IEF考馬斯亮藍(lán)染色液試劑盒
產(chǎn)品貨號:T15149
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
產(chǎn)品簡介:
考馬斯亮藍(lán)染色液(Commassie?Blue?Staining?Solution)是以考馬斯亮藍(lán)R250為染料可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳膠的常規(guī)染色或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測,。
等點聚焦染色后考馬斯亮藍(lán)染色又稱IEF考馬斯亮藍(lán)染色,一般與三溶液及脫色液聯(lián)合使用,。本染色液經(jīng)過改良,,不含有毒的甲醇,但含有刺激性氣味的乙酸,。
產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品名稱 | 600ml | 儲存條件 |
試劑(A):考馬斯亮藍(lán)染色液 | 100ml | 室溫 |
試劑(B):硫酸銅溶液 | 1ml | 室溫 |
臨用前,,按試劑(A):(B)=99:1的比例混合,即為IEF考馬斯亮藍(lán)染色液,。 | ||
試劑(C):IEF脫色液 | 500ml | 室溫 |
自備材料:
1. 20%三水溶液
2. 水平或側(cè)擺搖床
3. 蒸餾水
4. 20%甘油水溶液
1. 操作步驟:
臨用前,,取適量的考馬斯亮藍(lán)染色液和硫酸銅溶液,按99:1的比例混合,即為IEF考馬斯亮藍(lán)染色液,,即配即用,。
2. 等點聚焦電泳結(jié)束后,取凝膠放入5-10倍體積的20%三水溶液,,置于水平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動,。
3. 傾去20%三水溶液,加入10倍體積的IEF脫色液,,置于水平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動,。
4. 傾去IEF脫色液,加入新鮮配制的IEF考馬斯亮藍(lán)染色液,,置于水平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動以上(膠厚度小于等于1mm)或1h以上(膠厚度大于1mm),。
5. 傾去染色液,用蒸餾水沖洗,。
6. 加入適量常規(guī)脫色液,,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠;推薦常規(guī)脫色液的配方是:40%乙醇,,10%乙酸,,50%蒸餾水。
7. 置于水平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動,,室溫脫色4~24h,,期間更換脫色液2~4次,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,,并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期,,通常蛋白條帶在脫色后即可出現(xiàn)。
8. 完成脫色后把凝膠保存在水中,,用于后續(xù)的拍照等,。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,,可以把膠保存在含20%甘油水溶液中,,長期保存可以制備干膠。
注意事項:
1. 染色時如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱,,可以大大加快染色速度,。但加熱時宜盡量避免沸騰,以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂,。
2. 脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色,;脫色時間過長也會導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。
3. 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
有效期:12個月有效,。
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