DMEM培養(yǎng)基(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,其特點可歸納如下:
一,、營養(yǎng)均衡且濃度高
氨基酸含量豐富:DMEM培養(yǎng)基中的氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基(EMEM)的2倍,,且含有非必需氨基酸(如甘氨酸),,為細(xì)胞提供充足的蛋白質(zhì)合成原料。
維生素含量高:維生素含量為EMEM的4倍,,參與細(xì)胞代謝的多種關(guān)鍵途徑,,如能量轉(zhuǎn)換、抗氧化反應(yīng)等,。
碳水化合物與無機鹽:含有高濃度的葡萄糖(高糖型達(dá)4500mg/L,,低糖型為1000mg/L)、無機鹽(如鈣,、鎂,、鐵離子)及微量元素,,滿足細(xì)胞生長和代謝的多樣化需求。
二,、pH值穩(wěn)定
緩沖系統(tǒng):DMEM培養(yǎng)基使用碳酸氫鈉作為緩沖系統(tǒng),,配合5%的CO?氣體環(huán)境,可有效維持培養(yǎng)基的pH值在7.2至7.4之間,,這一范圍對大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞的生長至關(guān)重要,。
丙酮酸與乳酸:部分配方中添加丙酮酸和乳酸作為輔助緩沖劑,進(jìn)一步增強pH穩(wěn)定性,,適用于開放式培養(yǎng)系統(tǒng)(如培養(yǎng)皿),。
三、類型多樣,,適用性廣
高糖型DMEM:
葡萄糖濃度高:提供更高能量代謝支持,,促進(jìn)癌細(xì)胞、神經(jīng)元等高代謝需求細(xì)胞的貼壁與增殖,。
適用場景:適用于生長較快,、附著較困難的腫瘤細(xì)胞(如骨髓瘤細(xì)胞)、轉(zhuǎn)化細(xì)胞及高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng),。
低糖型DMEM:
葡萄糖濃度低:避免過量糖代謝壓力,,降低乳酸積累,延長培養(yǎng)基更換周期,。
適用場景:適用于原代成纖維細(xì)胞,、血管內(nèi)皮細(xì)胞等常規(guī)培養(yǎng),以及需要控制糖代謝的實驗,。
特殊配方:
無丙酮酸鈉版本:適用于對丙酮酸敏感的細(xì)胞或?qū)嶒灐?br />
無谷氨酰胺版本:滿足特定實驗需求,,如谷氨酰胺合成酶缺陷細(xì)胞的培養(yǎng)。
含HEPES版本:增強緩沖能力,,減少CO?依賴,,適用于密閉培養(yǎng)環(huán)境(如培養(yǎng)瓶)。
四,、成分可調(diào)節(jié),,靈活性高
補充物添加:DMEM培養(yǎng)基本身缺乏蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和生長因子等必需成分,,需通過添加胎牛血清(FBS),、生長因子、抗生素等補充物形成完整培養(yǎng)體系,。常規(guī)培養(yǎng)通常需添加10%的FBS,。
定制化配方:研究人員可根據(jù)實驗需求選擇合適的DMEM配方,或調(diào)整補充物種類和濃度,,以滿足特定細(xì)胞類型或?qū)嶒灄l件的要求,。
五,、質(zhì)量穩(wěn)定,可靠性高
嚴(yán)格質(zhì)量控制:DMEM培養(yǎng)基經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控制和優(yōu)化,,確保成分穩(wěn)定,、無菌、無內(nèi)毒素,,為細(xì)胞培養(yǎng)提供可靠的基礎(chǔ),。
物理性質(zhì)穩(wěn)定:過濾除菌后呈淺黃色澄清液體,內(nèi)毒素含量≤1 EU/mL,,滲透壓在295~340 mOsm/kg·H?O之間,,符合細(xì)胞生長的理想條件。
六,、應(yīng)用領(lǐng)域廣泛
基礎(chǔ)研究:支持原代細(xì)胞,、干細(xì)胞、轉(zhuǎn)化細(xì)胞等多種哺乳動物細(xì)胞的培養(yǎng),,用于細(xì)胞生物學(xué),、分子生物學(xué)等基礎(chǔ)研究。
生物醫(yī)藥生產(chǎn):作為病毒宿主細(xì)胞(如Vero細(xì)胞)的擴增基質(zhì),,用于疫苗生產(chǎn),;支持單克隆抗體、重組蛋白等生物藥物的生產(chǎn),。
藥物篩選與毒理學(xué)研究:評估化合物對細(xì)胞的影響,,為藥物研發(fā)提供實驗基礎(chǔ)。
基因編輯與轉(zhuǎn)染實驗:確保細(xì)胞在基因操作前后的良好生長狀態(tài),,提高實驗成功率,。
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