手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
HPLC制備色譜柱是高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography)技術(shù)中用于分離和純化化合物的重要工具,。
-柱管：通常由不銹鋼或玻璃制成,，具有良好的耐壓性和化學(xué)穩(wěn)定性,。柱管的內(nèi)徑?jīng)Q定了色譜柱的裝填量和分離規(guī)模，一般制備色譜柱的內(nèi)徑在50 -200mm范圍內(nèi),。
-填料：是色譜柱的核心部分,，常見的填料有硅膠、氧化鋁,、有機(jī)聚合物微球等,。硅膠基質(zhì)的填料具有較好的機(jī)械強(qiáng)度和化學(xué)穩(wěn)定性，通過鍵合不同的官能團(tuán)(如C18,、C8,、C4等)，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)不同極性化合物的分離,。
-篩板：位于柱管的兩端,，用于支撐填料，防止填料泄漏,，同時(shí)保證流動(dòng)相能夠均勻地通過色譜柱,。
HPLC制備色譜柱的使用步驟：
1.準(zhǔn)備工作
-安全檢查：確保實(shí)驗(yàn)室區(qū)域的安全性，佩戴個(gè)人防護(hù)設(shè)備,，如實(shí)驗(yàn)室衣物,、手套和護(hù)目鏡。
-儀器檢查：檢查HPLC設(shè)備的狀態(tài),，確保柱,、檢測(cè)器、泵等部件正常運(yùn)行,。開啟HPLC系統(tǒng)，設(shè)置合適的溫度,、流速等參數(shù),，使系統(tǒng)達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。
-流動(dòng)相準(zhǔn)備：根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求配制流動(dòng)相,，用0.2μm濾紙過濾溶劑或流動(dòng)相,，并進(jìn)行超聲脫氣，以去除其中的氣泡和雜質(zhì),。
-樣品準(zhǔn)備：將待測(cè)樣品用適當(dāng)?shù)娜軇┤芙獠⑾♂屩梁线m濃度,，同樣用0.2μm濾膜過濾，確保樣品溶液澄清無雜質(zhì),。
2.安裝色譜柱：將制備色譜柱安裝在HPLC系統(tǒng)中,，注意連接要緊密，防止漏液,。安裝前可檢查色譜柱的外觀是否有損壞等情況,。
3.系統(tǒng)平衡：用流動(dòng)相沖洗色譜柱,，一般沖洗時(shí)間為15-30分鐘，直至基線平穩(wěn),，以確保色譜柱內(nèi)充滿流動(dòng)相且達(dá)到平衡狀態(tài),。
4.進(jìn)樣測(cè)定：選擇合適的進(jìn)樣方式和進(jìn)樣量，將樣品注入HPLC系統(tǒng),。開始采集數(shù)據(jù),，記錄色譜峰的保留時(shí)間、峰寬,、峰高等信息,。
5.數(shù)據(jù)處理與分析：根據(jù)記錄的數(shù)據(jù)，計(jì)算色譜柱的相關(guān)參數(shù),，如理論塔板數(shù),、不對(duì)稱因子、分離度等,，以評(píng)估色譜柱的性能,。常見的數(shù)據(jù)處理方法包括峰面積的測(cè)定、峰高的測(cè)定,、定量分析和定性分析等,。
6.清洗與保存色譜柱：測(cè)定完成后，用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑瓷V柱,，去除殘留的樣品和流動(dòng)相,。對(duì)于反相色譜柱，通常先用甲醇或乙腈沖洗,，再用純水沖洗,；對(duì)于正相色譜柱，可用正己烷等有機(jī)溶劑沖洗,。清洗完畢后,，將色譜柱妥善保存，避免干燥和污染,。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品,，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載,、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品,，目的在于傳遞更多信息,，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任,。其他媒體,、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心