TGR5可能的作用機(jī)制與疾病類(lèi)型

TGR5在多種細(xì)胞類(lèi)型中被研究,，如肌肉細(xì)胞,、脂肪細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞（ECs）和巨噬細(xì)胞,。TGR5的功能依賴(lài)于細(xì)胞類(lèi)型,，從胰高血糖素樣肽-1 （GLP-1）的釋放和線粒體能量穩(wěn)態(tài)到炎癥反應(yīng)的控制。

TGR5在維持葡萄糖穩(wěn)態(tài)和胰島素敏感性方面上的效果已得到廣泛證明,。例如,，使用TGR5激動(dòng)劑6α-乙基-23(S)-甲基-膽酸(6α-ethyl-23(S)-methyl-cholic acid，INT-777)可以提高肥胖小鼠的胰島素敏感性,，7-硫酸膽酸以TGR5依賴(lài)性方式增加胰島素抵抗小鼠的葡萄糖耐量等,。機(jī)體各組織的TGR5可通過(guò)不同的分子機(jī)制參與血糖代謝的調(diào)節(jié)。TGR5對(duì)于血糖代謝的作用,，主要與腸促胰島素釋放相關(guān),，通過(guò)刺激腸內(nèi)分泌L細(xì)胞分泌GLP-1來(lái)實(shí)現(xiàn)。既往研究發(fā)現(xiàn),，GLP-1可促進(jìn)胰島素分泌,，促進(jìn)胰島β細(xì)胞存活和增殖，抑制細(xì)胞凋亡,，并且可有效刺激2型糖尿病患者的胰島素分泌并降低血糖,。早期觀點(diǎn)認(rèn)為T(mén)GR5被激活后刺激腸內(nèi)分泌L細(xì)胞內(nèi)cAMP水平增加，線粒體氧化磷酸化增加,，ATP/ADP比例增加,，導(dǎo)致ATP依賴(lài)性鉀離子通道(KATP)關(guān)閉，開(kāi)放鈣離子通道,，促進(jìn)鈣離子內(nèi)流,，釋放GLP-1。但后續(xù)大量研究驗(yàn)證了GLP-1的分泌確實(shí)與cAMP升高,，胞內(nèi)鈣離子升高有關(guān),，但與ATP依賴(lài)性鉀離子通道無(wú)關(guān)。Brighton等的實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證了GLP-1分泌與L細(xì)胞內(nèi)的cAMP和Ca2+濃度變化有關(guān),，并且說(shuō)明了該作用主要由位于基底外側(cè)L細(xì)胞膜上的TGR5介導(dǎo),。近年來(lái)，Goldspink等發(fā)現(xiàn)腸L細(xì)胞上的TGR5被激活后,，通過(guò)cAMP/PKA途徑,，開(kāi)放了L型Ca2+通道，促進(jìn)Ca2+內(nèi)流,，引發(fā)GLP-1分泌,。

有報(bào)道稱(chēng)，在慢性炎癥反應(yīng)中,，TNF-α可激活多種半胱天冬酶,，導(dǎo)致炎癥細(xì)胞凋亡。TGR5已被發(fā)現(xiàn)通過(guò)調(diào)節(jié)Rho/Rho相關(guān)蛋白激酶（ROCK）信號(hào)通路來(lái)調(diào)節(jié)TNF-α,。作為T(mén)GR5的激動(dòng)劑,，INT-777可以阻斷TNF-α誘導(dǎo)的RMEC增殖和遷移，抑制TNF-α促進(jìn)血管通透性的作用,。此外,，已有證據(jù)表明，TGR5激動(dòng)劑可以通過(guò)激活TGR5- camp蛋白激酶A （PKA）信號(hào)通路,，上調(diào)IL-10的表達(dá),，發(fā)揮抗炎和免疫抑制作用，降低促炎細(xì)胞因子IL-1β,、IL-6和TNF-α的表達(dá),。有研究表明，GLP-1可通過(guò)抑制NF-κB延緩ECs的損傷,，進(jìn)而抑制IL-1β,、IL-6、TNF-α等炎癥因子的分泌,。而各種研究證實(shí)GLP-1是TGR5的靶點(diǎn)之一,；其分泌依賴(lài)于TGR5。因此,，推測(cè)激活TGR5可能是刺激GLP-1分泌,、延緩RMEC損傷的有效途徑。

TGR5的細(xì)胞模型

目前全球尚無(wú)靶向TGR5的藥物獲批上市,，甚至連開(kāi)展臨床前的公司都很少,。但隨著GLP-1藥物在減肥領(lǐng)域大獲成功，相信不久將來(lái),，與減肥相關(guān)的TGR5靶點(diǎn)也會(huì)吸引越來(lái)越多的藥企將其加入研發(fā)列表,。

為了助力TGR5藥物的研發(fā)，科佰生物及時(shí)開(kāi)發(fā)了基于CREB/cAMP信號(hào)通路的TGR5細(xì)胞模型,，用于候選藥物早期機(jī)理研究,。

結(jié)果如下：

GPBAR1(TGR5) CRE-Luc HEK293 CBP71533

Figure 5. Dose Response of Agonists in GPBAR1(TGR5) CRE-Luc HEK293(C5).

GPBAR1(TGR5) CHO CBP71526

Figure 6.HTRF CAMP Assay with GPBARI(TGR5) CHO(C25).