的重現(xiàn)性,如上樣前需活化固相萃取柱,,上樣過程中不能讓填料干涸,,濃縮過程不能有損失,復(fù)溶時(shí)需充分溶解等,。
 
  五,、回收率不理想
 
  回收率是衡量固相萃取效果的重要指標(biāo)。當(dāng)出現(xiàn)回收率低的情況時(shí),,可從以下幾個(gè)方面進(jìn)行排查和解決:
 
  -目標(biāo)化合物在過SPE柱時(shí)未全部保留在萃取柱上,,與樣液一起流出萃取柱??赡苁荢PE柱選擇不合適,,應(yīng)選擇對(duì)目標(biāo)物有合適保留強(qiáng)度的SPE柱;樣品溶劑和淋洗液的洗脫梯度過強(qiáng),,需降低樣品溶劑淋洗液的洗脫強(qiáng)度,;樣品溶液體積或濃度過高,發(fā)生“穿透”,,應(yīng)降低上樣量或增加分離柱填充料量,;SPE柱未進(jìn)行有效的預(yù)處理,需加入溶劑進(jìn)行活化和平衡,。
 
  -目標(biāo)化合物未被洗脫,,仍保留在萃取柱上,。可能是分離柱對(duì)化合物保留過強(qiáng),,未找到合適的洗脫溶劑,,應(yīng)選擇對(duì)目標(biāo)物有合適保留強(qiáng)度的SPE柱;洗脫液洗脫強(qiáng)度不夠,,需提高洗脫液的洗脫強(qiáng)度,;洗脫液體積小,應(yīng)增加洗脫液體積,。
 
  -其他操作環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題,,如SPE前的提取效率不足,應(yīng)選擇合適的提取溶劑,;前處理步驟太繁瑣,目標(biāo)化合物損失,,需適當(dāng)簡(jiǎn)化前處理步驟,;目標(biāo)物揮發(fā)性太強(qiáng),在濃縮步驟損失,,應(yīng)調(diào)整濃縮方式,;目標(biāo)化合物在前處理溶劑中分解,需掌握目標(biāo)化合物的穩(wěn)定性,,調(diào)整溶劑體系,。
 
  高通量固相萃取儀在使用過程中,只要我們熟悉其操作原理,,注意日常維護(hù)保養(yǎng),,并針對(duì)出現(xiàn)的問題采取相應(yīng)的解決辦法,就能有效提高儀器的使用效率和實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,,為樣品前處理工作提供有力支持,。

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