關(guān)鍵詞：Kupffer細(xì)胞,，庫普弗細(xì)胞,，枯否細(xì)胞,，單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng),，肝臟巨噬細(xì)胞,，類器官，肝靶向遞送,，Kupffer Cells(KCs), mononuclear phagocyte system,，Hepatic Macrophages，Organoids,，liver-targeted delivery

Kupffer細(xì)胞（Kupffer Cells, KCs）是肝臟內(nèi)一種特殊的免疫細(xì)胞,，主要分布于肝竇內(nèi)皮細(xì)胞之間，屬于單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)（mononuclear phagocyte system）的重要組成部分,。這類細(xì)胞在清除血液中的有害物質(zhì),、調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)及維持肝臟微環(huán)境穩(wěn)定方面發(fā)揮重要作用。此外,，Kupffer細(xì)胞與多種肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān),，其有可能作為肝臟疾病有效的治療靶點(diǎn)。利用Kupffer細(xì)胞構(gòu)建肝臟疾病相關(guān)3D細(xì)胞模型和類器官,，可為肝臟疾病機(jī)制和藥物篩選提供更加高效的體外研究模型,。此外，Kupffer細(xì)胞還可用于肝靶向遞送藥物的優(yōu)化研究,。本文簡(jiǎn)要介紹Kupffer細(xì)胞特點(diǎn)及其在肝臟疾病中的作用機(jī)制,，以供參考。

01    Kupffer細(xì)胞簡(jiǎn)介

Kupffer細(xì)胞（Kupffer Cells, KCs）,，即庫普弗細(xì)胞或枯否細(xì)胞,，也稱肝臟巨噬細(xì)胞（Hepatic Macrophages），是位于肝臟中的特殊巨噬細(xì)胞，是單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)的一部分,，約占機(jī)體巨噬細(xì)胞總數(shù)的80-90%,。Kupffer細(xì)胞定居于肝血竇中，與血管內(nèi)皮細(xì)胞相毗鄰,，在肝小葉間靜脈周圍常見,。Kupffer細(xì)胞的發(fā)育來自骨髓，由前單核細(xì)胞（promonocytes）,、原單核細(xì)胞（Monoblast）,、單核細(xì)胞發(fā)育而來，血液中的單核細(xì)胞再進(jìn)一步在肝竇壁發(fā)育成庫普弗細(xì)胞,。目前普遍認(rèn)為KCs的產(chǎn)生有兩種方式,，即骨髓來源的單核細(xì)胞的招募和自我更替的補(bǔ)給。在特定的環(huán)境下,，KCs可被活化成M1,、M2兩種不同的細(xì)胞亞型。其中M1型在清除病原體,、促進(jìn)炎癥反應(yīng)和抑制腫瘤生長方面起作用,；而M2型則具有吞噬寄生蟲、抑制炎癥反應(yīng)和促進(jìn)腫瘤生長的功能,。

Kupffer細(xì)胞具有吞噬,、分泌功能、免疫調(diào)節(jié)與監(jiān)視作用,。生理?xiàng)l件下,，Kupffer細(xì)胞不僅能非特異地吞噬和清除血流中的細(xì)菌、病毒,、內(nèi)毒素和衰老紅細(xì)胞等物質(zhì),，而且還具有特異性的免疫應(yīng)答、抗腫瘤免疫,、內(nèi)毒素解毒,、抗感染、調(diào)節(jié)微循環(huán)及物質(zhì)代謝等方面的作用,。Kupffer細(xì)胞可分泌多種細(xì)胞因子（如白細(xì)胞介素,、腫瘤壞死因子），參與激活或抑制免疫反應(yīng),。在病毒感染時(shí),，Kupffer細(xì)胞通過呈遞抗原激活T淋巴細(xì)胞，啟動(dòng)特異性免疫應(yīng)答,。同時(shí),，它們也能通過釋放抗炎因子減輕過度炎癥反應(yīng),，避免肝組織損傷。

另外,，庫普弗細(xì)胞表面存在著多種受體,，可被多種配體激活，通過產(chǎn)生細(xì)胞因子,、炎癥介質(zhì)和活性氧等,，在多種肝細(xì)胞損傷的發(fā)病過程中起到重要的作用。

02    Kupffer細(xì)胞與肝臟疾病

近些年的研究發(fā)現(xiàn)Kupffer細(xì)胞在酒精性肝病( Alcoholic liver disease,，ALD) ,、非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,，NAFLD）,、肝纖維化( Hepatic fibrosis，HF) ,、肝細(xì)胞癌( Hepatocellular carcinoma,，HCC)等肝臟疾病中扮演著關(guān)鍵角色。隨著生物醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展,，3D細(xì)胞培養(yǎng)和類器官技術(shù)為生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究提供了創(chuàng)新性解決方案。利用Kupffer細(xì)胞構(gòu)建3D酒精性肝病和肝纖維化模型,、人多能干細(xì)胞（hPSC）衍生的肝類器官與Kupffer細(xì)胞共移植技術(shù),，可為肝膽疾病藥物篩選、毒性測(cè)試及再生機(jī)制等提供更加精準(zhǔn)和高效的體外研究工具,。而調(diào)控脂質(zhì)體藥物表面PEG密度,，可精準(zhǔn)控制Kupffer細(xì)胞吞噬強(qiáng)度，實(shí)現(xiàn) ?"捕獲-釋放"式肝靶向遞藥?,，提升藥物療效并降低毒性,。

【酒精性肝病 Alcoholic liver disease，ALD】

Kupffer細(xì)胞的作用：ALD 系由乙醇被長期過量的攝入所致,，是導(dǎo)致慢性肝損傷的主要原因之一,。許多急性和慢性酒精中毒的動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)證實(shí)了Kupffer 細(xì)胞的激活，導(dǎo)致炎癥介質(zhì)如腫瘤壞死因子( Tumor necrosis factor,，TNF) ,、趨化因子 CCL2( Chemokines CCL2) 、活性氧( Reactive oxygen species,，ROS) 等的釋放,，并導(dǎo)致有害的肝臟炎癥。此外,，乙醇暴露后,，KCs 誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子分泌增加,，如炎癥因子 TNF 與肝臟細(xì)胞TNF受體結(jié)合，致使外周脂肪細(xì)胞釋放游離脂肪酸和新生脂肪增加,，導(dǎo)致β氧化過程受阻,，助長ALD的形成。

【非酒精性脂肪性肝病 non-alcoholic fatty liver disease,，NAFLD】

Kupffer細(xì)胞的作用：NAFLD是指除乙醇,、病毒、藥物及其他明確的損肝因素之外所致的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪過度沉積為主要特征的臨床病理綜合征,。有研究發(fā)現(xiàn),，游離脂肪酸 ( Free fatty acid， FFA) 或 LPS 都能夠觸發(fā)TNF從KCs釋放,，這表明KCs作為FFA超載和LPS的主要傳感器,，并且整合這些信號(hào)，通過TNF分泌物將信息傳送到肝細(xì)胞,，導(dǎo)致肝臟脂質(zhì)代謝的改變,。此外，KCs的缺失可能導(dǎo)致肝臟脂肪變性,，這可能是通過 KCs 減少 IL-10 釋放引起的,。在NAFLD小鼠模型研究中發(fā)現(xiàn)，無編碼RNA SNHG20過度表達(dá)通過激活信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活蛋白6( Signal transducer and activator of transcription 6,，STAT6) 誘發(fā)KCs向M2極化,，促進(jìn) NALFD向HCC的推進(jìn)，因而干預(yù)SNHG20的表達(dá)可為NAFLD的治療提供新思路,。通過調(diào)節(jié)KCs的M1型和M2型極化的平衡可能為拓展NAFLD的潛在治療方法提供新思路,。

【肝纖維化 Hepatic fibrosis，HF】

Kupffer細(xì)胞的作用：HF是以肝星狀細(xì)胞的活化和細(xì)胞外基質(zhì)的過度沉積為特征的病理學(xué)改變,。在肝臟損傷過程中,，KCs被活化促進(jìn)細(xì)胞因子及炎癥因子的釋放，從而導(dǎo)致肝星狀細(xì)胞的激活,，進(jìn)而影響肝纖維化進(jìn)程,。活化的KCs產(chǎn)生轉(zhuǎn)化TGF- β和PDGF,，這兩種因子都是促纖維化生成因子,，它們連同炎癥細(xì)胞因子、ROS和脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)生等,，促使肝星狀細(xì)胞的激活及轉(zhuǎn)分化生成肌成纖維細(xì)胞,，從而促進(jìn)肝纖維化進(jìn)程.有研究表明，姜黃素通過抑制KCs的活化來減少趨化因子的分泌,，減少淋巴細(xì)胞抗原6C高表達(dá)（Ly6Chi）單核細(xì)胞的浸潤,，減少炎癥信號(hào)的釋放,，可防止HF的發(fā)生。

【肝臟缺血再灌注損傷 Hepatic ischemia reperfusion injury,，HIRI】

Kupffer細(xì)胞的作用：HIRI是一個(gè)復(fù)雜的病理生理過程,，涉及多種因素，如ROS的釋放,、KCs的活化,、炎癥因子的釋放等。KCs在HIRI中發(fā)揮雙重作用,，既可加劇損傷,，也可參與保護(hù)機(jī)制。在HIRI期間,，KCs被缺氧及損傷相關(guān)分子模式（DAMPs）激活,，通過Toll樣受體（TLRs）等識(shí)別損傷信號(hào)，啟動(dòng)NF-κB,、MAPK等炎癥通路,。活化的KCs大量分泌促炎因子（TNF-α,、IL-1β,、IL-6）、趨化因子及活性氧（ROS）,，直接損傷肝細(xì)胞,，并招募中性粒細(xì)胞浸潤，擴(kuò)大炎癥反應(yīng),。另外，KCs可極化為抗炎M2型,，分泌IL-10,、TGF-β等因子，抑制炎癥并促進(jìn)組織修復(fù),；mTOR信號(hào)通路（尤其是mTORC2）通過調(diào)控KCs向M2型極化,，減輕HIRI；有研究表明?；切苋パ跄懰幔═UDCA）通過抑制KCs的IRE1α/TRAF2/NF-κB通路,，減少促炎因子釋放，改善HIRI,。

【肝細(xì)胞癌 Hepatocellular carcinoma,，HCC】

Kupffer細(xì)胞的作用：HCC 是世界上-第五種常見癌癥以及癌癥相關(guān)死亡的第三大常見原因。既往大量研究表明,，KCs在HCC中發(fā)揮著雙重作用,。M1型KCs通過分泌ROS和氮中間體來殺死腫瘤細(xì)胞,，其分泌的TNF-α和IL-1β能招募細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞( Cytotoxic lymphocyte，CTL) 來攻擊腫瘤細(xì)胞,；而M2型KCs可分泌促血管生長因子如VEGF,、PDGF、成纖維細(xì)胞生長因子( FGF) 和血管生成趨化因子,，促進(jìn)腫瘤周圍異常血管增生,。因此，通過調(diào)控KCs極化分型可能為治療HCC提供一種潛在的策略,。

03    IPHASE相關(guān)產(chǎn)品

綜上所述,，Kupffer細(xì)胞作為肝臟固有的免疫細(xì)胞，在維持肝臟穩(wěn)態(tài)和整個(gè)機(jī)體的免疫防御方面具有不可替代的作用,。同時(shí),，Kupffer細(xì)胞在肝臟疾病的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用,，其有可能作為肝臟疾病有效的治療靶點(diǎn),。因此，研究Kupffer細(xì)胞對(duì)于揭示肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制以及后續(xù)治療都具有重大意義,。鑒于此,，IPHASE作為體外研究生物試劑引-領(lǐng)者，憑借先進(jìn)的設(shè)備,、專業(yè)的技術(shù)人員和多年研發(fā)經(jīng)驗(yàn),，成功研發(fā)出人、猴,、犬,、大鼠及小鼠等多種屬的Kupffer細(xì)胞，為肝臟疾病機(jī)制與藥物篩選研究提供新模型,。