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DyLight 594 MAL WGA與DyLight 594 MAL 小麥胚芽凝集素的制備

來(lái)源：西安瑞禧生物科技有限公司 2025年07月01日 16:07

凝集素的提取與純化

在制備DyLight 594 MAL WGA與DyLight 594 MAL 小麥胚芽凝集素的過(guò)程中，首先需要獲取高純度的凝集素,。對(duì)于小麥胚芽凝集素（WGA），通常從小麥胚芽中提取。將小麥胚芽研磨成粉末后,，加入適量的緩沖溶液進(jìn)行提取，通過(guò)離心去除不溶性雜質(zhì),。隨后,，利用親和層析技術(shù)對(duì)提取液進(jìn)行純化。親和層析是一種基于分子間特異性相互作用的分離技術(shù),，通過(guò)將凝集素特異性結(jié)合的配體固定在層析柱上,，使凝集素與雜質(zhì)分離，從而獲得高純度的WGA,。懷槐凝集素I（MAL I）的提取與純化過(guò)程類似,，只是其來(lái)源和提取條件有所不同,。

熒光標(biāo)記反應(yīng)

在獲得純化的凝集素后，接下來(lái)進(jìn)行熒光標(biāo)記反應(yīng),。DyLight 594是一種常用的熒光染料,，具有良好的光穩(wěn)定性和明亮的熒光特性。將純化的凝集素與DyLight 594染料按照一定的比例混合,，在適宜的反應(yīng)條件下進(jìn)行標(biāo)記反應(yīng),。反應(yīng)條件包括適當(dāng)?shù)膒H值、溫度和反應(yīng)時(shí)間等,，這些條件的優(yōu)化對(duì)于標(biāo)記反應(yīng)的效率和凝集素活性的保持至關(guān)重要,。在反應(yīng)過(guò)程中，DyLight 594染料會(huì)與凝集素分子上的特定基團(tuán)結(jié)合,，從而使凝集素具有熒光標(biāo)記,。

產(chǎn)物純化與分離

標(biāo)記反應(yīng)完成后，需要對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行進(jìn)一步的純化和分離,，以去除未反應(yīng)的染料和其他雜質(zhì),。這一步驟通常采用凝膠過(guò)濾層析的方法。凝膠過(guò)濾層析是根據(jù)分子大小進(jìn)行分離的技術(shù),，通過(guò)選擇合適的凝膠介質(zhì),，可以有效地將標(biāo)記后的凝集素與未標(biāo)記的染料和雜質(zhì)分離。經(jīng)過(guò)凝膠過(guò)濾層析后,，收集含有標(biāo)記凝集素的洗脫峰,，從而獲得純化的DyLight 594標(biāo)記的凝集素。

質(zhì)量檢測(cè)

最后,，對(duì)制備完成的DyLight 594 MAL WGA或DyLight 594 MAL 小麥胚芽凝集素進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè),。質(zhì)量檢測(cè)主要包括熒光強(qiáng)度、結(jié)合活性和純度等方面的檢測(cè),。熒光強(qiáng)度的檢測(cè)可以通過(guò)熒光光譜儀進(jìn)行,，以確保標(biāo)記后的凝集素具有足夠的熒光信號(hào)。結(jié)合活性的檢測(cè)則通過(guò)與糖類底物的結(jié)合實(shí)驗(yàn)來(lái)評(píng)估,，以確定凝集素的活性是否受到影響,。純度的檢測(cè)可以采用SDS-PAGE等方法，以確保產(chǎn)品中雜質(zhì)含量在可接受的范圍內(nèi),。

DyLight 594 MAL WGA

產(chǎn)地：西安瑞禧生物

用途：科研

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