YSKD小動物霧化儀構(gòu)建 OVA/CFA 誘導(dǎo)中性粒細胞哮喘小鼠模型

哮喘是一種常見的慢性氣道炎癥疾病,，全球患病率持續(xù)上升，嚴(yán)重哮喘（SA）患者對糖皮質(zhì)激素治療反應(yīng)有限,，亟需新的治療靶點,。氣道上皮作為機體與外界環(huán)境的第一道屏障，在哮喘免疫調(diào)節(jié)中起關(guān)鍵作用,。通過支氣管上皮轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析,，探究哮喘嚴(yán)重程度相關(guān)的免疫浸潤機制，鑒定關(guān)鍵基因和潛在治療藥物,。

廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院/廣州中醫(yī)藥大學(xué)嶺南醫(yī)學(xué)研究中心/廣東省中醫(yī)藥臨床研究院等研究團隊,，使用YSKD北京元森凱德生物技術(shù)公司研制生產(chǎn)的小動物霧化給藥儀HY-JSE01，構(gòu)建OVA/CFA誘導(dǎo)的中性粒細胞哮喘小鼠模型和LPS誘導(dǎo)的人支氣管上皮細胞（16HBE）損傷模型,。在中科院分區(qū)：1區(qū), JCR分區(qū)：Q1, 期刊名：Communications Biology,，發(fā)表題為《Bronchial epithelial transcriptomics and experimental validation reveal asthma severityrelated neutrophilc signatures and potential treatments》

一、研究方法 

1. 數(shù)據(jù)與模型：從GEO數(shù)據(jù)庫獲取GSE89809數(shù)據(jù)集,，包含健康對照,、輕/中/重度哮喘患者的氣道上皮基因表達數(shù)據(jù)。

北京元森凱德生物技術(shù)公司YSKD研制生產(chǎn)的小動物霧化給藥儀HY-JSE01 ,，用于構(gòu)建OVA/CFA誘導(dǎo)的中性粒細胞哮喘小鼠模型,，通過霧化OVA激發(fā)小鼠氣道炎癥反應(yīng)。6-8周齡雌性BALB/C小鼠,，隨機分為對照組和模型組,，模型激發(fā)期（第21-30天） ，霧化溶液：5%卵清蛋白（OVA）溶液,。 霧化流量：0.2 mL/min,。處理時間：每日40分鐘，連續(xù)10天,。

- 精準(zhǔn)控制霧化條件：恒定的流量和時間設(shè)置確保OVA均勻沉積于小鼠氣道,，提高模型重復(fù)性。 

- 貼近臨床場景：霧化激發(fā)方式模擬人類哮喘患者接觸過敏原的途徑,，增強實驗結(jié)果的臨床轉(zhuǎn)化價值,。

2. 生物信息學(xué)分析：采用ssGSEA,、CIBERSORTx等方法評估免疫細胞浸潤程度。 通過WGCNA（加權(quán)基因共表達網(wǎng)絡(luò)分析）鑒定與哮喘嚴(yán)重程度相關(guān)的模塊,。 構(gòu)建PPI（蛋白質(zhì)互作）和GeneMANIA網(wǎng)絡(luò),，篩選樞紐基因。 

3. 實驗驗證：通過RT-qPCR,、ELISA等檢測樞紐基因表達及炎癥因子水平,。使用CCK-8實驗評估藥物Reparixin對LPS損傷細胞的保護作用。 

二,、主要結(jié)果 

1. 免疫浸潤與哮喘嚴(yán)重程度的關(guān)聯(lián)：中性粒細胞,、肥大細胞等在SA患者中浸潤程度顯著高于輕/中度哮喘及健康對照，且與肺功能指標(biāo)（FEV1,、FVC）呈負相關(guān),。 

2. 樞紐基因鑒定：通過WGCNA和PPI分析，確定10個樞紐基因：PTPRC,、TLR2,、MMP9、FCGR3B,、TYROBP,、CXCR1、S100A12,、FPR1,、CCR1、CXCR2,，主要參與中性粒細胞趨化,、炎癥信號通路。 

3. 潛在藥物篩選與驗證： 藥物Reparixin（CXCR1/CXCR2抑制劑）可抑制LPS誘導(dǎo)的16HBE細胞損傷,，降低CXCR1,、CXCR2和MMP9的表達。

北京元森凱德生物技術(shù)公司YSKD研制生產(chǎn)的小動物霧化給藥儀HY-JSE01, 通過霧化OVA誘導(dǎo)小鼠氣道過敏性炎癥,，模擬人類哮喘的急性加重過程,，使小鼠出現(xiàn)中性粒細胞浸潤、黏液高分泌,、氣道重塑等病理特征,。 

模型小鼠的肺組織和支氣管肺泡灌洗液（BAL）中，樞紐基因（如CXCR1,、CXCR2）的表達及中性粒細胞相關(guān)炎癥因子（如IL-8,、MPO）水平顯著升高，為后續(xù)藥物驗證提供可靠的病理模型,。 哮喘嚴(yán)重程度與中性粒細胞浸潤密切相關(guān),，10個樞紐基因可作為潛在生物標(biāo)志物。Reparixin通過靶向CXCR1/CXCR2/MMP9,，展現(xiàn)出治療SA的潛力,。 

附：北京元森凱德生物技術(shù)有限公司研制生產(chǎn)的動物霧化吸入給藥儀器，主要包括大/小動物肺部氣管直接遞送裝置（動物氣道霧化針）,、小動物霧化給藥儀,，動物口鼻吸入、僅鼻腔霧化/鼻腦給藥器,、全身式暴露染毒,、動物煙氣/PM2.5染毒系統(tǒng)、粉塵氣溶膠發(fā)生器,、液體氣溶膠發(fā)生器,、靜式吸入染毒柜、臭氧動物暴露裝置,、動物高低壓氧艙,，此外給客戶多樣化提供自動型實驗動物an'le'si系統(tǒng)（窒息系統(tǒng)、二氧化碳安樂處死箱）,，實驗動物除臭暫存系統(tǒng),，巴馬香豬皮，NGI Gentle Rocker智能洗盤裝置,，NGI新一代撞擊器和ACI安德森撞擊器的校驗與檢測,。

附：北京元森凱德生物技術(shù)有限公司（BEIJING YSKD BIO-TECHNOLOGY CO.,LTD），簡稱元森凱德（YSKD）,，2013年成立于北京中關(guān)村科技園,，是一家專業(yè)從事生命科學(xué)類實驗儀器研制、生產(chǎn)與銷售的科技創(chuàng)新型企業(yè),。服務(wù)毒理學(xué),、藥理學(xué)、免疫學(xué),、生物安全,、大氣污染物、化學(xué)物質(zhì)毒性鑒定,、臨床前藥物開發(fā)與安全性評價,、呼吸系統(tǒng)、環(huán)境與健康等領(lǐng)域,。

部分用戶案例：哈佛大學(xué),，麻省理工學(xué)院，新加坡國立大學(xué),，瑞士蘇黎世聯(lián)邦理工學(xué)院,，中國科學(xué)院上海藥物研究所,，中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所，麗珠醫(yī)藥集團股份有限公司,，康龍化成（寧波）生物醫(yī)藥有限公司,，中日醫(yī)院呼吸病學(xué)研究中心/中日友好臨床醫(yī)學(xué)研究所，北京中醫(yī)藥大學(xué),，中國藥科大學(xué),，沈陽藥科大學(xué)，復(fù)旦大學(xué),，浙江大學(xué),，四川大學(xué)，中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院等