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IEF考馬斯亮藍(lán)染色液試劑盒

來源:上海尚寶生物科技有限公司   2025年07月07日 10:39  

IEF考馬斯亮藍(lán)染色液試劑盒

產(chǎn)品貨號:T15149

產(chǎn)品規(guī)格:100ml

產(chǎn)品簡介:

考馬斯亮藍(lán)染色液(Commassie?Blue?Staining?Solution)是以考馬斯亮藍(lán)R250為染料可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳膠的常規(guī)染色或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測,。

等點聚焦染色后考馬斯亮藍(lán)染色又稱IEF考馬斯亮藍(lán)染色,一般與三溶液及脫色液聯(lián)合使用,。本染色液經(jīng)過改良,,不含有毒的甲醇,但含有刺激性氣味的乙酸,。

產(chǎn)品組成

產(chǎn)品名稱

600ml

儲存條件

試劑(A):考馬斯亮藍(lán)染色液

100ml

室溫

試劑(B):硫酸銅溶液

1ml

室溫

臨用前,,按試劑(A):(B)=99:1的比例混合,即為IEF考馬斯亮藍(lán)染色液,。

試劑(C):IEF脫色液

500ml

室溫

自備材料:

1. 20%三水溶液

2. 水平或側(cè)擺搖床

3. 蒸餾水

4. 20%甘油水溶液

1. 操作步驟:
臨用前,,取適量的考馬斯亮藍(lán)染色液和硫酸銅溶液,按99:1的比例混合,即為IEF考馬斯亮藍(lán)染色液,,即配即用,。

2. 等點聚焦電泳結(jié)束后,取凝膠放入5-10倍體積的20%三水溶液,,置于水平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動,。

3. 傾去20%三水溶液,加入10倍體積的IEF脫色液,,置于水平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動,。

4. 傾去IEF脫色液,加入新鮮配制的IEF考馬斯亮藍(lán)染色液,,置于水平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動以上(膠厚度小于等于1mm)1h以上(膠厚度大于1mm),。

5. 傾去染色液,用蒸餾水沖洗,。

6. 加入適量常規(guī)脫色液,,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠;推薦常規(guī)脫色液的配方是:40%乙醇,,10%乙酸,,50%蒸餾水。

7. 置于水平或側(cè)擺搖床上緩慢搖動,,室溫脫色424h,,期間更換脫色液24次,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,,并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期,,通常蛋白條帶在脫色后即可出現(xiàn)。

8. 完成脫色后把凝膠保存在水中,,用于后續(xù)的拍照等,。保存在水中的凝膠會發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,,可以把膠保存在含20%甘油水溶液中,,長期保存可以制備干膠

注意事項: 

1. 染色時如果把凝膠和染色液一起放置在微波爐中適當(dāng)加熱,,可以大大加快染色速度,。但加熱時宜盡量避免沸騰,以免出現(xiàn)因暴沸而導(dǎo)致的凝膠碎裂,。

2. 脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色,;脫色時間過長也會導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。

3. 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

有效期12個月有效,。


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