DNA定量分光光度計(jì)對(duì)濃度的測(cè)定判定

來源：上海牧榮生物科技有限公司 2025年06月25日 11:32

DNA定量分光光度計(jì)是一種基于核酸分子在特定波長(zhǎng)下對(duì)紫外光的吸收特性來測(cè)定DNA濃度的儀器,，其濃度測(cè)定判定主要依據(jù)吸光度值（A）及相關(guān)比值，以下為你詳細(xì)介紹：

濃度測(cè)定原理

DNA分子中的堿基具有共軛雙鍵結(jié)構(gòu),，在260nm波長(zhǎng)處有最大吸收峰,。根據(jù)朗伯-比爾定律，吸光度與溶液中吸光物質(zhì)的濃度成正比,，即A=

varepsiloncl（其中A為吸光度,，

varepsilon為摩爾吸光系數(shù)，c為溶液濃度，l為光程長(zhǎng)度）,。通過測(cè)量DNA溶液在260nm處的吸光度,，再結(jié)合已知的摩爾吸光系數(shù)和光程長(zhǎng)度，即可計(jì)算出DNA的濃度,。

?比值應(yīng)大于2.0,。如果比值低于2.0，可能表示樣品中存在鹽離子,、酚,、氯仿等雜質(zhì)。

影響測(cè)定結(jié)果的因素及注意事項(xiàng)

樣品純度：樣品中的蛋白質(zhì),、RNA,、鹽離子、有機(jī)溶劑等雜質(zhì)會(huì)影響吸光度的測(cè)量,，從而影響濃度測(cè)定的準(zhǔn)確性,。因此，在測(cè)定前應(yīng)盡量提高DNA樣品的純度,。

樣品稀釋：如果樣品濃度過高,，需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)南♂尅Ｏ♂寱r(shí)應(yīng)使用與測(cè)量時(shí)相同的緩沖液,，并且要準(zhǔn)確記錄稀釋倍數(shù),。

儀器校準(zhǔn)：定期對(duì)分光光度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)，確保儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,。校準(zhǔn)包括波長(zhǎng)校準(zhǔn)和吸光度校準(zhǔn)等,。

測(cè)量環(huán)境：測(cè)量時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光直射和溫度變化過大，以免影響測(cè)量結(jié)果,。同時(shí),，要保持比色皿的清潔，避免劃痕和污染,。

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