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一,、辦法學(xué)的影響
ELISA測定形式包含以下幾種：雙抗體夾心法,、間接法,、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法,、競爭抑制法,，其間競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時差所引起的競爭等要素的影響,，成果重復(fù)性較差,，質(zhì)量較難操控。
二、試劑要素
不同批次的ELISA試劑在制作進(jìn)程中很難保證質(zhì)量一致,，即使是通過批批檢的項目其檢測成果也存在差異,，因而必須挑選和訂購長批號的試劑，并保證保存條件,。嚴(yán)格執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因試劑批號改動而從頭建立質(zhì)控體系及從頭評估試劑的雜亂進(jìn)程,，并且能夠保證成果的穩(wěn)定性；關(guān)于效期短,、使用率低的試劑,，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即可,，防止重復(fù)凍融造成試劑的失效,。
三、樣本要素
標(biāo)本攪擾要素包含內(nèi)源性攪擾要素和外源性攪擾要素,，前者包含類風(fēng)濕因子,、補體、異嗜性抗體,、本身抗體,、溶菌酶等，后者包含標(biāo)本溶血,、標(biāo)本被細(xì)菌污染,、標(biāo)本貯存時刻過長、標(biāo)本凝結(jié)不全,、冷凍標(biāo)本的重復(fù)凍融等,。
四、操作要素
ELISA操作步驟雜亂,，操作不當(dāng)將引起較大的差錯,。加樣、溫育,、洗刷,、顯色、比色,。
五,、灰區(qū)的設(shè)置
通常情況下，ELISA定性試驗以“陽性”和“陰性”來報告成果,，兩者間有一條分界線被稱為“陽性判別值”(cut-off value,，CO值)，這是定性免疫測定成果報告的根據(jù),。
六,、標(biāo)本復(fù)查
ELISA手工檢測進(jìn)程雜亂，影響要素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控,，也或許因孔間差異而造成成果的差異,，因而加大復(fù)查力度是保證成果準(zhǔn)確性的牢靠辦法，比如對HBsAg,、HBeAg,、HCV-Ab、HIV-Ab,、TP-Ab等項目的可疑,、弱陽性標(biāo)本及罕見形式的檢測成果進(jìn)行復(fù)查。
七,、常表明成果的常用辦法
a.定性測定
b.半定量測定 成果一般以滴度表明,。
c.定量測定 即用已知量的規(guī)范品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定，制作規(guī)范曲線,，成果以肯定量或單位表明,。在ELISA定量檢測中每一塊反應(yīng)板都必須制作相應(yīng)的規(guī)范曲線。
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