一,、物質(zhì)名稱

• 英文名稱：DyLight 633 Maleimide Phalloidin

• 中文名稱：DyLight 633 馬來酰亞胺鬼筆環(huán)肽

二,、基本概述

DyLight 633 馬來酰亞胺鬼筆環(huán)肽是一種熒光標記的鬼筆環(huán)肽衍生物，由天然鬼筆環(huán)肽與DyLight 633熒光染料通過馬來酰亞胺基團共價結(jié)合而成,。其主要用于細胞骨架中肌動蛋白（F-actin）的特異性標記,，在熒光顯微鏡成像中提供紅色至遠紅色熒光信號。

三,、制備步驟

1. 原料準備

• 鬼筆環(huán)肽提?。簭闹旅巨Γㄈ琦Z膏菌屬）中分離純化天然鬼筆環(huán)肽，通過色譜技術（如HPLC）獲得高純度單體,。

• DyLight 633染料合成：基于磺化菁染料骨架,，通過化學修飾引入馬來酰亞胺反應基團，合成DyLight 633馬來酰亞胺染料,。

2. 鬼筆環(huán)肽活化

• 保護基團處理：若鬼筆環(huán)肽含游離巰基或其他活性基團,，需通過乙酰化或琥珀?；忾]非目標位點,，確保馬來酰亞胺僅與特定殘基（如半胱氨酸）結(jié)合。

• 馬來酰亞胺修飾：將鬼筆環(huán)肽與馬來酰亞胺活化中間體（如N-羥基琥珀酰亞胺馬來酰亞胺酯）在堿性緩沖液（pH 7.4-8.0）中反應,，形成馬來酰亞胺-鬼筆環(huán)肽中間體,。

3. 熒光染料偶聯(lián)

• 共價結(jié)合：將DyLight 633馬來酰亞胺染料與馬來酰亞胺-鬼筆環(huán)肽中間體在室溫下避光孵育（通常4-12小時），通過硫醚鍵形成穩(wěn)定共價連接,。

• 純化分離：通過凝膠過濾色譜（如Sephadex G-25）或離子交換色譜去除未反應的染料和副產(chǎn)物,，獲得純化的DyLight 633馬來酰亞胺鬼筆環(huán)肽。

4. 質(zhì)量控制

• 純度檢測：采用HPLC或SDS-PAGE驗證產(chǎn)物純度,，確保無游離染料或未標記鬼筆環(huán)肽殘留,。

• 熒光特性驗證：通過紫外-可見光譜和熒光分光光度計確認DyLight 633的激發(fā)/發(fā)射波長（約633 nm/650 nm附近）。

四、特性與注意事項

• 特異性結(jié)合：鬼筆環(huán)肽部分通過靜電作用與F-actin緊密結(jié)合,，DyLight 633提供穩(wěn)定熒光信號,，適用于固定細胞或組織的成像。

• 光穩(wěn)定性：DyLight 633染料具有較高的光穩(wěn)定性,，適合長時間曝光成像,。

• 儲存條件：需避光保存于-20℃干燥環(huán)境中，避免反復凍融,。

五,、應用背景

該標記物通過鬼筆環(huán)肽的高親和力與肌動蛋白結(jié)合，在細胞生物學研究中用于觀察細胞形態(tài),、遷移及應力纖維分布,，輔助理解細胞骨架動態(tài)變化機制。其熒光特性適配多色標記實驗,，可與綠色或藍色熒光探針聯(lián)合使用,。

產(chǎn)地：西安瑞禧生物

用途：科研

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