在細(xì)胞生物學(xué)研究中,，細(xì)胞計(jì)數(shù)是一項(xiàng)基礎(chǔ)但至關(guān)重要的實(shí)驗(yàn)步驟，直接影響實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性,。傳統(tǒng)的血球計(jì)數(shù)板（Hemocytometer）長期以來是實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)工具,，但隨著技術(shù)的發(fā)展,，自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀逐漸成為更高效,、更準(zhǔn)確的選擇。本文將對兩種方法進(jìn)行詳細(xì)對比,，以便實(shí)驗(yàn)者有更清晰的了解。

血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)方法與操作

1. 血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)

血球計(jì)數(shù)板（Hemocytometer）是一種特制載玻片,，通過精密蝕刻的網(wǎng)格系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的手動計(jì)數(shù)和濃度計(jì)算,。計(jì)數(shù)區(qū)由 9個1mm×1mm大方格 組成,，四角的大方格分成16個中型方格，中央大方格分成400個小格（一般是16個中格 x 25個小格）,。計(jì)數(shù)室深度固定為 0.1mm,，因此每個大方格的體積為 0.1μL或者0.1mm³（1mm×1mm×0.1mm）。

2. 細(xì)胞分布假設(shè)

通過統(tǒng)計(jì)特定區(qū)域內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量,，推算整體濃度（細(xì)胞數(shù)/mL）,。基于泊松分布原理,，要求細(xì)胞均勻分布且無聚集。如遇成團(tuán)細(xì)胞,，或者有細(xì)胞碎片，可能會影響到計(jì)數(shù)結(jié)果,。

3. 操作步驟

? 樣本制備：將細(xì)胞懸液稀釋至合適濃度（通常 10?–10? cells/mL）,。

? 加樣：取 10 µL 細(xì)胞懸液（如需染色,，混合10μL細(xì)胞懸液 + 10μL臺盼藍(lán)）柔吹打或倒置混勻,。用移液器將 10μL 混合液滴加至計(jì)數(shù)板蓋玻片邊緣，依靠毛細(xì)作用填充計(jì)數(shù)室,。液體應(yīng)自然鋪滿計(jì)數(shù)區(qū),，無氣泡（否則需重做）。

? 顯微鏡觀察：一般在 10× 或 20× 物鏡下觀察，計(jì)數(shù)中央大方格內(nèi)四角4個中方格的細(xì)胞數(shù)量,。為了防止相鄰的方格間重復(fù)統(tǒng)計(jì),，壓在方格線上的細(xì)胞遵循記上不記下，記左不記右的原則,。

? 計(jì)算濃度：                                       

以16個中格x 25個小格為例，四角的4個中格中一共有4x25 個（100個）小格,。

每小格細(xì)胞均數(shù)=100格細(xì)胞總數(shù) ÷ 100

細(xì)胞濃度（cell/mL）=小方格中細(xì)胞平均數(shù)x400 x 10 x 1000 x 稀釋倍數(shù)

其中：

中央大方格的細(xì)胞數(shù)=小方格細(xì)胞平均數(shù)x400 （0.1mm³）

x 10 轉(zhuǎn)換為 1mm³ 中的細(xì)胞數(shù)

x 1000 轉(zhuǎn)換為 1cm³（1mL）中的細(xì)胞數(shù)

血球計(jì)數(shù)板的計(jì)算公式本質(zhì)
將局部計(jì)數(shù)換算到 1 mL 體積，核心在于：

1. 數(shù)清細(xì)胞數(shù) × 稀釋倍數(shù),。

2. 除以實(shí)際計(jì)數(shù)的體積（通過選定方格區(qū)域和方格數(shù)）。

血球計(jì)數(shù)板的局限性

1. 主觀性強(qiáng)：依賴操作者的經(jīng)驗(yàn),，不同實(shí)驗(yàn)者可能得出不同結(jié)果。比如如果細(xì)胞較大,，有的實(shí)驗(yàn)者可能依然使用中央大方格,，有的實(shí)驗(yàn)者可能或選擇四角的4個大方格；壓線細(xì)胞的計(jì)數(shù)和成團(tuán)細(xì)胞的計(jì)數(shù)也可能因人而異,。

2. 耗時：每個樣本需 3–5 分鐘，重復(fù)計(jì)數(shù)更費(fèi)時,。

3. 誤差大：

· 細(xì)胞分布不均導(dǎo)致計(jì)數(shù)偏差,。

· 成團(tuán)細(xì)胞難以準(zhǔn)確分辨,。

· 活/死細(xì)胞判斷依賴臺盼藍(lán)染色，顯微鏡下顏色差異不大,，不容易區(qū)分，易受主觀影響,。

隨著成像技術(shù)的進(jìn)步,，細(xì)胞計(jì)數(shù)已實(shí)現(xiàn)自動化，從而在更短的時間和更少的努力下提供更高的準(zhǔn)確性和可靠性,。。

Countess 3 和 Countess 3 FL 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀與血球計(jì)數(shù)板的細(xì)胞計(jì)數(shù)對比

細(xì)胞計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性
主觀性導(dǎo)致的變異性
無論采用何種細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，依賴操作員的判斷都會導(dǎo)致結(jié)果誤差,。顯微鏡和某些自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的光強(qiáng)度和焦距設(shè)置具有主觀性,，可能導(dǎo)致結(jié)果不一致。操作員還需決定哪些對象應(yīng)納入或排除在細(xì)胞計(jì)數(shù)中,。如果測量細(xì)胞活性，操作員還需判斷哪些細(xì)胞應(yīng)計(jì)為死細(xì)胞或活細(xì)胞,。手動計(jì)數(shù)中的這些主觀變量可能導(dǎo)致不同操作員之間的結(jié)果差異較大。

Countess 3 和 Countess 3 FL 細(xì)胞計(jì)數(shù)器可以消除許多主觀變量并節(jié)省時間,。這些儀器采用先進(jìn)算法自動確定最佳焦距和光強(qiáng)度，并通過定量測量（如細(xì)胞大小,、亮度和圓度）來篩選細(xì)胞，而非依賴操作員的判斷,，從而減少主觀性誤差并提高樣本和用戶間的重復(fù)性（圖1）。

圖1. 血球計(jì)數(shù)板與 Countess 3 FL 儀器的用戶間變異性比較,。三名實(shí)驗(yàn)者員分別使用 Countess 3 FL 細(xì)胞計(jì)數(shù)器對 PBMC,、CHO-K1、HeLa、HEK293 和 Jurkat 細(xì)胞的單一樣本進(jìn)行計(jì)數(shù),，隨后使用血球計(jì)數(shù)板和顯微鏡手動計(jì)數(shù)。血球計(jì)數(shù)板的用戶間變異性顯著高于 Countess 3 FL 儀器,。

計(jì)數(shù)的細(xì)胞數(shù)量
在實(shí)際操作中,，許多研究人員未計(jì)數(shù)足夠數(shù)量的細(xì)胞,，導(dǎo)致細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果不可靠且標(biāo)準(zhǔn)差較高。為了節(jié)省手動計(jì)數(shù)時間,，許多用戶僅計(jì)數(shù)傳統(tǒng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀網(wǎng)格中的一兩個方格,。增加計(jì)數(shù)方格（即更大的面積）通常會提高結(jié)果的一致性,，但需要更多時間。Countess 3 和 Countess 3 FL 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在10秒的計(jì)數(shù)時間內(nèi)可覆蓋近四個傳統(tǒng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀方格的等效面積,，從而通過減少細(xì)胞分布變異的影響提高計(jì)數(shù)一致性（圖2）。

圖2. 計(jì)數(shù)面積,。Countess 3 儀器的計(jì)數(shù)面積與傳統(tǒng)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的對比,。

重復(fù)計(jì)數(shù)

無論采用何種細(xì)胞計(jì)數(shù)方法，多次重復(fù)計(jì)數(shù)均可減少樣本的變異性,。Countess 3 和 Countess 3 FL 儀器可在血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀完成一次計(jì)數(shù)（最多5分鐘）的時間內(nèi)完成多次重復(fù)計(jì)數(shù)，從而提高結(jié)果的準(zhǔn)確性和可信度,。由于時間限制,，尤其是在需要計(jì)數(shù)多個細(xì)胞樣本時,，重復(fù)計(jì)數(shù)常被手動計(jì)數(shù)方法忽略,。

成團(tuán)細(xì)胞

對于含有成團(tuán)細(xì)胞的樣本，手動計(jì)數(shù)和某些自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀難以獲得準(zhǔn)確結(jié)果,。成團(tuán)細(xì)胞的常見挑戰(zhàn)在于如何區(qū)分細(xì)胞邊界以確定團(tuán)塊中的細(xì)胞數(shù)量,。某些自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀僅能準(zhǔn)確計(jì)數(shù)不超過五個細(xì)胞的團(tuán)塊,。Countess 3 和 Countess 3 FL 儀器的先進(jìn)計(jì)數(shù)算法可清晰識別復(fù)雜細(xì)胞團(tuán)塊中的邊界，從而提供準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)（圖3）,。

除了識別團(tuán)塊中的單細(xì)胞外,，Countess 3 和 Countess 3 FL 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀還能檢測細(xì)胞聚集并測量樣本中的總聚集百分比,。屏幕顯示通過不同顏色區(qū)分團(tuán)塊和單細(xì)胞,，明場模式則可直觀確認(rèn)團(tuán)塊中的細(xì)胞。

圖3. 即使樣本中存在成團(tuán)細(xì)胞，仍能獲得準(zhǔn)確計(jì)數(shù),。Countess 3 細(xì)胞計(jì)數(shù)器的分割和計(jì)數(shù)算法成功解析了 U2OS 人骨肉瘤細(xì)胞樣本中的團(tuán)塊，并顯示樣本中的聚集百分比,。

熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)
熒光細(xì)胞計(jì)數(shù)相比非熒光方法具有多項(xiàng)優(yōu)勢：背景對比度更高,，便于識別和計(jì)數(shù)細(xì)胞；可使用不同熒光標(biāo)記區(qū)分和計(jì)數(shù)多種細(xì)胞類型,；減少將碎片誤判為細(xì)胞的可能性，從而提高結(jié)果準(zhǔn)確性,。

Countess 3 FL 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀配備兩個可選的可互換熒光通道，通過插入不同光立方收集顏色（提供超過20種光立方）,。儀器自動確定最佳照明條件，并支持兩種計(jì)數(shù)模式：明場和熒光,。明場模式利用明場圖像識別細(xì)胞并快速報告熒光陽性細(xì)胞百分比；熒光模式則通過一個或兩個熒光通道計(jì)數(shù)所有熒光對象,，并報告總計(jì)數(shù)及各通道的熒光細(xì)胞分布（圖4）。

圖4. 使用 Countess 3 FL 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和兩個光立方進(jìn)行熒光細(xì)胞計(jì)數(shù),。細(xì)胞經(jīng) Invitrogen™ ReadyCount™ 綠/紅細(xì)胞活性染色（貨號 A49905）后,，采用兩種方法計(jì)數(shù)：（A）明場模式下的 U2OS 細(xì)胞,，顯示所有識別細(xì)胞,；（B）熒光模式下的 PBMC，僅顯示熒光陽性細(xì)胞,。

節(jié)約成本
采用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的阻礙之一是專用一次性載玻片的持續(xù)成本,。血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可無限次清洗和重復(fù)使用,，而許多自動系統(tǒng)需依賴一次性載玻片。Countess 3 和 Countess 3 FL 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀設(shè)計(jì)兼容可重復(fù)使用的玻璃載玻片（圖5）,，同時也支持一次性載玻片。這一創(chuàng)新使實(shí)驗(yàn)室能夠在無需承擔(dān)高昂耗材成本的情況下采用先進(jìn)的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法,。

圖5. Countess 3 FL 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的可重復(fù)使用載玻片有助于降低耗材成本,。

節(jié)省時間
手動計(jì)數(shù)（最多5分鐘）與 Countess 3 和 Countess 3 FL 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（幾十秒）的時間差常被忽視,。若每天計(jì)數(shù)五張載玻片（每張兩個樣本）,，改用自動計(jì)數(shù)器搭配可重復(fù)使用載玻片每月可節(jié)省約10小時；使用一次性載玻片則可節(jié)省約15小時（圖6）,。這些時間可用于實(shí)驗(yàn)室的其他工作，從而顯著提升效率。

圖6. 從手動計(jì)數(shù)切換到自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀后,，每月預(yù)估節(jié)省的時間,。

可獲取的信息
血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀僅能提供樣本中的總細(xì)胞數(shù),、活細(xì)胞數(shù)和死細(xì)胞數(shù)。自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀還可獲取更多數(shù)據(jù),，如平均細(xì)胞大小、基于熒光強(qiáng)度或細(xì)胞大小的分布直方圖（圖7）,。Countess 3 和 Countess 3 FL 儀器可將數(shù)據(jù)以 CSV 格式保存至 USB 驅(qū)動器,，原始圖像和結(jié)果界面也可保存并傳輸至電腦,。

圖7. 結(jié)果顯示平均細(xì)胞大小和細(xì)胞大小分布,，有助于靶向特定細(xì)胞群。

Countess 3 和 Countess 3 FL 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀與血球計(jì)數(shù)板的細(xì)胞計(jì)數(shù)對比總結(jié)
自動細(xì)胞計(jì)數(shù)相比手動計(jì)數(shù)具有顯著優(yōu)勢,，包括更高的準(zhǔn)確性、簡化的工作流程和大幅節(jié)省的時間,。盡管存在這些優(yōu)勢，一次性載玻片的成本曾是采用自動細(xì)胞計(jì)數(shù)技術(shù)的障礙,。Countess 3 和 Countess 3 FL 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀兼容可重復(fù)使用載玻片,，降低了自動細(xì)胞計(jì)數(shù)的成本，使更多實(shí)驗(yàn)室能夠負(fù)擔(dān)這一先進(jìn)技術(shù),，從而獲得更快、更準(zhǔn)確的計(jì)數(shù)結(jié)果,。

對于需要 較高通量、高準(zhǔn)確性 的現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室,，Countess 3 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀 是比傳統(tǒng)血球計(jì)數(shù)板更優(yōu)的選擇,。它不僅解決了手動計(jì)數(shù)的固有缺陷（如主觀性和低效性）,，還通過 自動化,、熒光分析和可重復(fù)使用耗材 進(jìn)一步降低了實(shí)驗(yàn)成本,。

Countess 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀特點(diǎn)

引入人工智能，助力 Countess 3 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀像細(xì)胞生物學(xué)家那樣“思考”,，從而以簡單,、快速并且以自動方式生成準(zhǔn)確、可重復(fù)的計(jì)數(shù)結(jié)果,。其應(yīng)用范圍不僅限于計(jì)數(shù),，還擴(kuò)展到細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡,、轉(zhuǎn)染效率等方面。

準(zhǔn)確且精確

當(dāng)您使用自動化設(shè)備進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時,，它的準(zhǔn)確性和精確度和您一樣，甚至更佳,。準(zhǔn)確性意味著它會正確地進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),，精確度意味著無論操作者是誰,，它每次都會產(chǎn)生相同的結(jié)果,。

引入人工智能。Countess 3（明場）和 Countess 3 FL（明場和熒光）全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀值得信任,，它們使用深度學(xué)習(xí)神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)算法開發(fā),，每次都能進(jìn)行準(zhǔn)確的計(jì)數(shù)。該算法是由專業(yè)科學(xué)家根據(jù)包含數(shù)十種不同細(xì)胞類型和樣品的數(shù)百個培養(yǎng)板進(jìn)行細(xì)胞識別優(yōu)化而成,。

由此打造的細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能夠像細(xì)胞生物學(xué)家一樣“思考”,，即便是外周血單核細(xì)胞 (PBMC)、成團(tuán)細(xì)胞以及含細(xì)胞碎片等具有挑戰(zhàn)性的細(xì)胞樣品也可輕松勝任,。在高分辨率的 Countess 屏幕上，您可以看到正在計(jì)數(shù)的細(xì)胞以及未計(jì)數(shù)的細(xì)胞碎片,。

與手動血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)相比,，使用 Countess 3 進(jìn)行自動化細(xì)胞計(jì)數(shù)可以減少多種原因造成的數(shù)據(jù)錯誤和差異，包括操作者主觀性,、視覺疲勞,、計(jì)數(shù)區(qū)域差異和挑戰(zhàn)性樣本。Countess 3 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀兼具手動細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性和流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)的精確度,，而又無需流式細(xì)胞術(shù)所需的支出或培訓(xùn),。

機(jī)器學(xué)習(xí)算法可實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)，可與流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)媲美,。

使用 Attune NxT 流式細(xì)胞儀（紫色直方圖）,、Countess 3 FL 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀（紅色直方圖）以及血球計(jì)數(shù)板和顯微鏡（手動計(jì)數(shù),，灰色直方圖）對 CHO-K1,、HeLa、HEK293,、Jurkat 和人 PBMC 進(jìn)行了計(jì)數(shù),。 Countess 3 FL 儀器和血球計(jì)數(shù)板直方圖代表了 6 個獨(dú)立計(jì)數(shù)的平均值且高度一致,。手動計(jì)數(shù)的誤差（計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)差）要比 Countess 3 計(jì)數(shù)或流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)更寬。

擴(kuò)展計(jì)數(shù)區(qū)域,。為了節(jié)省手動計(jì)數(shù)的時間，許多實(shí)驗(yàn)人員只對血球計(jì)數(shù)板網(wǎng)格上的一個或兩個方塊進(jìn)行計(jì)數(shù),。計(jì)算更多方塊（更大區(qū)域）通常會獲得更準(zhǔn)確的結(jié)果,，但需要額外增加時間,。Countess 3 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀查詢的區(qū)域接近包含四個方塊,，通過減少細(xì)胞分布變化的影響提高了準(zhǔn)確性。并且 Countess 可以在不到 30 秒的時間內(nèi)完成自動聚焦,、自動亮度調(diào)整、圖像采集和計(jì)數(shù),。

手動細(xì)胞計(jì)數(shù)與自動化細(xì)胞計(jì)數(shù)的計(jì)數(shù)區(qū)域?qū)Ρ?/span>

Countess 3 的計(jì)數(shù)區(qū)域約為標(biāo)準(zhǔn)血球計(jì)數(shù)板的 3.8 倍。

處理成團(tuán)細(xì)胞和碎片,。由于難以辨別細(xì)胞之間的邊界,，因此成團(tuán)細(xì)胞難以進(jìn)行手動計(jì)數(shù)，甚至對自動化計(jì)數(shù)儀也具有挑戰(zhàn)性,。樣品含有碎片則進(jìn)一步增加了計(jì)數(shù)的復(fù)雜性,。Countess 3 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可以在進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時自動排除碎片,，其先進(jìn)的算法可以清楚地識別細(xì)胞團(tuán)塊內(nèi)的細(xì)胞邊界,，從而實(shí)現(xiàn)高度準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù),。

先進(jìn)的算法可實(shí)現(xiàn)對成團(tuán)細(xì)胞和樣品碎片的準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。

在明場模式下使用 Countess 3 FL 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀對微小且容易成團(tuán)的 RAW（小鼠小噬細(xì)胞）進(jìn)行了計(jì)數(shù),。計(jì)數(shù)算法能分辨出團(tuán)塊中的細(xì)胞,，正確圈出細(xì)胞并對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)?；罴?xì)胞具有綠色輪廓，死細(xì)胞則具有紅色輪廓,。碎片（未勾勒輪廓）會在計(jì)數(shù)時自動忽略。

快速

Countess 3 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能在不到30 秒的時間內(nèi)產(chǎn)生結(jié)果,。通過快速采集,、自動亮度調(diào)整,、自動聚焦和自動保存,，用戶需要做的就是加入樣品和插入細(xì)胞計(jì)數(shù)板。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的時間十分珍貴,，使用 Countess 3 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，即可快速完成細(xì)胞計(jì)數(shù)等多種分析,。              

除了計(jì)數(shù)速度飛快外,，Countess 3 系統(tǒng)還精簡了細(xì)胞計(jì)數(shù)的流程,，淘汰了許多與手動細(xì)胞計(jì)數(shù)相關(guān)的繁瑣步驟，其中包括亮度和聚焦調(diào)整,、計(jì)算細(xì)胞濃度以及制作報告,。節(jié)省了更多的時間。如果您的實(shí)驗(yàn)室每天計(jì)數(shù)五張玻片,，可以每月節(jié)省 10–15 小時（具體取決于所選玻片）,；如果您每天計(jì)數(shù) 25 張玻片，則可以節(jié)省 50–75 小時,！這些額外獲得的時間可以用來完成實(shí)驗(yàn)室的細(xì)胞培養(yǎng)處理和其他活動，在從手動細(xì)胞計(jì)數(shù)切換到全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)方面具有顯著優(yōu)勢,。

簡單

使用 Countess 3 或 Countess 3 FL 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀在明場模式下進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的過程簡單而又輕松。只需準(zhǔn)備計(jì)數(shù)板,，啟用快速捕獲和自動保存,，然后插入計(jì)數(shù)板,。其余工作交給儀器自動完成：亮度調(diào)整,、聚焦和計(jì)數(shù),。

自動化細(xì)胞計(jì)數(shù)不僅比手動計(jì)數(shù)操作更簡單，而且需要的操作培訓(xùn)也更少,。

靈敏的觸摸屏和直觀的界面,。直觀易用的Countess 3 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀軟件,。靈敏的 LCD 觸摸屏不需要外部計(jì)算機(jī),。該屏幕的 1280 x 800 分辨率提供高質(zhì)量的細(xì)胞圖像，可通過輔助工具進(jìn)行活/死細(xì)胞計(jì)數(shù),，使用 Countess 3 FL 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀，可實(shí)現(xiàn)熒光可視化,。顯示屏與整個儀器齊平，便于清潔,。

觸摸屏界面可以輕松顯示計(jì)數(shù)的細(xì)胞群，例如,，創(chuàng)建“門”，根據(jù)細(xì)胞大小,、亮度,、圓度和/或熒光強(qiáng)度從計(jì)數(shù)中排除不需要的細(xì)胞,。  通過選擇結(jié)果屏幕右上角的圖形圖標(biāo),，在直方圖或散點(diǎn)圖中查看您的細(xì)胞信息。當(dāng)使用滑塊控件調(diào)整門控參數(shù)時,，您可以實(shí)時查看直方圖或散點(diǎn)圖的變化,。為方便起見,，柱狀圖底部顯示平均細(xì)胞大小（用于明場計(jì)數(shù)）或熒光強(qiáng)度（用于熒光計(jì)數(shù)）,。

觸摸屏界面可以讓您從結(jié)果屏幕快速移動到直方圖和散點(diǎn)圖屏幕。 直方圖和散點(diǎn)圖可根據(jù)大小,、亮度和圓度顯示細(xì)胞群和設(shè)門。

直觀的設(shè)門界面

在此散點(diǎn)圖中,，細(xì)胞群被視為活（綠色）和死（紅色）群。軸的大小和圓度可以改變,。

在此直方圖中，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量和相對熒光單位 (RFU) 繪制細(xì)胞群,。使用右側(cè)的設(shè)門場和明場 (BF),，您可以使用設(shè)門菜單左側(cè)的滑塊根據(jù)大小,、亮度和圓度進(jìn)行設(shè)門。如果選擇德州紅 (TX Red) 或 GFP,，則可以執(zhí)行 RFU 強(qiáng)度的設(shè)門。

自動

使用 Countess 3 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀時,，不僅計(jì)數(shù)自動化完成，系統(tǒng)還會自動調(diào)整亮度和聚焦以獲得最佳對比度和分辨率,，并會自動保存細(xì)胞計(jì)數(shù)和數(shù)據(jù)（如果您選擇該選項(xiàng)）,。軟件還包括方便的內(nèi)置預(yù)稀釋和細(xì)胞傳代計(jì)算器，這些為細(xì)胞培養(yǎng)工作提供很大便利,。

預(yù)稀釋計(jì)算器

如果您的細(xì)胞樣品是濃縮樣品，您在計(jì)數(shù)前進(jìn)行了稀釋,，請?jiān)诖颂庉斎霕悠泛途彌_液體積，Countess 3 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀會自動重新計(jì)算樣品濃度,。該濃度還將考慮添加臺盼藍(lán)進(jìn)行明場活性測定。

細(xì)胞傳代計(jì)算器

如果您的下游實(shí)驗(yàn)確定特定濃度的樣本,，請?jiān)诖颂庉斎胨铦舛群腕w積、Countess 3 細(xì)胞計(jì)數(shù)儀將自動計(jì)算所需的細(xì)胞樣品和緩沖液或細(xì)胞培養(yǎng)基量,。計(jì)算時將自動包括您的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果。

保存結(jié)果和報告,。您可以將細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果,、細(xì)胞數(shù)據(jù)和圖像保存到 USB 驅(qū)動器,，或使用 Wi-Fi 保存到 Thermo Fisher™ Connect 云端平臺。結(jié)果保存為兼容電子表格的 CSV 文件,，細(xì)胞數(shù)據(jù)保存為流式細(xì)胞儀標(biāo)準(zhǔn) FCS 文件，而圖像可以保存為 TIFF,、PNG 或 JPG 格式。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)外隨時訪問這些文件——您可以在需要時隨時隨地獲得數(shù)據(jù),。

您還可以保存包含結(jié)果、圖像和設(shè)置可打印的 PDF 報告,。

不局限于計(jì)數(shù)的應(yīng)用

Countess 3 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的功能遠(yuǎn)非單純的細(xì)胞計(jì)數(shù),。利用臺盼藍(lán)染色，您可以評估樣本中活細(xì)胞的百分比,。或者,，使用 Countess 3 FL 系統(tǒng)檢測熒光染料,，進(jìn)行更復(fù)雜的活性分析,、檢測凋亡和細(xì)胞死亡的不同階段、測量轉(zhuǎn)染效率,，以及其他應(yīng)用,。

單細(xì)胞數(shù)據(jù)。Countess 3 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀可分析和存儲您樣品中每個細(xì)胞的數(shù)據(jù),。您可以放大任何細(xì)胞并顯示其大小、亮度,、圓度和熒光值,。您還可以流式細(xì)胞儀標(biāo)準(zhǔn) (FCS) 格式生成散點(diǎn)圖,，并在多種流式細(xì)胞儀軟件分析程序中分析,、轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)和重新設(shè)置數(shù)據(jù)格式。

多樣化的細(xì)胞系和細(xì)胞樣品,。Countess 3 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的計(jì)數(shù)算法已在一組不同的細(xì)胞樣本上進(jìn)行了訓(xùn)練,，您可以相信Countess 3 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能夠?qū)崿F(xiàn)高準(zhǔn)確度的細(xì)胞計(jì)數(shù),。下表列示了在 Countess 3 和 Countess 3 FL 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀上進(jìn)行了測試和驗(yàn)證的細(xì)胞類型和細(xì)胞系。

兼容可重復(fù)使用計(jì)數(shù)板

兩種 Countess 3 自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀均可使用 Invitrogen Countess 可重復(fù)使用計(jì)數(shù)板,，可重復(fù)計(jì)數(shù)板可避免一次性計(jì)數(shù)板的浪費(fèi),。即使您的實(shí)驗(yàn)室每天只使用五張計(jì)數(shù)板，通過使用可重復(fù)使用的計(jì)數(shù)板,，可顯著減少每年造成的浪費(fèi),。這使得實(shí)驗(yàn)室能夠負(fù)擔(dān)起細(xì)胞計(jì)數(shù)自動化的成本,，不會產(chǎn)生一次性計(jì)數(shù)板的持續(xù)性花費(fèi)。

Invitrogen Countess 細(xì)胞計(jì)數(shù)板一次性計(jì)數(shù)板,，無需像可重復(fù)計(jì)數(shù)板那樣進(jìn)行清潔,，然后在細(xì)胞樣品的處理間隔等待其干燥,。需要處理大量細(xì)胞樣品，為了減少污染風(fēng)險或處理有害樣本時,，一次性計(jì)數(shù)板使用方便，可快速處理細(xì)胞樣品,。

符合 21 CFR 第 11 部分要求的支持軟件

Countess SAE 軟件解決方案是一個選配軟件模塊，支持電子記錄保存,，符合美國食品和藥品監(jiān)督管理局（FDA）的“電子記錄和簽名規(guī)則”,、“聯(lián)邦法規(guī)”第 21 篇第 11 部分（21 CFR 第 11 部分）的要求。該法規(guī)對使用電子文件代替紙質(zhì)文件做出了規(guī)定,。

21 CFR 第 11 部分合規(guī)性包括規(guī)程要求和技術(shù)要求。

· 規(guī)程要求是最終用戶機(jī)構(gòu)所制定的標(biāo)準(zhǔn)操作程序,。

· 技術(shù)要求是所使用的合規(guī)性管理軟件的功能特征。

僅滿足技術(shù)要求并不能保證 21 CFR 第 11 部分合規(guī)性。合規(guī)性由機(jī)構(gòu)的工作流程和所用系統(tǒng)兩者決定,。

軟件的功能包括限制未經(jīng)授權(quán)的用戶,、密碼策略和失效日期,、定義的用戶權(quán)限和角色,、通過審計(jì)日志,、審計(jì)報告以及機(jī)載電子簽名工作流程跟蹤所有數(shù)據(jù)更改。購買 Countess SAE 軟件許可證后,，所有 Countess 3 和 Countess 3 FL 全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀都可以在 SAE 模式下運(yùn)行,。要實(shí)現(xiàn) 21 CFR 第 11 部分合規(guī)性，機(jī)構(gòu)還需要以合規(guī)方式制定和記錄標(biāo)準(zhǔn)操作程序,。

#細(xì)胞計(jì)數(shù)# #細(xì)胞計(jì)數(shù)儀# #自動細(xì)胞計(jì)數(shù)# #全自動細(xì)胞計(jì)數(shù)儀#

賽默飛世爾科技（中國）有限公司