LiChrosorb色譜柱:經(jīng)典反相柱的技術(shù)解析與應(yīng)用指南
在高效液相色譜(HPLC)分析領(lǐng)域,,色譜柱的選擇直接影響分離效果和數(shù)據(jù)可靠性,。LiChrosorb作為默克(Merck)公司推出的經(jīng)典反相色譜柱系列,自20世紀(jì)70年代問世以來(lái),,憑借其優(yōu)異的穩(wěn)定性和廣泛的適用性,,成為制藥、環(huán)境檢測(cè)及食品分析等領(lǐng)域的基準(zhǔn)柱之一,。本文將深入解析LiChrosorb色譜柱的技術(shù)特點(diǎn),、性能優(yōu)勢(shì)、應(yīng)用場(chǎng)景及維護(hù)要點(diǎn),。
1.LiChrosorb色譜柱的技術(shù)背景
(1)歷史沿革
-由德國(guó)默克公司于1973年推出,,是早期商業(yè)化硅膠基鍵合相色譜柱的代表產(chǎn)品。
-名稱"LiChrosorb"源自"LiChro"(液相色譜)和"sorb"(吸附劑)的組合,。
(2)產(chǎn)品定位
-中端市場(chǎng):介于基礎(chǔ)型C18柱與UPLC柱之間,。
-通用型分析:適合方法開發(fā)、常規(guī)質(zhì)量控制等場(chǎng)景,。
2.核心技術(shù)與性能特點(diǎn)
(1)固定相特性
(2)鍵合相類型
-RP-18:十八烷基鍵合相,,高疏水性,適合非極性化合物,。
-RP-8:辛基鍵合相,,中等保留,平衡疏水性與極性,。
-CN:氰丙基相,,正相/反相兩用,。
-NH?:氨基柱,糖類分析專用,。
(3)硅膠基質(zhì)優(yōu)勢(shì)
-高純度球形硅膠(>99.99%SiO?),。
-雙封端處理減少游離硅羥基,改善堿性化合物峰形,。
3.典型應(yīng)用場(chǎng)景
(1)制藥行業(yè)
-原料藥純度檢測(cè):如抗生素(頭孢類)的雜質(zhì)譜分析,。
-藥典方法合規(guī):符合USP L1(C18)、L7(C8)等分類,。
(2)環(huán)境監(jiān)測(cè)
-多環(huán)芳烴(PAHs):EPA 610方法推薦柱,。
-農(nóng)藥殘留:有機(jī)氯農(nóng)藥的梯度洗脫分離。
(3)食品分析
-維生素檢測(cè):脂溶性維生素(A/D/E)的等度分離,。
-添加劑分析:防腐劑(苯甲酸,、山梨酸)的快速篩查。
4.方法開發(fā)與優(yōu)化建議
(1)流動(dòng)相選擇
-基礎(chǔ)配方:甲醇/水(中性化合物)或乙腈/緩沖鹽(離子化物質(zhì)),。
-緩沖液推薦:
-pH 2-3:磷酸鹽/甲酸
-pH 7-8:磷酸鹽(需控制柱溫<40℃)
適用于中等極性化合物分離
(3)色譜柱維護(hù)
-再生步驟:
1.甲醇沖洗30分鐘(1 mL/min)
2.0.1 M EDTA清洗(金屬污染時(shí))
3.正己烷-異丙醇(1:1)處理脂溶性殘留
-保存條件:甲醇充滿柱體,,4℃冷藏。
5.常見問題與解決方案
(1)峰拖尾
-可能原因:硅羥基效應(yīng)或柱效下降,。
-對(duì)策:
-添加0.1%三乙胺(堿性化合物)
-更換保護(hù)柱(當(dāng)理論塔板數(shù)下降>20%)
(2)壓力升高
-排查步驟:
1.檢查在線過(guò)濾器
2.反向沖洗色譜柱
3.更換入口篩板
LiChrosorb色譜柱以其穩(wěn)定的性能和豐富的選擇性,,在傳統(tǒng)HPLC分析中持續(xù)發(fā)揮著重要作用。雖然新型超高壓柱(UHPLC)逐漸普及,,但在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室,、藥企QC部門及教學(xué)領(lǐng)域,LiChrosorb仍是經(jīng)濟(jì)可靠的選擇,。合理的方法開發(fā)和規(guī)范的維護(hù)保養(yǎng),,可顯著延長(zhǎng)其使用壽命并保證數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。
1.LiChrosorb色譜柱的技術(shù)背景
(1)歷史沿革
-由德國(guó)默克公司于1973年推出,,是早期商業(yè)化硅膠基鍵合相色譜柱的代表產(chǎn)品。
-名稱"LiChrosorb"源自"LiChro"(液相色譜)和"sorb"(吸附劑)的組合,。
(2)產(chǎn)品定位
-中端市場(chǎng):介于基礎(chǔ)型C18柱與UPLC柱之間,。
-通用型分析:適合方法開發(fā)、常規(guī)質(zhì)量控制等場(chǎng)景,。
2.核心技術(shù)與性能特點(diǎn)
(1)固定相特性
(2)鍵合相類型
-RP-18:十八烷基鍵合相,,高疏水性,適合非極性化合物,。
-RP-8:辛基鍵合相,,中等保留,平衡疏水性與極性,。
-CN:氰丙基相,,正相/反相兩用,。
-NH?:氨基柱,糖類分析專用,。
(3)硅膠基質(zhì)優(yōu)勢(shì)
-高純度球形硅膠(>99.99%SiO?),。
-雙封端處理減少游離硅羥基,改善堿性化合物峰形,。
3.典型應(yīng)用場(chǎng)景
(1)制藥行業(yè)
-原料藥純度檢測(cè):如抗生素(頭孢類)的雜質(zhì)譜分析,。
-藥典方法合規(guī):符合USP L1(C18)、L7(C8)等分類,。
(2)環(huán)境監(jiān)測(cè)
-多環(huán)芳烴(PAHs):EPA 610方法推薦柱,。
-農(nóng)藥殘留:有機(jī)氯農(nóng)藥的梯度洗脫分離。
(3)食品分析
-維生素檢測(cè):脂溶性維生素(A/D/E)的等度分離,。
-添加劑分析:防腐劑(苯甲酸,、山梨酸)的快速篩查。
4.方法開發(fā)與優(yōu)化建議
(1)流動(dòng)相選擇
-基礎(chǔ)配方:甲醇/水(中性化合物)或乙腈/緩沖鹽(離子化物質(zhì)),。
-緩沖液推薦:
-pH 2-3:磷酸鹽/甲酸
-pH 7-8:磷酸鹽(需控制柱溫<40℃)
適用于中等極性化合物分離
(3)色譜柱維護(hù)
-再生步驟:
1.甲醇沖洗30分鐘(1 mL/min)
2.0.1 M EDTA清洗(金屬污染時(shí))
3.正己烷-異丙醇(1:1)處理脂溶性殘留
-保存條件:甲醇充滿柱體,,4℃冷藏。
5.常見問題與解決方案
(1)峰拖尾
-可能原因:硅羥基效應(yīng)或柱效下降,。
-對(duì)策:
-添加0.1%三乙胺(堿性化合物)
-更換保護(hù)柱(當(dāng)理論塔板數(shù)下降>20%)
(2)壓力升高
-排查步驟:
1.檢查在線過(guò)濾器
2.反向沖洗色譜柱
3.更換入口篩板
LiChrosorb色譜柱以其穩(wěn)定的性能和豐富的選擇性,,在傳統(tǒng)HPLC分析中持續(xù)發(fā)揮著重要作用。雖然新型超高壓柱(UHPLC)逐漸普及,,但在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室,、藥企QC部門及教學(xué)領(lǐng)域,LiChrosorb仍是經(jīng)濟(jì)可靠的選擇,。合理的方法開發(fā)和規(guī)范的維護(hù)保養(yǎng),,可顯著延長(zhǎng)其使用壽命并保證數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。
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