PVDF膜轉(zhuǎn)印膜要如何使用

來源：上海聯(lián)碩生物科技有限公司 2025年06月26日 11:11

PVDF膜即聚偏二氟乙/烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白質(zhì)印跡法中常用的一種固相支持物,。

PVDF本質(zhì)是一種疏水性的聚合物,，在水溶液中不會浸濕,，為了在水性緩沖液和系統(tǒng)中使用PVDF膜,，首先必須將其浸泡在50%(v/v)或更高濃度的醇溶液中,。

PVDF膜在使用時需預(yù)處理，用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團,，使其更容易與帶負(fù)電的蛋白結(jié)合,。

甲醇、乙醇和異丙醇都適合浸泡這種膜,。

隨著膜的外觀從不透明到半透明,，浸濕是顯而易見的。之后必須用水反復(fù)沖洗以去除醇類,，經(jīng)預(yù)處理的膜可以直接放入轉(zhuǎn)印緩沖液中平衡,。

一旦膜被浸濕,，蛋白結(jié)合可通過蛋白與膜的接觸而實現(xiàn)。

由于蛋白與膜的結(jié)合貫穿整個膜的厚度(深度),，結(jié)合能力是由孔的內(nèi)部表面積來決定的,，隨著膜孔徑的不斷減小，膜對低分子量的蛋白結(jié)合就越牢固,。

0.2um PVDF膜內(nèi)部表面積大約是0.45um PVDF 膜的三倍,，使其吸附能力更高。PVDF膜是疏水性的,，一般大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜,，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜。

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