MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 產(chǎn)品技術(shù)
高效的 DNA 純化能力:該產(chǎn)品能夠高效去除 PCR 反應(yīng)體系中的各種雜質(zhì),,包括未摻入的 dNTPs、引物,、引物二聚體以及鹽類(lèi)等,。通過(guò)優(yōu)化的磁珠結(jié)合與洗脫條件,可實(shí)現(xiàn)對(duì) DNA 片段的高效捕獲和純化,,使最終獲得的 DNA 樣本純度高,,A260/A280 比值通常在 1.8 - 2.0 之間,滿足絕大多數(shù)下游實(shí)驗(yàn)對(duì) DNA 純度的嚴(yán)格要求,。
高回收率:對(duì)于長(zhǎng)度大于 100bp 的 PCR 擴(kuò)增子,,MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 具有出色的回收率。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下,,回收率可穩(wěn)定保持在較高水平,,確保珍貴的 DNA 樣本不被浪費(fèi),為低起始量樣本的后續(xù)研究提供了有力保障,。
靈活的操作方式:該產(chǎn)品既適用于手動(dòng)操作,,方便科研人員在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中進(jìn)行小批量樣本的處理;又可適配多種自動(dòng)化液體處理工作站,,如 Beckman,、Hamilton、Tecan,、Caliper,、Perkin Elmer、Agilent 和 Eppendorf 等品牌的設(shè)備,。用戶可根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備條件和樣本通量需求,,選擇合適的操作方式。通過(guò)與自動(dòng)化設(shè)備結(jié)合,,能夠?qū)崿F(xiàn)高通量的 PCR 產(chǎn)物純化,,大大提高實(shí)驗(yàn)效率,滿足大規(guī)?;蚪M學(xué)研究、臨床診斷樣本批量處理等應(yīng)用場(chǎng)景的需求,。
穩(wěn)定的性能表現(xiàn):產(chǎn)品中的磁珠性能穩(wěn)定,,在不同批次之間具有良好的一致性。無(wú)論是在手動(dòng)操作還是自動(dòng)化平臺(tái)上使用,,都能保證穩(wěn)定的 DNA 純化效果和可靠的片段大小選擇能力,。這使得實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有高度的可重復(fù)性,為科研工作的準(zhǔn)確性和可靠性提供了堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ),。
無(wú)需離心和過(guò)濾:傳統(tǒng)的 DNA 純化方法常依賴離心或過(guò)濾等操作步驟,,這些過(guò)程不僅耗時(shí)費(fèi)力,,還可能導(dǎo)致 DNA 樣本的損失或交叉污染。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 采用磁珠分離技術(shù),,避免了離心和過(guò)濾步驟,,簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)流程,減少了實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中引入誤差的可能性,,同時(shí)也降低了樣本間交叉污染的風(fēng)險(xiǎn),,有助于獲得更高質(zhì)量的 DNA 純化產(chǎn)物。
準(zhǔn)備工作:在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,,確保所有實(shí)驗(yàn)器材清潔無(wú)污染,準(zhǔn)備好 PCR 反應(yīng)后的產(chǎn)物,、MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 試劑(包括磁珠懸浮液,、結(jié)合緩沖液、洗滌緩沖液和洗脫緩沖液),、移液器及配套吸頭,、磁力架、離心管等,。將磁珠懸浮液充分混勻,,使其處于均勻分散狀態(tài)。
結(jié)合步驟:取適量 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物轉(zhuǎn)移至離心管中,,按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的比例加入結(jié)合緩沖液,,充分混勻。隨后加入適量的磁珠懸浮液,,再次充分混勻,,確保磁珠與 DNA 能夠充分接觸結(jié)合。將離心管置于室溫下孵育一定時(shí)間(通常為 5 - 10 分鐘),,使 DNA 與磁珠之間的結(jié)合反應(yīng)達(dá)到平衡,。
分離與洗滌:將離心管放置在磁力架上,靜置 1 - 2 分鐘,,待磁珠在外加磁場(chǎng)作用下聚集到離心管一側(cè)后,,小心吸取并移除上清液,注意避免吸頭觸及磁珠沉淀,。向離心管中加入適量洗滌緩沖液,,輕輕晃動(dòng)離心管或用移液器吹打,使磁珠重新懸浮,,以洗滌磁珠表面殘留的雜質(zhì),。再次將離心管置于磁力架上,靜置 1 - 2 分鐘,,移除上清液,。重復(fù)洗滌步驟 1 - 2 次,,確保磁珠表面的雜質(zhì)被清除。
洗脫:將離心管從磁力架上取出,,加入適量低離子強(qiáng)度的洗脫緩沖液或去離子水,,輕輕吹打使磁珠重新懸浮,將離心管置于室溫下孵育 2 - 5 分鐘,,使 DNA 從磁珠表面充分洗脫下來(lái),。然后將離心管再次放置在磁力架上,靜置 1 - 2 分鐘,,待磁珠聚集后,,將含有純化 DNA 的上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中,即為純化后的 PCR 產(chǎn)物,,可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn),。
設(shè)備設(shè)置與試劑準(zhǔn)備:根據(jù)所使用的自動(dòng)化液體處理工作站型號(hào),按照其操作手冊(cè)進(jìn)行設(shè)備初始化和參數(shù)設(shè)置,。將 MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 試劑分別裝載到工作站的相應(yīng)試劑槽中,,確保試劑管路連接正確且無(wú)氣泡。準(zhǔn)備好 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物板和用于收集純化后 DNA 的微孔板,。
方法編輯:在自動(dòng)化工作站的控制軟件中,,根據(jù) MAGBIO HighPrep PCR 的操作原理和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū),編輯詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法,。包括設(shè)置各試劑的添加體積,、混合方式與時(shí)間、孵育時(shí)間,、磁力分離時(shí)間以及洗脫步驟等參數(shù),。確保方法設(shè)置符合實(shí)驗(yàn)需求和設(shè)備性能。
運(yùn)行實(shí)驗(yàn):將 PCR 反應(yīng)產(chǎn)物板放置在工作站的指定位置,,啟動(dòng)自動(dòng)化程序,。工作站將按照預(yù)設(shè)方法依次完成 PCR 產(chǎn)物與結(jié)合緩沖液、磁珠懸浮液的混合,,孵育促進(jìn) DNA 與磁珠結(jié)合,,在磁力架上進(jìn)行磁珠分離與上清移除,洗滌磁珠以及最后洗脫 DNA 等一系列操作步驟,。實(shí)驗(yàn)完成后,,工作站將自動(dòng)收集含有純化 DNA 的微孔板,可直接用于下游實(shí)驗(yàn)分析,。
在使用磁珠懸浮液前,務(wù)必充分混勻,,以保證每次取用的磁珠量準(zhǔn)確且均勻,。但需注意避免劇烈振蕩,,防止磁珠團(tuán)聚或損壞。
移液器操作要準(zhǔn)確,、規(guī)范,,確保各試劑添加量的準(zhǔn)確性,尤其是磁珠懸浮液的加入量,,會(huì)直接影響 DNA 的結(jié)合與純化效果,。
在手動(dòng)操作的洗滌步驟中,吸取上清液時(shí)要小心謹(jǐn)慎,,避免吸走磁珠沉淀,,導(dǎo)致 DNA 損失。在自動(dòng)化操作中,,要定期檢查移液器吸頭的安裝情況,,防止吸頭脫落或堵塞影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
不同來(lái)源的 PCR 產(chǎn)物可能在濃度,、片段大小分布等方面存在差異,,在進(jìn)行大規(guī)模實(shí)驗(yàn)前,建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),,優(yōu)化磁珠用量,、結(jié)合與洗脫條件等參數(shù),以獲得最佳的純化效果,。
產(chǎn)品中的各種緩沖液應(yīng)在規(guī)定的儲(chǔ)存條件下保存,,避免污染和變質(zhì)。一旦發(fā)現(xiàn)緩沖液出現(xiàn)渾濁,、沉淀或顏色變化等異常情況,,應(yīng)停止使用。
下一代測(cè)序(NGS)文庫(kù)制備:在 NGS 技術(shù)中,,高質(zhì)量的 DNA 文庫(kù)是獲得準(zhǔn)確測(cè)序結(jié)果的前提。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 可用于 PCR 擴(kuò)增后的文庫(kù)片段純化,,有效去除文庫(kù)制備過(guò)程中產(chǎn)生的引物二聚體,、未反應(yīng)的 dNTPs 等雜質(zhì),確保文庫(kù)中 DNA 片段的純度和完整性,。通過(guò)精確的片段大小選擇能力,,能夠篩選出符合測(cè)序要求的 DNA 片段,提高文庫(kù)質(zhì)量,,為全基因組測(cè)序,、外顯子組測(cè)序、轉(zhuǎn)錄組測(cè)序等各類(lèi) NGS 應(yīng)用提供高質(zhì)量的 DNA 樣本,。
Sanger 測(cè)序:在傳統(tǒng)的 Sanger 測(cè)序?qū)嶒?yàn)中,,PCR 產(chǎn)物的純化是關(guān)鍵步驟之一,。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 能夠高效去除 PCR 反應(yīng)體系中的雜質(zhì),獲得高純度的 DNA 模板,,可顯著提高 Sanger 測(cè)序的準(zhǔn)確性和成功率,。尤其在對(duì)未知基因片段進(jìn)行測(cè)序或需要對(duì)測(cè)序結(jié)果進(jìn)行精確分析時(shí),該產(chǎn)品能夠有效減少測(cè)序峰圖中的雜峰干擾,,使測(cè)序結(jié)果更加清晰可靠,。
基因突變檢測(cè)與基因分型:在臨床分子診斷領(lǐng)域,基因突變檢測(cè)和基因分型對(duì)于疾病的早期診斷,、個(gè)性化治療方案制定以及遺傳疾病的篩查具有重要意義,。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 可用于從患者樣本(如血液、組織,、唾液等)中提取的 DNA 進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增后的產(chǎn)物純化,。通過(guò)去除雜質(zhì),提高 DNA 樣本的純度,,能夠更準(zhǔn)確地檢測(cè)出基因突變位點(diǎn),,為疾病的診斷和治療提供可靠依據(jù)。例如,,在腫瘤基因檢測(cè)中,,該產(chǎn)品可幫助檢測(cè)腫瘤相關(guān)基因的突變情況,指導(dǎo)臨床醫(yī)生選擇合適的靶向治療藥物,。
病原體檢測(cè):對(duì)于病原體(如病毒,、細(xì)菌、真菌等)的 PCR 檢測(cè),,MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 能夠有效純化 PCR 擴(kuò)增產(chǎn)物,,提高檢測(cè)的靈敏度和特異性。在臨床樣本中,,病原體的含量往往較低,,且可能存在多種雜質(zhì)干擾 PCR 反應(yīng)和檢測(cè)結(jié)果。使用該產(chǎn)品進(jìn)行 PCR 產(chǎn)物純化,,可去除樣本中的雜質(zhì),,富集病原體的 DNA 片段,從而更準(zhǔn)確地檢測(cè)出病原體的存在及其種類(lèi),,為感染性疾病的診斷和治療提供有力支持,。
重組蛋白表達(dá)與純化過(guò)程中的質(zhì)量控制:在生物制藥過(guò)程中,利用基因工程技術(shù)表達(dá)重組蛋白是常見(jiàn)的生產(chǎn)方式,。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 可用于對(duì)重組蛋白表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程進(jìn)行監(jiān)控,,通過(guò)對(duì) PCR 擴(kuò)增的目的基因片段進(jìn)行純化,確保載體構(gòu)建的準(zhǔn)確性和純度。在重組蛋白表達(dá)后的純化過(guò)程中,,該產(chǎn)品也可用于檢測(cè)和去除可能存在的宿主 DNA 殘留,,保證重組蛋白產(chǎn)品的質(zhì)量安全,符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)的要求,。
疫苗研發(fā)與生產(chǎn):在疫苗研發(fā)和生產(chǎn)過(guò)程中,對(duì)核酸疫苗或病毒載體疫苗的制備需要高質(zhì)量的 DNA 或 RNA 模板,。MAGBIO HighPrep PCR AC - 60050 可用于純化 PCR 擴(kuò)增的相關(guān)核酸片段,,為疫苗的研發(fā)和生產(chǎn)提供純凈的核酸原料,確保疫苗的有效性和安全性,。同時(shí),,在疫苗生產(chǎn)過(guò)程中的質(zhì)量控制環(huán)節(jié),該產(chǎn)品可用于檢測(cè)和分析疫苗中可能存在的核酸雜質(zhì),,保障疫苗產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定性,。
相關(guān)產(chǎn)品
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