間充質(zhì)干細胞（MSC）無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基

貨號：B01097

規(guī)格：500mL 

產(chǎn)品概述

間充質(zhì)干細胞（MSC）無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基是根據(jù)UltraGRO™-Advanced添加劑適配的一款化學成分明確、無異種動物源成分的培養(yǎng)基,。各種營養(yǎng)成分相互搭配特別適合用于人間充質(zhì)干細胞（包括臍帶,，脂肪，骨髓等來源）的無血清條件下原代分離及傳代培養(yǎng),，具備保持間充質(zhì)干細胞的多項分化潛能及維持其良好的增殖速率的特性,。

產(chǎn)品特點

?無動物源、無蛋白,、wan全化學成分限定的培養(yǎng)基

?適應(yīng)多種人間充質(zhì)干細胞,，包括臍帶，脂肪,，骨髓等來源

?GMP生產(chǎn),，全進口原料,，批間差異小

?無需包被培養(yǎng)板，可用于原代細胞分離及傳代

?經(jīng)過低內(nèi)毒素和微生物檢測

產(chǎn)品詳情

使用說明

間充質(zhì)干細胞（MSC）wan全培養(yǎng)基配制

將UltraGRO™-Advanced添加劑（貨號HPCFDCRL50）在37℃水浴wan全融化,，按體積1:19加入到間充質(zhì)干細胞（MSC）無血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,，輕輕混合均勻，即為間充質(zhì)干細胞wan全培養(yǎng)基,。

注：原代分離推薦使用青霉素-鏈霉素溶液（貨號B03002），其他代次不推薦使用,。

原代間充質(zhì)干細胞分離

1,、手術(shù)臺上取正常剖宮產(chǎn)健康新生兒臍帶，浸泡于含青霉素-鏈霉素溶液的wan全培養(yǎng)基中,，4℃保存,。

2、超凈臺內(nèi)取出臍帶,，用DPBS（貨號B02001）洗去臍帶殘留血液,，剪成3-4cm小段。

3,、用DPBS清洗一次,，用組織鑷去除臍帶中的2條臍動脈。

4,、 沿臍靜脈將臍帶剪開,，用組織鑷刮去靜脈，留下華通氏膠（Whalton’s Jelly）,。

5,、 將已除去臍動靜脈的臍帶，放入DPBS中清洗2-3次,，剪成1.5mm左右大小,。

6、 將剪好的臍帶均勻鋪于培養(yǎng)皿或T75培養(yǎng)瓶中,，間隔5mm左右,。

7、 靜置5-10分鐘后,，加入wan全培養(yǎng)基,，放置于二氧化碳培養(yǎng)箱中（條件為5%CO₂、37℃）,。

8,、 培養(yǎng)3天后，鏡下觀察有無細菌污染,，進行半量換液,。

9,、 細胞培養(yǎng)至7-10天可見長梭形細胞從組織塊內(nèi)爬出，7天進行全換液,。

10,、培養(yǎng)至12-15天可見大量細胞爬出，此時爬出的細胞記為P0,。

11,、待組織塊周邊細胞密度達到80%-90%左右時，0.25%胰酶消化液（貨號B03003或B03001）消化細胞進行傳代,。并記為P1,，以此類推。

間充質(zhì)干細胞傳代

1,、待細胞融和度達到約80-90%進行傳代（注：細胞不能太密集,，否則容易分化），吸棄培養(yǎng)皿或瓶中培養(yǎng)基,。

2,、加適量DPBS輕輕沖洗1次。

3,、加入0.25%胰酶消化液,，室溫作用。

4,、顯微鏡下觀察細胞wan全脫落后,，用移液器輕輕吹打細胞，使細胞wan全脫落,。

5,、若使用B03001胰酶消化液，500g離心10min,。若使用B03003胰酶消化液則無需離心,，直接進行步驟7。

6,、棄上清,，用wan全培養(yǎng)基懸浮細胞。

7,、按照6000-8000個細胞/cm²的密度進行傳代,，例如T175培養(yǎng)瓶中加入25mL細胞懸液。

8,、均勻鋪在培養(yǎng)皿或瓶底部,，置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

9,、每2-3天更換一次wan全培養(yǎng)基,，并記為P2,、P3等。

間充質(zhì)干細胞凍存

1,、待細胞融合度達到80-90%左右時,，可進行細胞凍存。

2,、收集細胞,，將細胞團重懸在1mL無血清細胞凍存液（貨號B04001）中。

3,、裝入凍存管,，無需程序降溫可直接-80℃冰箱保存1年。

注：如需轉(zhuǎn)入液氮罐中長期凍存,，可在-80℃保存一天后轉(zhuǎn)入液氮罐中。

注意事項

1,、MSC分離時確保組織塊始終貼壁,，換液動作要輕柔，避免沖動組織塊,。

2,、MSC分離過程中尤其是初期更換培養(yǎng)基量不宜過多，以免組織塊漂浮,。

3,、本產(chǎn)品基于UltraGRO™-Advanced添加劑開發(fā)，適配性非常好,，可直接使用,。

4、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。

5、本產(chǎn)品僅用于科學研究使用,，不得用于診斷或治療,。