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SDS-PAGE 一步法凝膠快速制備試劑盒

來源:上海易匯生物科技有限公司   2025年06月27日 16:50  
在使用 SDS-PAGE 一步法凝膠快速制備試劑盒時,,還能從實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),、儀器配合、廢物處理等角度挖掘更多實(shí)用技巧,,助力實(shí)驗(yàn)高效開展:


  • 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)巧規(guī)劃

    • 梯度凝膠預(yù)實(shí)驗(yàn):若不確定目標(biāo)蛋白最佳分離濃度,,可利用試劑盒少量試劑制作梯度凝膠進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。先將不同濃度凝膠溶液分層灌注,,待聚合后進(jìn)行電泳,,通過預(yù)實(shí)驗(yàn)快速確定分離的凝膠濃度,節(jié)省正式實(shí)驗(yàn)時間和試劑用量,。

    • 多膠同步制備:當(dāng)需同時處理多個樣品時,,根據(jù)試劑盒規(guī)格和電泳槽容量,可一次配制多份凝膠溶液,,同時灌注多個凝膠,。但要注意記錄好各凝膠對應(yīng)的樣品信息,避免混淆,。如進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)差異表達(dá)分析,,一次制備多個凝膠,,可同步分析不同樣本,提高實(shí)驗(yàn)效率,。

  • 儀器配合提效率

    • 恒溫設(shè)備輔助:在環(huán)境溫度不穩(wěn)定的情況下,,使用恒溫平臺或水浴鍋保持凝膠溶液和電泳槽溫度恒定。如在寒冷環(huán)境中,,將混合好的凝膠溶液放在 30℃恒溫平臺上,,可加快凝膠聚合速度且保證聚合均勻性,避免因溫度過低導(dǎo)致的聚合異常,。

    • 離心機(jī)妙用:混合凝膠溶液后,,若溶液中仍有少量難以排出的氣泡,可將盛放溶液的容器放入離心機(jī),,以低速(如 1000 - 2000 rpm)離心 1 - 2 分鐘,,使氣泡集中到溶液表面,方便去除,。

  • 細(xì)節(jié)把控保質(zhì)量

    • 溶液預(yù)過濾:若懷疑預(yù)混試劑或添加的去離子水,、緩沖液存在雜質(zhì),可使用 0.22μm 或 0.45μm 的濾膜對溶液進(jìn)行過濾后再配制凝膠,。尤其在對條帶清晰度要求的實(shí)驗(yàn)中,,過濾操作能有效去除可能影響蛋白質(zhì)遷移的微小顆粒,提高凝膠質(zhì)量,。

    • 加樣孔修復(fù):若拔梳子時不慎損壞加樣孔,,可在電泳前用少量未聚合的凝膠溶液對破損處進(jìn)行修補(bǔ)。用微量移液器吸取凝膠溶液,,小心滴加到破損加樣孔處,,待其聚合后,可一定程度恢復(fù)加樣孔形狀,,減少對樣品加樣和電泳結(jié)果的影響,。

  • 廢物處理有講究

    • 試劑回收利用:試劑盒中未使用完且未受污染的試劑,如緩沖液等,,可按照要求妥善保存,,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)的清洗或其他輔助步驟。但要注意,,已混合的凝膠溶液不可回收,避免污染其他試劑,。

    • 環(huán)保處理:實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢棄凝膠和試劑,,需按照實(shí)驗(yàn)室危險廢物處理規(guī)定進(jìn)行分類處置。聚丙烯酰胺凝膠雖低毒,,但不可隨意丟棄,,應(yīng)收集后進(jìn)行無害化處理,;含 SDS 等化學(xué)試劑的廢液,需倒入指定的化學(xué)廢液收集容器,,統(tǒng)一交由專業(yè)機(jī)構(gòu)處理,,防止環(huán)境污染。



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