實(shí)驗(yàn)室里的寶藏:AF594 Ethyl NHS Ester大揭秘,!
高熒光亮度:AF594 是一種水溶性的紅熒光染料,,熒光亮度高,,光穩(wěn)定性好。
pH穩(wěn)定性:在pH 4-10范圍內(nèi)熒光不受影響,。
高標(biāo)記效率:通過(guò)NHS酯基團(tuán)與生物分子中的伯胺(-NH2)反應(yīng),,形成穩(wěn)定的酰胺鍵。
高水溶性:磺化結(jié)構(gòu)使其具有良好的水溶性,,減少蛋白質(zhì)聚集,。
基礎(chǔ)知識(shí)概述:
英文名:AF594 Ethyl NHS Ester
規(guī)格標(biāo)準(zhǔn):1mg、5mg,、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
相關(guān)應(yīng)用:
1.蛋白質(zhì)標(biāo)記:
可用于標(biāo)記抗體,、蛋白質(zhì)、肽段等生物分子,。
2.核酸標(biāo)記:
可用于標(biāo)記胺修飾的寡核苷酸,。
3.多色成像:
適用于多色熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)和超分辨成像技術(shù)(如dSTORM,、SIM,、STED等)。
使用方法:
1.標(biāo)記蛋白質(zhì):
準(zhǔn)備蛋白質(zhì)儲(chǔ)備液(溶液A):
將100 μL反應(yīng)緩沖液(如pH 8.5-9.0的1 M碳酸氫鈉溶液)與900 μL目標(biāo)蛋白溶液(濃度>2 mg/mL)混合,。
蛋白質(zhì)溶液的pH值應(yīng)為8.5±0.5,。
準(zhǔn)備染料儲(chǔ)備液(溶液B):
將無(wú)水DMSO加入AF594 NHS酯中,制備10 mM儲(chǔ)備溶液,。
染料儲(chǔ)備溶液應(yīng)在制備后立即使用,,避免長(zhǎng)期保存。
進(jìn)行偶聯(lián)反應(yīng):
使用10:1的摩爾比(染料/蛋白質(zhì))作為起始點(diǎn),,將5 μL染料儲(chǔ)備液加入到95 μL蛋白質(zhì)溶液中,。
在室溫下孵育30-60分鐘。
純化偶聯(lián)物:
使用Sephadex G-25柱純化染料-蛋白質(zhì)偶聯(lián)物,。
2.標(biāo)記寡核苷酸:
按照類似步驟進(jìn)行標(biāo)記,調(diào)整反應(yīng)條件以適應(yīng)寡核苷酸,。
包裝:
質(zhì)量控制:95%+
存儲(chǔ)條件:-20°C,,避光,避濕
用途:僅供科研實(shí)驗(yàn)使用,,不用于診治
注意事項(xiàng):取用一定要干燥,,避免頻繁的溶解和凍干
取用:現(xiàn)配現(xiàn)用,將包裝從冰箱中取出,,置于干燥器中緩慢升至室溫,,打開瓶蓋,取用,。取用后充入惰性氣體,,封口膜封口,,擰緊瓶蓋裝入自封袋,及時(shí)放入冰箱,。
相關(guān)試劑:
DHPDS disodium salt
5-FAM maleimide
Methyl Orange
Cy7 tyramide
Sulfo-Cyanine7 NHS ester TEA
1,6-Diphenylhexa-1,3,5-triene
Sulfo-Cy5-Mal
Alexa fluor 488 azide ditriethylamine
7-Dimethylaminocoumarin-4-acetic acid
Cy5-DSPE chloride
Calcein Blue
Bromocresol green
BODIPY TR Ceramide
Vari Fluor 680-Streptavidin
Thiazole orange dimer YOYO 1
Sunset Yellow FCF
供應(yīng)商:陜西新研博美生物科技有限公司
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