3000型氨基酸分析儀離子交換色譜與柱后衍生法的精密協(xié)同
3000型氨基酸分析儀采用陽(yáng)離子交換色譜與柱后茚三酮衍生技術(shù),通過(guò)多維度分離與高靈敏度檢測(cè),,實(shí)現(xiàn)對(duì)食品,、生物樣本中氨基酸的精準(zhǔn)定量分析。其核心原理涵蓋離子交換分離,、柱后衍生反應(yīng)及光度檢測(cè)三大模塊,,以下從技術(shù)原理、操作流程及創(chuàng)新優(yōu)勢(shì)展開(kāi)解析,。
一,、離子交換色譜:基于電荷差異的分離機(jī)制
該儀器搭載陽(yáng)離子交換樹(shù)脂色譜柱,通過(guò)流動(dòng)相(緩沖液)推動(dòng)氨基酸混合物流經(jīng)柱體,。不同氨基酸因側(cè)鏈基團(tuán)差異(如酸性,、堿性、中性)與樹(shù)脂中的磺酸基團(tuán)發(fā)生離子交換,,結(jié)合強(qiáng)度與pH值密切相關(guān),。例如,在pH2.2的酸性條件下,,帶正電荷的氨基酸(如賴氨酸,、精氨酸)與樹(shù)脂結(jié)合力較強(qiáng),而中性氨基酸(如丙氨酸,、纈氨酸)結(jié)合力較弱,。通過(guò)梯度洗脫(如從pH2.2逐步升至pH4.0),不同氨基酸按保留時(shí)間依次洗脫,,實(shí)現(xiàn)高效分離,。該技術(shù)可同時(shí)分析21種蛋白水解氨基酸及43種生理體液游離氨基酸,分離度達(dá)1.2以上,,滿足國(guó)標(biāo)GB 5009.124要求,。
二、柱后茚三酮衍生:高靈敏度顯色反應(yīng)
分離后的氨基酸與茚三酮試劑在高溫反應(yīng)器(115-120℃)中發(fā)生顯色反應(yīng),,生成紫色或黃色化合物,。其中,,除脯氨酸、羥脯氨酸生成黃色產(chǎn)物(440nm檢測(cè))外,,其余氨基酸均生成紫色產(chǎn)物(570nm檢測(cè)),。該反應(yīng)靈敏度達(dá)納摩爾級(jí)別,可檢測(cè)低至0.1 μmol/L的氨基酸濃度,。3000型儀器通過(guò)雙波長(zhǎng)檢測(cè)器同步采集信號(hào),,結(jié)合惰性氣體保護(hù)的試劑瓶與獨(dú)立閥門設(shè)計(jì),確保衍生反應(yīng)的穩(wěn)定性與試劑壽命,。
三,、創(chuàng)新優(yōu)勢(shì)與性能突破
1.全自動(dòng)化操作:儀器配備200位全封閉樣品瓶托盤與自動(dòng)進(jìn)樣器,支持0.1-100 μL進(jìn)樣量,,配合洗針功能避免交叉污染,。柱溫箱與衍生系統(tǒng)獨(dú)立控溫(±0.1°C),確保重現(xiàn)性,。
2.高效梯度洗脫:采用四元低壓梯度泵,,流速范圍0.001-9.999 mL/min,梯度混合精密度≤±0.2%,。鈉鹽體系分析時(shí)間縮短至30-50分鐘,,鋰鹽體系分析生理體液樣本僅需90-180分鐘。
3.智能化軟件支持:中文界面軟件集成梯度程序設(shè)定,、色譜分峰與定量功能,,支持審計(jì)追蹤與數(shù)據(jù)管理。內(nèi)置國(guó)標(biāo)方法庫(kù),,一鍵調(diào)用食品,、飼料等檢測(cè)模板,,簡(jiǎn)化操作流程,。
3000型氨基酸分析儀通過(guò)離子交換色譜與柱后衍生技術(shù)的深度融合,實(shí)現(xiàn)了高分離度,、高靈敏度與高自動(dòng)化水平的統(tǒng)一,。其技術(shù)參數(shù)與操作流程嚴(yán)格遵循國(guó)際標(biāo)準(zhǔn),廣泛應(yīng)用于食品安全,、臨床診斷及科研領(lǐng)域,,為氨基酸分析提供了可靠的技術(shù)保障。
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