大鼠促黃體生成素（LH）elisa加樣：
　　
　　在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物.加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡.
　　
　　在ELISA中,，進(jìn)行各項實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括:
　　
　　（1）酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定（見酶標(biāo)記抗體部份）,。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度,。
　　
　?。?）酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全,、有明顯地顯色反應(yīng),，而本身無色,。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù),。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時間,，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,，尤其是H2O2在臨用前加入
　　
　　大鼠促黃體生成素（LH）ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù),。由于抗原,、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后,，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,，通過不同的設(shè)計,，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法（圖a）,、用于檢測抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等,。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
　　
　　大鼠促黃體生成素（LH）注意事項：
　　
　　收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測的標(biāo)本,，儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,，將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存,。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時,，-20℃可保存1個月,。-70度可保存6個月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶,。