購(gòu)買 QPCR 實(shí)時(shí)熒光定量?jī)x時(shí),，通常需要重點(diǎn)關(guān)注以下幾類參數(shù)：

一,、熒光檢測(cè)通道相關(guān)參數(shù)

1,、通道數(shù)量：

不同的熒光染料需要對(duì)應(yīng)不同的檢測(cè)通道,，常見的如 FAM、VIC,、ROX 等染料,。如果實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常需要同時(shí)檢測(cè)多種目標(biāo)基因，或者要進(jìn)行多重?zé)晒舛?PCR 檢測(cè),，那就需要選擇通道數(shù)量較多的儀器,，比如具有 4 通道、5 通道甚至更多通道的設(shè)備,，以滿足多樣本,、多指標(biāo)同時(shí)檢測(cè)的需求,。

2、檢測(cè)靈敏度：

對(duì)于低豐度的基因模板,，儀器能否精準(zhǔn)檢測(cè)到熒光信號(hào)就很關(guān)鍵,。靈敏度高的儀器可以檢測(cè)到極微量的核酸擴(kuò)增產(chǎn)生的熒光變化，一般以能檢測(cè)到的拷貝數(shù)來衡量,，例如有的儀器可以檢測(cè)到單拷貝甚至更低的起始模板量,，這在檢測(cè)痕量核酸時(shí)優(yōu)勢(shì)明顯。

3,、熒光檢測(cè)線性范圍：

它反映了儀器在多大的核酸濃度區(qū)間內(nèi),，熒光信號(hào)強(qiáng)度與模板濃度能保持良好的線性關(guān)系。較寬的線性范圍意味著在檢測(cè)高濃度和低濃度樣本時(shí)都能準(zhǔn)確進(jìn)行定量分析,，例如線性范圍達(dá)到 6 - 8 個(gè)數(shù)量級(jí)的儀器,，可適應(yīng)更多不同濃度樣本的檢測(cè)需求，無需對(duì)樣本過度稀釋或濃縮,。

二,、溫度控制相關(guān)參數(shù)

1、升降溫速率：

快速的升降溫有助于縮短整個(gè) PCR 反應(yīng)的時(shí)間,，提高實(shí)驗(yàn)效率,。比如升降溫速率達(dá)到每秒 3℃ - 5℃甚至更高的儀器，相比速率低的設(shè)備,，可以在更短時(shí)間內(nèi)完成熱循環(huán)過程,，尤其在處理大量樣本時(shí)能節(jié)省不少時(shí)間。

2,、溫度準(zhǔn)確性和均勻性：

溫度準(zhǔn)確性是指儀器實(shí)際達(dá)到的溫度與設(shè)定溫度的偏差程度,，一般要求偏差在較小范圍內(nèi)，如 ±0.1℃ - ±0.5℃,，這對(duì)于確保 PCR 反應(yīng)在準(zhǔn)確的退火,、延伸等溫度條件下進(jìn)行很重要。溫度均勻性則關(guān)乎儀器不同孔位之間溫度的一致性,，要保證各個(gè)反應(yīng)孔的溫度都能均勻穩(wěn)定,，避免因溫度差異導(dǎo)致擴(kuò)增效率不一致，影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性,。

三,、樣本通量相關(guān)參數(shù)

1、反應(yīng)模塊規(guī)格：

常見的有 96 孔,、384 孔等規(guī)格,。如果日常實(shí)驗(yàn)樣本量較大，選擇 384 孔的模塊可以一次性處理更多樣本，減少批次間的誤差,，提高整體檢測(cè)效率；而如果樣本量相對(duì)較少,，96 孔模塊可能就足以滿足需求,，且相對(duì)更節(jié)省試劑等耗材成本。

2,、是否支持自動(dòng)化程度：

部分高級(jí)儀器可以與自動(dòng)化液體處理工作站等設(shè)備聯(lián)用,，實(shí)現(xiàn)樣本加樣、反應(yīng)體系配置等流程的自動(dòng)化,，極大提高工作效率,，適合高通量、大規(guī)模檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室使用,。

四,、軟件分析功能相關(guān)參數(shù)

1、數(shù)據(jù)分析能力：

好的儀器配套軟件應(yīng)具備多種定量分析方法,，比如絕對(duì)定量,、相對(duì)定量（如采用 ΔΔCt 法等），還能進(jìn)行熔解曲線分析,、擴(kuò)增效率計(jì)算等,，同時(shí)可以方便地生成直觀的圖表，如擴(kuò)增曲線,、熔解曲線等圖形展示,，便于研究者直接觀察和分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2,、兼容性和拓展性：

軟件要能兼容常見的數(shù)據(jù)格式,，方便與其他實(shí)驗(yàn)室管理系統(tǒng)或數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)交互，并且具備一定的拓展功能,，例如后續(xù)可以根據(jù)新的實(shí)驗(yàn)需求添加新的分析模塊等,。