語純生物無外泌體胎牛血清與Gibco無外泌體胎牛血清對比報告
一.實驗材料
無外泌體胎牛血清(語純生物),,無外泌體胎牛血清(GibcoA27208-03),,BMSC(CTCC),,DMEM高糖培養(yǎng)基(HycloneSH30243.01B),,100X青霉素-鏈霉素溶液(上海生工E607011-0100),,0.25%胰酶(碧云天C0201),,0.22μm濾膜(Millex),外泌體提取試劑盒(貝博BB-3901-1)
二.實驗儀器
細胞培養(yǎng)箱(ThermoScientific8000),,光學顯微鏡(上海精密儀器儀表有限公司XDS-1A),,倒置顯微鏡(OLYMPUS,IX71),超凈工作臺(上海滬凈醫(yī)療器械有限公司SW-CJ-2D),,電熱恒溫水浴槽(賀德DK-08D),,超高速離心機(BeckmanOptinal-90K)
三.無外泌體胎牛血清制備方法
1.制備工藝和參數略;
2.用0.1μm的濾膜過濾上清液,,即得無外泌體胎牛血清,。
四.外泌體制備及鑒定
1.BMSC細胞在正常含FBS的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一定的時間后,細胞融合度約為60%-70%時,移去原有含血清的培養(yǎng)基,,分別換成語純生物無外泌體胎牛血清和Gibco無外泌體胎牛血清,;
2.繼續(xù)培養(yǎng)48h左右,細胞融合度達到80%-95%左右時收取上清液,;
3.用外泌體提取試劑盒進行外泌體提?。?/span>
4.通過電鏡和WesternBlot技術進行外泌體鑒定,,結果顯示語純生物無外泌體胎牛血清和Gibco無外泌體胎牛血清制備外泌體的效果基本一致,。
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