高特異性：通過(guò)生物素與親和素（avidin/streptavidin）的強(qiáng)特異性結(jié)合，實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)分子的精確標(biāo)記,。

高靈敏度：Cyanine3（CY3）是一種高亮度的熒光染料,，能夠產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光信號(hào)，提高檢測(cè)靈敏度,。

穩(wěn)定性好：在多種實(shí)驗(yàn)條件下均能保持穩(wěn)定的熒光性能和結(jié)合能力,。

低光漂白性：CY3熒光團(tuán)具有較低的光漂白性，能夠在長(zhǎng)時(shí)間成像過(guò)程中保持穩(wěn)定的熒光強(qiáng)度,。   

基礎(chǔ)知識(shí)概述:   

英文名：Cy3-Biotin,，Cyanine3-Biotin 

分子式：C46H65ClN6O3S 

分子量：817.56 

規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：1mg、5mg,、10mg 

試劑廠(chǎng)家：陜西新研博美生物科技有限公司

相關(guān)應(yīng)用：

1.細(xì)胞成像與定位：

蛋白質(zhì)追蹤：標(biāo)記生物素化抗體,，通過(guò)鏈霉親和素-Cy3復(fù)合物定位細(xì)胞膜受體。

核酸檢測(cè)：用于熒光原位雜交（FISH）,，標(biāo)記生物素化DNA/RNA探針,。

2.流式細(xì)胞術(shù)：

在多色分析中與Cy5/FITC等染料兼容，同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞表面多種抗原,。

3.免疫組化：

結(jié)合特異性抗體,，實(shí)現(xiàn)對(duì)組織切片中特定抗原的熒光標(biāo)記和定位,。

4.分子互作研究：

在Pull-down實(shí)驗(yàn)中，CY3-Biotin標(biāo)記誘餌蛋白,，結(jié)合鏈霉親和素磁珠捕獲相互作用蛋白,。

5.活體與超分辨成像：

CY3耐光漂白特性適用于STORM/PALM等超分辨成像技術(shù)。

使用方法：

1.樣品準(zhǔn)備：

細(xì)胞/組織：固定或活細(xì)胞懸液（如流式細(xì)胞術(shù)需制備單細(xì)胞懸液）,。

生物分子：DNA,、RNA或蛋白質(zhì)需預(yù)先純化并調(diào)整濃度。

抗體預(yù)處理：若用于免疫組化,，需先使用生物素化一抗孵育樣本,。

2.標(biāo)記反應(yīng)：

稀釋試劑：將Cyanine3-Biotin用緩沖液（如PBS）稀釋至工作濃度（通常1–10 μg/mL）。

孵育條件：將稀釋后的Cyanine3-Biotin與樣品混合,，在避光環(huán)境中孵育（溫度：25–37℃,；時(shí)間：30分鐘–2小時(shí)）。

特異性結(jié)合：通過(guò)生物素-親和素系統(tǒng)靶向目標(biāo)分子（如蛋白質(zhì),、核酸或細(xì)胞表面受體）,。

3.洗滌：

用緩沖液（如PBS）洗滌3次，每次5分鐘,，去除未結(jié)合的Cyanine3-Biotin,，降低背景信號(hào)。

4.檢測(cè)：

熒光顯微鏡：直接觀(guān)察樣本,，使用550 nm激發(fā)光,，收集570 nm發(fā)射信號(hào)。

流式細(xì)胞術(shù)：分析細(xì)胞表面或內(nèi)部標(biāo)記物的表達(dá)分布,。

包裝：

質(zhì)量控制：95%+