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師兄支招|如何避免胎牛血清出現(xiàn)沉淀?

來(lái)源:蘇州千舍生物科技有限公司   2025年06月12日 17:03  

師兄支招|如何避免胎牛血清出現(xiàn)沉淀,?

甲:遇到過(guò)血清解凍后出現(xiàn)絮狀沉淀,,其實(shí)是纖維蛋白析出,。后來(lái)改成逐步解凍(4℃過(guò)夜→室溫復(fù)溫),,解凍時(shí)輕輕搖晃,沉淀明顯減少,;如果已經(jīng)產(chǎn)生沉淀,,用 3000rpm 離心 10 分鐘,上清液可正常使用,,不影響細(xì)胞培養(yǎng),。

乙:遇到血清沉淀,首先判斷沉淀類型,。若是纖維蛋白析出造成的絮狀沉淀,,可400 - 600g離心5 - 10分鐘,取上清使用,,不影響血清活性,。若沉淀較多且性質(zhì)不明,,可將血清在37℃水浴短暫加熱,使蛋白溶解,,再輕柔混勻,。注意避免劇烈搖晃,防止產(chǎn)生更多沉淀,。同時(shí),,盡量采用2 - 8℃緩慢解凍血清,減少反復(fù)凍融,,能從源頭降低沉淀產(chǎn)生幾率,。

沉淀形成并非偶然,而是多種因素共同作用的結(jié)果:

1,、溫度波動(dòng)

血清在反復(fù)凍融或儲(chǔ)存溫度不穩(wěn)定(如未嚴(yán)格保持在 - 20°C 或更低)時(shí),,蛋白質(zhì)溶解度下降,極易析出,。這就好比在炎熱的夏天,,原本溶解在水中的糖,當(dāng)水溫降低時(shí),,多余的糖就會(huì)結(jié)晶析出,。

2、物理應(yīng)力

劇烈搖晃,、震蕩或不當(dāng)?shù)囊埔翰僮鳎óa(chǎn)生氣泡)會(huì)破壞溶液中蛋白質(zhì)的穩(wěn)定狀態(tài),,促使聚集。想象一下平靜的湖面,,當(dāng)被外力劇烈攪動(dòng)時(shí),,水面會(huì)泛起層層漣漪,甚至形成漩渦,,血清中的蛋白質(zhì)在物理應(yīng)力的作用下也是如此,。

3、時(shí)間因素

長(zhǎng)期儲(chǔ)存,,尤其是不理想條件下,,沉淀形成幾率顯著增加。就像存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)的食物會(huì)變質(zhì)一樣,,血清在不良儲(chǔ)存環(huán)境下,,隨著時(shí)間的推移,其內(nèi)部成分也會(huì)發(fā)生變化,,導(dǎo)致沉淀的產(chǎn)生,。

4、成分特性

血清本身富含易沉淀物質(zhì),,如纖維蛋白原(凝血關(guān)鍵因子),、脂蛋白及礦物質(zhì)離子,。這些成分的存在,使得血清在特定條件下更容易出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象,。

患于未然

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