在生物醫(yī)學研究中,,原代細胞培養(yǎng)是一種極-具價值的實驗手段,,尤其在組織工程、藥物篩選,、疾病模型構(gòu)建等領(lǐng)域發(fā)揮著不可替代的作用,。然而,原代細胞的培養(yǎng)難度遠高于常規(guī)細胞系,。為什么原代細胞對培養(yǎng)環(huán)境如此“挑剔”,?又為什么必須強調(diào)使用“高品質(zhì)胎牛血清”?本期細胞學堂為你揭秘其中真相,。
01# 原代細胞培養(yǎng)特點
原代細胞是指直接從組織中分離得到的細胞,,它們通常具有一定的分化狀態(tài),分裂能力有限或已停止,,難以進行長期傳代培養(yǎng),。原代細胞保留了體內(nèi)細胞的代謝特征,生物學特性更貼近真實生理狀態(tài),。相比常規(guī)細胞系,,原代細胞培養(yǎng)面臨多重挑戰(zhàn):
分裂能力有限:很多原代細胞在體外增殖速度慢,傳代次數(shù)有限,。
對環(huán)境高度敏感:剛脫離體內(nèi)環(huán)境,,尚未適應(yīng)體外培養(yǎng)條件。
對營養(yǎng)要求高:對培養(yǎng)基,、血清及添加物成分依賴性強,。
純度控制困難:往往混有不同類型細胞,純化難度大,。
因此,,要想獲得理想的原代細胞狀態(tài),必須從培養(yǎng)體系的每一個環(huán)節(jié)精細設(shè)計,。而胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS),,就是這其中的關(guān)鍵一環(huán)。
02# 胎牛血清:原代細胞培養(yǎng)的 “生命線”
胎牛血清(FBS)富含有多種營養(yǎng)物質(zhì),、生長因子,、激素以及復雜未明確定義的生物活性成分,這些成分能夠為細胞的增殖,、分化和代謝活動提供有力的支持,。在原代細胞培養(yǎng)過程中,,F(xiàn)BS發(fā)揮著重要作用。例如,,它可以促進細胞粘附,、維持細胞表型特征和代謝功能,并在某些情況下提高細胞的生長效率,。對于剛從體內(nèi)分離出來,、狀態(tài)較為脆弱的初代原代細胞而言,血清的品質(zhì)直接影響細胞的狀態(tài),,關(guān)系到實驗結(jié)果的可靠性與準確性,。
然而,并非所有FBS使用效果都相同,。不同品質(zhì)的FBS在細胞貼壁效率,、生長速度、毒性反應(yīng)以及代謝活性等方面差異明顯,。
03# 不同品質(zhì)胎牛血清區(qū)別
不同品質(zhì)的胎牛血清(FBS)對細胞狀態(tài)產(chǎn)生的影響可能大相徑庭,,主要體現(xiàn)在以下幾個方面:
細胞增殖和分化能力:FBS成分決定細胞增殖和分化潛力。低品質(zhì)血清可能因關(guān)鍵因子缺失,,導致原代細胞或干細胞的貼壁效率,、增殖速率顯著下降。
細胞毒性反應(yīng)和轉(zhuǎn)化敏感性:低品質(zhì)血清中內(nèi)毒素,、血紅蛋白等有害物質(zhì)含量較高,,可能誘發(fā)細胞產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng),影響實驗穩(wěn)定性,,導致實驗結(jié)果出現(xiàn)波動,,甚至導致細胞凋亡。
細胞因子濃度波動:不同品質(zhì)FBS在細胞因子和生長因子的濃度上也存在差異,,其濃度的波動會引入額外的實驗變量,。
ATP濃度差異:FBS中ATP含量在300-1,300 pmol/L之間波動。ATP作為細胞外信號分子,,通過激活嘌呤受體(如P2X7)影響細胞代謝,、增殖和炎癥反應(yīng)。
外泌體/微粒體含量不穩(wěn)定:高品質(zhì)FBS攜帶miRNA,、生長因子的細胞外囊泡(EVs)含量更加穩(wěn)定,,而低品質(zhì)血清中 EVs 含量波動大,可能導致細胞間通訊信號不一致,,影響細胞功能。
代謝活性和小分子成分差異:不同品質(zhì)級FBS在代謝活性和小分子成分方面也存在差異,。
理化性質(zhì)不一致:不同品質(zhì)的FBS在總蛋白濃度,、DNA殘留量,、滲透壓及pH值等理化性質(zhì)上存在顯著差異。
不同品質(zhì)FBS差異主要體現(xiàn)在細胞增殖,、分化,、細胞遷移、細胞毒性反應(yīng)等方面,,直接影響實驗結(jié)果的可重復性,。因此,選擇 FBS 時需綜合考量成分穩(wěn)定性,、安全性及實驗需求,,避免因血清品質(zhì)導致研究誤差。
04# 高品質(zhì)胎牛血清優(yōu)勢
尤其在原代細胞培養(yǎng)中,,推薦使用高品質(zhì)胎牛血清,,其優(yōu)勢主要體現(xiàn)在以下兩個方面:
生產(chǎn)工藝嚴謹:保障安全與穩(wěn)定
從源頭嚴格把控,采血牛群經(jīng)過嚴格檢疫和溯源管理,。
生產(chǎn)過程采用三級過濾除菌,,保障高純凈度和批次間一致性。
嚴控病原體風險及內(nèi)毒素含量,,最大-程度保障血清安全性與穩(wěn)定性,。
每批次生產(chǎn)條件均嚴格執(zhí)行國際胎牛血清生產(chǎn)標準,確保產(chǎn)品質(zhì)量始終如一,。
全程-20℃冷鏈與干冰運輸,,最大限度維持活性成分穩(wěn)定。
這些嚴謹?shù)纳a(chǎn)工藝措施顯著降低了血清中細菌,、真菌,、支原體、內(nèi)毒素等污染風險,,有效保護原代細胞免受不良影響,。
營養(yǎng)豐富:真正“補得上”
相比普通血清,高品質(zhì)FBS在活性成分含量和均一性方面表現(xiàn)更優(yōu):
營養(yǎng)成分配比更穩(wěn)定,,支持細胞高效貼壁與增殖,。
內(nèi)毒素、血紅蛋白含量極低,,降低細胞應(yīng)激反應(yīng)與毒性風險,。
富含促進細胞貼壁和增殖的生長因子、激素與蛋白質(zhì),,尤其適用于原代細胞和干細胞等高需求細胞培養(yǎng),。
05# 不同品質(zhì)胎牛血清培養(yǎng)原代細胞效果對比




與其他品牌的普通胎牛血清相比,普諾賽特級胎牛血清(澳洲)(貨號:164250)在原代細胞培養(yǎng)中表現(xiàn)出顯著優(yōu)勢,,顯著提升了原代組織塊爬出率,、細胞貼壁率,、細胞成熟分化狀態(tài)典型形態(tài)維持,增殖速度/增殖代次,,保持細胞/干細胞表面抗原穩(wěn)定表達,,原代細胞純度以及干細胞分化能力。

以上是關(guān)于高品質(zhì)胎牛血清在原代細胞培養(yǎng)中的重要性的詳解,。更多細胞培養(yǎng)干貨,,請持續(xù)關(guān)注細胞學堂專欄~
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