液相色譜是目前應(yīng)用zui多的色譜分析方法，液相色譜系統(tǒng)由流動(dòng)相儲(chǔ)液體瓶,、輸液泵,、進(jìn)樣器,、色譜柱,、檢測(cè)器和記錄器組成,，其整體組成類似于氣相色譜，但是針對(duì)其流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整,。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn),；進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利切換嚴(yán)密；由于液體流動(dòng)相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體，為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗,，長(zhǎng)度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱,。HPLC應(yīng)用非常廣泛，幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域,。
　　
　　液相色譜儀作為一種高精密儀器,，如果在使用過程中不按照正確操作的話，就容易導(dǎo)致一些問題,。其中zui常見的就是柱壓?jiǎn)栴},、漂移問題,、峰型異常問題,。
　　
　　柱壓?jiǎn)栴}是使用液相色譜過程中需要密切注意的地方，柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞,、柱效,、分離效果及保留時(shí)間等密切相關(guān)。所謂柱壓穩(wěn)定并不是指壓力值穩(wěn)定于一個(gè)恒定值而是指壓力波動(dòng)范圍在50PSI之間（在使用梯度洗脫時(shí),，柱壓平穩(wěn)緩慢的變化是允許的）,。壓力過低、過高都屬于柱壓?jiǎn)栴},。
　　
　　1,、壓力過低壓力過低的現(xiàn)象一般是由于系統(tǒng)泄漏，處理方法：尋找各個(gè)接口處,，特別是色譜柱兩端的接口,，把泄漏的地方旋緊即可。當(dāng)然還有一個(gè)原因就是泵里進(jìn)了空氣,，但此時(shí)表現(xiàn)的往往是壓力不穩(wěn),，忽高忽低，更嚴(yán)重一點(diǎn)會(huì)導(dǎo)致泵無法吸上液體,。處理方法：打開Purge閥,，用3~5ml/min的流速?zèng)_洗，如果不行,，則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出,。
　　
　　2、壓力過高這是液相在使用中zui常見的問題,，指的是壓力突然升高,，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此時(shí),，我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查,。
　　
　　（1）.首先斷開真空泵的入口處,，此時(shí)PEEK管里充滿液體,，使PEEK管低于溶劑瓶,，看液體是否自由滴下，如果液體不滴或緩慢滴下,，則是溶劑過濾頭堵塞,。處理方法：用30%的硝酸浸泡半個(gè)小時(shí)，在用超純水沖洗干凈,。如果液體自由滴下,，溶劑過濾頭正常，在檢查,；
　　
　?。?）.打開Purge閥，使流動(dòng)相不經(jīng)過柱子,，如果壓力沒有明顯下降,，則是過濾白頭堵塞。處理方法：將過濾白頭取出,，用10%的異丙醇超聲半個(gè)小時(shí),。如果壓力降至100PSI以下，過濾白頭正常,，在檢查,；
　　
　　（3）.把色譜柱出口端取下,，如果壓力不下降,，則是柱子堵塞。處理方法：如果是緩沖鹽堵塞,，則用95%的水沖至壓力正常,。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞，則要用比現(xiàn)在流動(dòng)相更強(qiáng)的流動(dòng)相沖至壓力正常,。假如按上面的方法長(zhǎng)時(shí)間沖洗壓力都不下降,，則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上，用流動(dòng)相沖洗柱子,。這時(shí),，如果柱壓仍不下降，只有換柱子入口篩板,，但一旦操作不甚,，很容易造成柱效下降，所以盡量少用,。