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表皮葡萄球菌的致病性與診斷方法及實驗室檢查,!

來源:北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司   2025年07月04日 16:11  

表皮葡萄球菌Staphylococcus)是一群革蘭氏陽性球菌,因常堆聚成葡萄串狀,,故名。多數(shù)為非致病菌,,少數(shù)可導(dǎo)致疾病,。葡萄球菌是見的化膿性球菌,是醫(yī)院交叉感染的重要來源,。目前表皮葡萄菌對青霉素的耐藥率已高達90%,,但對新型青霉素、慶大霉素和頭孢唑啉還比較敏感,體外實驗證明黃連,、黃芩,、連翹、大青葉,、板藍根,、蒲公英等對表皮葡萄球菌有抑菌或殺菌作用。

 

一,、簡要介紹

 

表皮葡萄球菌屬細球菌科,,葡萄球菌屬,因其排列如葡萄串狀而得名,。革蘭氏染色陽性,。主要引起癤、癰,、毛囊炎,、肺炎、腦膿腫,、肝膿腫,、化膿性骨髓炎及傷口感染等。在自然界中分布廣泛,,絕大多數(shù)不致病,,僅少數(shù)引起人和動物的化膿性感染。其致病性隨細菌侵入途徑,、菌量,、毒力及機體免疫力不同而異。由于抗生素的廣泛使用,,耐藥菌株逐年增加,,目前表皮葡萄菌對青霉素的耐藥率已高達90%,但對新型青霉素,、慶大霉素和頭孢唑啉還比較敏感,,體外實驗證明黃連、黃芩,、連翹,、大青葉、板藍根,、蒲公英等對表皮葡萄球菌有抑菌或殺菌作用,。

 

二、致病

 

1,、侵襲性疾病主要引起化膿性炎癥,。葡萄球菌可通過多種途徑侵入機體,,導(dǎo)致皮膚或器官的多種感染,甚至敗血癥,。

 

1)皮膚軟組織感染主要有癤,、痛、毛囊炎,、膿痤瘡,、甲溝炎、麥粒腫,、蜂窩組織炎,、傷口化膿等。

 

2)內(nèi)臟器官感染如肺炎,、膿胸,、中耳炎、腦膜炎,、心包炎,、心內(nèi)膜炎等,主要由金葡菌引起,。

 

3)全身感染如敗血癥,、膿毒血癥等,多由金葡菌引起,,新生兒或機體防御可能嚴(yán)重受損時表皮葡萄球菌也可引起嚴(yán)重敗血癥,。

 

2、毒性疾病由金葡菌產(chǎn)生的有關(guān)外毒素引起

 

1)食物中毒進食含腸毒素食物后1~6小時即可出現(xiàn)癥狀,,如嘔吐,、腹痛、腹瀉,,大多數(shù)病人于數(shù)小時至1日內(nèi)恢復(fù),。

 

2)燙傷樣皮膚綜合征多見于新生兒、幼兒和免疫功能低下的成人,,開始有紅斑,,1~2天有皮起皺,繼而形成水皰,,至表皮脫落,。由表皮溶解毒素引起。

 

3)毒性休克綜合征由TSST1引起,,主要表現(xiàn)為高熱,、低血壓、紅斑皮疹伴脫屑和休克等,,半數(shù)以上病人有嘔、腹瀉、肌痛,、結(jié)膜及粘膜充血,,肝腎功能損害等,偶爾有心臟受累的表現(xiàn),。

 

4)假膜炎腸炎本質(zhì)是一種菌群失調(diào)性腸炎,,病理特點是腸粘膜被一層炎性假膜所覆蓋,該假膜由炎性滲出物,、腸粘膜壞死塊和細菌組成,。人群中約10~15%有少量金葡菌寄居于腸道,當(dāng)優(yōu)勢菌如脆弱類桿菌,、大腸肝菌等因抗菌藥物的應(yīng)用而被抑制或殺滅后,,耐藥的金葡菌就乘機繁殖而產(chǎn)生毒素,引起以腹瀉為主的臨床癥狀,。

 

三,、診斷

 

不同病型采取不同檢材如膿汁、血液,、可疑食物,、嘔吐物及糞便等。

 

(一)直接涂片鏡檢

 

取標(biāo)本涂片,,革蘭氏染色后鏡檢,,根據(jù)細菌形態(tài),排列和染色性可作出初步診斷,。

 

(二)分離培養(yǎng)與鑒定

 

將標(biāo)本接種于血瓊脂平板,,甘露醇和高鹽培養(yǎng)基中進行分離培養(yǎng),孵育后挑選可凝菌落進行涂片,、染色,、鏡檢。致病性表皮葡萄球菌的主要特點:凝固酶產(chǎn)生陽性,,金黃色素,,有溶血性,發(fā)酵甘露醇,。

 

食物中毒病人的嘔吐物,,糞便或剩余食物在作細菌分離鑒定的同時,接種于肉湯培養(yǎng)基中,,孵育后取濾液注射于6~8周齡的幼貓腹腔,,注射后4小時內(nèi)發(fā)生嘔吐、腹瀉,、體溫升高或死亡提示有腸毒素存在的可能,。這年來,,采用免疫學(xué)方法檢測葡萄球菌腸毒素繁多,如反向間接血凝,、ELISA,、放射免疫等方法較快速敏感。

 

四,、同類病菌

 

金色葡萄球菌

 

生物學(xué)特性:金葡菌呈球形,,直徑0.48微米,排列成葡萄串狀,,無鞭毛,,無芽孢,多數(shù)無莢膜,。金葡菌的細胞壁有大量磷壁酸構(gòu)成該菌的表面抗原,,通過共價鍵與粘肽層的胞壁酸相連,在細胞膜的外面尚有膜磷壁酸,,對維持胞膜穩(wěn)定性和胞膜酶的激活都具有重要意義,,胞壁可耐25個大氣壓。

 

金葡菌的營養(yǎng)要求不高,,在普通瓊脂培養(yǎng)基上37℃,、pH7.4左右經(jīng)24~48小時后生長良好,金葡菌在有氧和CO,、22℃以及培養(yǎng)基中含有牛奶奶油等情況下生長,,在血瓊脂平板上產(chǎn)生菌落大,且絕大多數(shù)在菌落周圍可見溶血環(huán),。金葡菌在無芽孢菌中抵抗力較強,,在干燥衣服上可存活3~6個月。在干的痰中,,2~3個月后,,仍可培養(yǎng)出菌來。金葡菌在10~15%NaCl溶液中可很好生長,。純培養(yǎng)可抵抗1%酚溶液15分鐘,,濃度增至2%才能殺死金葡菌。80℃經(jīng)30分鐘可殺死本菌,,但金葡菌對龍膽紫很敏感,,血清培養(yǎng)基中含1:125000(濃度)龍膽紫即能抑制其生長。

 

金葡菌的變異可以自然發(fā)生,,但與臨床關(guān)系密切的可能是藥物敏感性變異和菌落L型變異,。也有對青霉素、苯唑青霉素(新型青霉素),、頭孢唑啉等多種藥物耐藥的菌株,,這些菌株又被稱為抗甲氧苯青霉素(新青)金葡菌(MRSA),,這些菌株已構(gòu)成對醫(yī)院內(nèi)感染控制的威脅。產(chǎn)生耐藥性的途徑有二:①產(chǎn)生了分解抗生素中有效基因的誘導(dǎo)酶,,如β內(nèi)酰胺酶,。②敏感菌株通過有關(guān)噬菌體轉(zhuǎn)導(dǎo)耐藥基因的質(zhì)粒而獲耐藥性。

 

另一種金葡菌的變異,,是在一些慢性或反復(fù)感染的病灶中分離出的金葡菌L型。這些變異型用常規(guī)方法檢查不出來,,需通過特殊培養(yǎng)基,,延長培養(yǎng)時間才能獲得。為此,,臨床上懷疑金葡菌感染時,,若培養(yǎng)陰性,要考慮到是否有變異為L型的問題,。

 

金葡菌的噬菌體分型特異性不高,,因為多數(shù)菌株能與兩種以上噬菌體起反應(yīng)。

 

金葡菌株表面含有一種蛋白質(zhì)成分,,稱葡萄球菌蛋白質(zhì)A(SPA),,它結(jié)合于胞壁的粘肽部分,大約30%是金葡菌分裂的對數(shù)生長期產(chǎn)生的,,若使用胰酶處理胞壁,,可破壞SPA的活性。SPA在體外可抑制對金葡菌和大腸桿菌的吞噬,;損傷血小板,;對人的T和B淋巴細胞有無致分裂作用,意見尚不一致,。SPA對噬菌體吸附于金葡菌體的作用也有影響,,它的含量與所吸附噬菌體量呈負相關(guān),SPA含量低的菌株吸附噬菌體的能力大,。

 

五,、實驗室檢查 

 

主要有以下幾種:

 

①直接涂片。取樣本涂片,,革蘭氏染色后鏡檢,。

 

②培養(yǎng)和鑒定。將標(biāo)本接種于血瓊脂平板,、甘露醇和高鹽培養(yǎng)基上,,根據(jù)菌落特征、生物化學(xué)反應(yīng)等進行鑒定,。致病性金葡菌的主要特點為:產(chǎn)生金黃色色素,、有溶血性,、發(fā)酵甘露醇、凝固酶試驗陽性,、皮膚壞死和動物致死性試驗陽性等,。關(guān)于金葡菌的藥物敏感試驗,臨床常用紙片抑菌環(huán)法,,亦有用測定青霉素酶的方法,,但較復(fù)雜,不作為常規(guī)應(yīng)用,。

 

③血清學(xué)檢查,。可用對流免疫電泳和被動凝膠擴散法,檢測病人血清中磷壁酸抗體,。正常人滴度低,,陽性率少,金葡菌感染患者血清中磷壁酸抗體滴度均≥1:4,。用對流免疫電泳法檢查金葡菌抗原,,有助于早期診斷,在腦脊液和胸水中能查到抗原,,血中檢到者報道不多,。

 

④毒素的檢查。用幼貓或猴做動物實驗,,取含有毒素的剩余食物對動物灌胃,、腹腔或靜脈注射毒素來觀察動物是否出現(xiàn)嘔吐、腹瀉,、寒戰(zhàn)等反應(yīng),,或用免疫瓊脂擴散法、間接血凝法和反向間接血凝法,、免疫螢光法及放射免疫法等血清學(xué)檢查均可檢出食物中腸毒素的含量,。

 

葡萄球菌屬Staphylococcus)是一群革蘭氏陽性球菌,因常堆聚成葡萄串狀,,故名,。多數(shù)為非致病菌,少數(shù)可導(dǎo)致疾病,。葡萄球菌是見的化膿性球菌,,是醫(yī)院交叉感染的重要來源,菌體直徑約0.8μm,,小球形,,但在液體培養(yǎng)基的幼期培養(yǎng)中,常常分散,細菌細胞單獨存在,。代表種有金黃色葡萄球菌(S-taphylococcusaureus)(黃色),、白色葡萄球菌(S.a(chǎn)lbus)(白色)、檸檬色葡萄球菌(S.citreus)(橙色),。S.a(chǎn)ureus是各種膿瘍(abscess)的病原菌,,S.a(chǎn)lbus和S.citreus在人的健康體表上為半腐物營養(yǎng)型。由于在普通肉汁培養(yǎng)基中能很好地發(fā)育,,所以培養(yǎng)比較簡單,,但剛從動物體上分離的,對各種氨基酸和生長因子的要求較高,,特別是對煙酸,、硫胺素的要求更為明顯。在自然界已發(fā)現(xiàn)許多介于S.a(chǎn)ureus與S.a(chǎn)lbus中間型的種類,。葡萄球菌是柯赫(R.Koch.1878)、巴斯德(L.Pasteur,,1880)和奧格斯頓(A.Og-ston,,1881)從濃液中發(fā)現(xiàn)的,但通過純培養(yǎng)并進行詳細研究的是F.J.Rosenbach(1884),。在生理學(xué)上顯有許多與大腸桿菌-產(chǎn)氣桿菌群(coli-aerog-enesgroup),、乳酸菌共同的性質(zhì),但其毒性非常強,,移植于動物血管中可引起動物體各處發(fā)生膿瘍,,而表現(xiàn)出嚴(yán)重的癥狀以至死亡。然而與人皮膚膿瘍類似的種類不易在動物體上發(fā)生,,只有極少數(shù)的可在類人猿和兔發(fā)生類似的癥狀,。因乳制品和肉類的而出現(xiàn)的中毒,認為多由此類細菌引起,,原因是葡萄球菌在增殖過程中可產(chǎn)生腸毒素(enterotoxin),。這種毒素的生物活性在于能刺激嘔吐中樞產(chǎn)生催吐作用。該細菌是抗菌物質(zhì)中毒和一般營養(yǎng)不良時成為次級的微生物區(qū)系的主要細菌,。

 

六,、病例討論

 

表皮葡萄球菌是廣泛存在于皮膚表面的條件致病菌,隨著抗生素的廣泛應(yīng)用,,醫(yī)療技術(shù)的進步,,該菌已成為免疫缺陷者醫(yī)院內(nèi)感染(包括傷口感染和插管感染)的常見致病菌,其引起敗血癥,,慢性前列腺炎的趨勢以日俱增,。

 

表皮葡萄球菌的耐藥現(xiàn)象非常嚴(yán)重,文獻報道其對目前廣泛應(yīng)用的青霉素、氨芐西林,、苯唑西林,、紅霉素的耐藥率高,本組的藥敏試驗結(jié)果也證實此點,。表皮葡萄球菌對很多抗生素耐藥主要是與它產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶有關(guān),,院內(nèi)、外分離的表皮葡萄球菌產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶者超過80%,,因此,,臨床上治療表皮葡萄球菌所致疾病較為棘手。正確地選用抗生素尤為重要,。本組藥敏試驗提示表皮葡萄球菌對下列藥物較為敏感:環(huán)丙沙星(80%),、萬古霉素(71%)、阿米卡星(69%),、利福平(48%),、頭孢唑啉(46%),其中環(huán)丙沙星更為突出,。因此,,當(dāng)我們考慮有表皮葡菌球菌感染的可能性時,應(yīng)環(huán)丙沙星及阿米卡星聯(lián)合治療,,再根據(jù)藥敏結(jié)果和臨床治療反應(yīng)作及時調(diào)整,。

 

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