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革新 mRNA 應用：T7 RNA 共轉(zhuǎn)錄試劑盒,，開啟高效,、安全,、便捷新篇
mRNA（信使核糖核酸）作為攜帶遺傳信息、指導蛋白質(zhì)合成的關(guān)鍵分子,，在生命活動中扮演著核心角色,。在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，科學家們巧妙利用 mRNA 的特性,，通過人工合成特定序列的 mRNA,，將其遞送至細胞內(nèi)，指導細胞合成所需的蛋白質(zhì),，從而實現(xiàn)疾病治療或預防的目的,。在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，mRNA 技術(shù) 態(tài)勢重塑著疾病治療與預防的格局,，如今已在傳染病防治,、腫瘤治療、罕見病干預等多個領(lǐng)域展現(xiàn)出令人矚目的成果,，成為推動生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)變革的重要力量,。
mRNA藥物開發(fā)的整個流程大致可以分為幾步：序列確定&設計—mRNA體外轉(zhuǎn)錄—包封制備，其中mRNA體外轉(zhuǎn)錄（In Vitro Transcription, IVT）步驟為： 質(zhì)粒DNA 提取&線性化—體外轉(zhuǎn)錄（共轉(zhuǎn)錄加帽）—純化—mRNA原液?；瘜W共轉(zhuǎn)錄法加帽是目前mRNA藥物開發(fā)的主流方法,，通過一步法在IVT反應中進行加帽，能夠使得后續(xù)開發(fā)過程的體外轉(zhuǎn)錄工藝放大變得尤為簡單,。
T7 RNA 共轉(zhuǎn)錄試劑盒通過對轉(zhuǎn)錄體系的深度優(yōu)化,，以 low dsRNA T7 RNA 聚合酶為核心，能夠以含有 T7 啟動子序列的線性雙鏈 DNA 為模板,，以核苷酸（NTPs）為底物,，高效轉(zhuǎn)錄合成 mRNA。其 設計和優(yōu)化的反應體系,，為 mRNA 的制備帶來了諸多優(yōu)勢,。不僅顯著提升了 RNA 的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量。在標準反應條件下,，投入 1μg 模板量,，即可產(chǎn)生 150 - 200μg 的 RNA。同時dsRNA含量相比于野生型T7 RNA 聚合酶,，降低至少10倍,，一些項目當中可達到上百倍的幅度。
圖1.mRNA藥物開發(fā)及生產(chǎn)流程
共轉(zhuǎn)錄試劑盒優(yōu)勢
操作流程更簡單
共轉(zhuǎn)錄加帽操作更簡單,，引入的物質(zhì)更少,，工藝流程簡單；
產(chǎn)量高
1 µg模板,，可產(chǎn)生150-200 µg的Cap 1 mRNA,；
免疫原性更低
試劑盒采用修飾的N1-Me-pUTP，low dsRNA T7 RNA聚合酶,，可減少自身免疫反應,；
加帽率高
加帽效率高達99%以上；
試劑盒組分全套
試劑盒組分豐富,，包含有NTPs，T7酶mix,，帽類似物,，DNase I 和LiCl等，滿足一步法共轉(zhuǎn)錄所需試劑需求,。
驗證數(shù)據(jù)
應用范圍廣
針對于不同長度的片段,，20ul體系，1ug質(zhì)粒DNA投入,，均可得到9mg/ml的產(chǎn)量,，加帽率在100%。
表1.驗證數(shù)據(jù)匯總
完整度高
dsRNA 含量極低
針對于8K序列驗證數(shù)據(jù)，dsRNA 含量相較與WT T7 RNA聚合酶,，降低100倍,，其他指標未降低。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 應用 |
T7 High Yield RNA Synthesis Kit for Co-transcription(low dsRNA) | 10634ES | 10/50/100/500T | T7 RNA共轉(zhuǎn)錄試劑盒,，T7組分為low dsRNA T7 RNAp |
其他相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 應用 |
T7 RNA共轉(zhuǎn)錄試劑盒 | 16222ES | 10/50/100/500T | T7 RNA共轉(zhuǎn)錄試劑盒,，T7組分為傳統(tǒng)型T7 RNAp |
T7 High Yield RNA Synthesis Kit | 10623ES | 10/50/100/500T | 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒，T7組分為傳統(tǒng)型T7 RNAp |
T7 High Yield RNA Synthesis Kit(low dsRNA) | 10633ES | 10/50/100/500T | 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒,，T7組分為low dsRNA T7 RNAp |
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