P16是一種抑癌基因,，與細(xì)胞周期調(diào)控相關(guān)，通過(guò)抑制CDK4和CDK6的活性來(lái)阻止細(xì)胞進(jìn)入S期,，在調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂G1-S期過(guò)程中起關(guān)鍵作用,。

在宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）病變時(shí)，P16表達(dá)水平異常升高,，表現(xiàn)為P16蛋白的異常核及胞漿陽(yáng)性,。可用于宮頸癌高級(jí)別鱗狀上皮病變與化生等的鑒別,。

Ki-67是一種細(xì)胞增殖標(biāo)志物,，Ki-67在細(xì)胞周期的G1、S,、G2和M期均有表達(dá),，但在細(xì)胞處于靜止期（G0期）或凋亡時(shí)不表達(dá)。

Ki-67的檢測(cè)在乳腺癌,、肺癌,、結(jié)腸癌等癌癥中的診斷和分級(jí)中都有應(yīng)用。Ki-67值的高低直接反映了腫瘤細(xì)胞增殖的活躍程度,，也是判斷腫瘤惡性程度和預(yù)后一個(gè)重要的標(biāo)志物,。

子宮頸癌

子宮頸癌是常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤之一, 發(fā)病率在我國(guó)女性惡性腫瘤中位居第二。

高危型人乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)感染是引起子宮頸癌和子宮頸上皮內(nèi)病變的主要病因,，尤其是HPV的某些高危型別,，如HPV 16和HPV 18。子宮頸高級(jí)別上皮內(nèi)病變包括高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）及原位腺癌（AIS）,。HSIL包括子宮頸鱗狀上皮內(nèi)瘤變（CIN）2 級(jí)和3級(jí),，主要由HPV感染后引起，細(xì)胞有明顯的異型性,，核分裂象增多,。

宮頸癌發(fā)展緩慢，能需要數(shù)年時(shí)間才能從前期病變發(fā)展為侵襲性癌癥,。宮頸癌前病變和宮頸癌早期可能沒(méi)有任何癥狀,，且子宮頸癌治療效果和預(yù)后欠佳，因此定期進(jìn)行宮頸癌篩查對(duì)早期發(fā)現(xiàn)和治療宮頸癌至關(guān)重要,。

目前傳統(tǒng)的子宮頸癌篩查多是使用細(xì)胞學(xué)/HPV初篩,，但其特異性和靈敏度都不高,。2023年，《老年女性子宮頸病變篩查及異常管理中國(guó)專家共識(shí)》將p16/Ki-67細(xì)胞學(xué)雙染納入篩查方案,。

p16/Ki-67雙染

p16/Ki-67雙染檢測(cè)是一種用于宮頸癌前病變?cè)\斷的免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)方法,，樣本類型為宮頸脫落細(xì)胞。檢測(cè)原理是正常細(xì)胞不會(huì)同時(shí)出現(xiàn)p16和Ki-67過(guò)度表達(dá),，雙染陽(yáng)性則提示提示高危型HPV持續(xù)性感染,，與高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）相關(guān)。

圖1 老年女性以HR-HPV為基礎(chǔ)的子宮頸病變查及異常管理流程,。HR-HPV：高危型人乳頭瘤?。籘CT：薄層液基細(xì)胞學(xué)檢查,；ASC-US:不典型鱗狀上皮細(xì)胞,。

已有大量研究使用臨床樣本進(jìn)行篩查方法比較：

Mariam El-Zein研究收集492個(gè)宮頸樣本進(jìn)行雙染檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：①雙染細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的陽(yáng)性率隨著組織學(xué)嚴(yán)重程度的增加而增加,，從正常組織的30.6%到癌癥組織的87.5%,。②雙染細(xì)胞學(xué)單獨(dú)使用時(shí)，對(duì)于CIN2+和CIN3+的敏感性低于HPV檢測(cè),，但在CIN2+和CIN3+的特異性上分別提高了7.9%和9.6%,。

在中國(guó)也有相關(guān)臨床樣本研究：選取537名年齡在20至79歲之間的女性的宮頸脫落細(xì)胞，p16/Ki-67的特異性在檢測(cè)CIN2+和CIN3+中都高于HR-HPV檢測(cè)（CIN2+為85.96%對(duì)比67.54%,，CIN3+為79.84%對(duì)比62.90%）,，雙染可作為管理ASC-US女性的有效分流方法。

p16/Ki-67雙染診斷優(yōu)勢(shì)

在臨床上,，p16/Ki-67雙染檢測(cè)在宮頸癌篩查中具有高靈敏度，其特異性和靈敏性都優(yōu)于HPV檢測(cè)和細(xì)胞學(xué)檢測(cè),。有助于提高宮頸癌前病變的檢出率,，也減少陰道鏡的過(guò)度干預(yù)。

p16/Ki-67雙染檢測(cè)不受HPV不同亞型的影響,，可獨(dú)立評(píng)價(jià)病變嚴(yán)重程度,，p16/Ki-67雙染的陽(yáng)性率，隨著宮頸病變的嚴(yán)重程度升高而升高,，可減少延誤診斷,。

p16/Ki-67雙染可以避免單染帶來(lái)的定位差異，通過(guò)陽(yáng)性細(xì)胞在鱗狀上皮的定位,，結(jié)合TCT與HPV檢測(cè)可用于監(jiān)測(cè)HSIL(CINII/II)的復(fù)發(fā),，可對(duì)宮頸CIN的病理診斷、分級(jí)和分層管理,。

雙染檢測(cè)不受細(xì)胞形態(tài)學(xué)影響,，細(xì)胞質(zhì)染色為特異性棕色(p16),、細(xì)胞核染色為特異性紅色(Ki-67)，僅通過(guò)顏色變化即可進(jìn)行判別,，用于輔助診斷宮頸癌前病變,。通過(guò)更客觀簡(jiǎn)便的判讀方式，而非通過(guò)形態(tài)學(xué),，操作簡(jiǎn)便性和準(zhǔn)確性都大幅度提升,。

圖2 子宮頸上皮細(xì)胞p16/Ki-67雙染陽(yáng)性

隨著中國(guó)人口老齡化和經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展欠均衡，部分地區(qū)的子宮頸病變篩查率低,，我們子宮頸癌患者發(fā)病人數(shù)也逐漸升高,，提高篩查人數(shù)和優(yōu)化篩查方式刻不容緩。p16/Ki-67雙染檢測(cè)技術(shù)為宮頸癌的早期診斷提供了一種更為簡(jiǎn)便,、安全且高效的篩查方法,，為宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)和治療提供了強(qiáng)有力的支持。

S-RMab®單克隆抗體

斯達(dá)特p16&Ki-67單克隆抗體,，重組兔單抗,，具有更高的特異性、靈敏度,、穩(wěn)定性,，細(xì)胞定位準(zhǔn)確，為臨床提供更準(zhǔn)確的診斷結(jié)果,。