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高效偶聯(lián):琥珀酰亞胺酯(NHS酯)是用于生物分子標(biāo)記的反應(yīng)基團(tuán),,可與蛋白質(zhì),、抗體、核酸等生物分子中的伯胺(-NH2)反應(yīng),,形成穩(wěn)定的酰胺鍵,。
熒光特性:作為一種紫色激發(fā)(405 nm)的熒光染料,其發(fā)射波長為551 nm,,適用于多參數(shù)分析,。
穩(wěn)定性高:形成的共價(jià)鍵與蛋白質(zhì)中的肽鍵一樣穩(wěn)定。
基礎(chǔ)知識概述:
中文名:Pacific Orange 琥珀酰亞胺酯
英文名:Pacific Orange NHS Ester,,Pacific Orange Succinimidyl Ester
分子式:C26H28N2O6
分子量:456.51
規(guī)格標(biāo)準(zhǔn):1mg,、5mg,、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
相關(guān)應(yīng)用:
1.流式細(xì)胞術(shù):
用于細(xì)胞表面標(biāo)記和細(xì)胞分選,可與多種抗體或蛋白質(zhì)偶聯(lián),。
例如,,用于標(biāo)記死細(xì)胞,,以便在流式細(xì)胞儀中區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞,。
2.熒光顯微鏡成像:
適用于熒光顯微鏡成像,可用于細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸的標(biāo)記,。
3.生物偶聯(lián):
通過NHS酯基團(tuán)與生物分子中的伯胺反應(yīng),,用于標(biāo)記和檢測生物分子。
使用方法:
1.標(biāo)記蛋白質(zhì)或抗體:
溶解試劑:將Pacific Orange Succinimidyl Ester溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中(如PBS),,制備工作濃度(通常為1-10 μg/mL),。
反應(yīng)條件:將標(biāo)記物與生物分子混合,在室溫下避光孵育30分鐘至1小時(shí),。
純化:使用凝膠過濾或透析去除未結(jié)合的染料,。
2.流式細(xì)胞術(shù)標(biāo)記:
細(xì)胞處理:將細(xì)胞收集并重懸于適當(dāng)?shù)木彌_液中。
染色:將Pacific Orange Succinimidyl Ester稀釋至適當(dāng)濃度(如5 μM),,加入細(xì)胞懸液中,,室溫孵育15分鐘。
洗滌:用PBS洗滌細(xì)胞,,去除未結(jié)合的染料,。
檢測:使用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長為405 nm,,發(fā)射波長為551 nm,。
3.熒光顯微鏡成像:
細(xì)胞固定與通透:用4%多聚甲醛固定細(xì)胞,然后用0.1% Triton X-100通透,。
染色:將Pacific Orange Succinimidyl Ester稀釋至適當(dāng)濃度(如1-10 μg/mL),,加入細(xì)胞中,室溫孵育30分鐘,。
洗滌:用PBS洗滌細(xì)胞,,去除未結(jié)合的染料。
觀察:使用熒光顯微鏡觀察,,激發(fā)波長為405 nm,,發(fā)射波長為551 nm。
包裝:
質(zhì)量控制:95%+
存儲條件:-20°C,,避光,,避濕
用途:僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,不用于診治
注意事項(xiàng):取用一定要干燥,,避免頻繁的溶解和凍干
取用:現(xiàn)配現(xiàn)用,,將包裝從冰箱中取出,,置于干燥器中緩慢升至室溫,打開瓶蓋,,取用,。取用后充入惰性氣體,封口膜封口,,擰緊瓶蓋裝入自封袋,,及時(shí)放入冰箱。
相關(guān)試劑:
Alexa fluor 647 NHS ester TEA
Cypate hydrochloride
Patent Blue V calcium salt
Fluorescein Biotin
4,5-Diaminofluorescein
Coumarin-3-carboxylic Acid
Cyanine5 NHS ester iodide
Vari Fluor 680 SE
Vari Fluor 488 SE
Phenazine ethosulfate
BODIPY FL L-Cystine
Nile blue chloride
Rhodamine 6G hydrazide
5(6)-Carboxy-2',7'-dichlorofluorescein
5-Carboxytetramethylrhodamine
供應(yīng)商:陜西新研博美生物科技有限公司
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