Cegrogen胎牛血清A0500-3011(低內(nèi)毒素)使用說明
1.初次開封胎牛血清如何化凍,?
胎牛血清常規(guī)儲存溫度為-20℃,,如果更加長期保存可以-80℃保存。解凍的時候不建議直接放在常溫中(25-37℃)解凍,,很容易產(chǎn)生絮狀沉淀,,進(jìn)而有可能影響血清品質(zhì)。建議的方式為先由-20/-80℃轉(zhuǎn)移到4℃解凍,,全部為液體后,,再由4℃轉(zhuǎn)移到室溫。在解凍的過程中,,需要隨時晃動,,使血清內(nèi)成分和溫度混合均勻,有助于減少沉淀的產(chǎn)生,。解凍后,就可以把血清用15 mL或者50 mL無菌離心管分裝凍存啦,,可以根據(jù)自己使用血清的頻率在4℃存放一管已化凍分裝的血清,,方便經(jīng)常配制培養(yǎng)基,在4℃也不可以存放太久,,最好在一個月內(nèi)用完,。解凍后的胎牛血清不可以在37℃或者室溫存放太久,避免血清中重要的細(xì)胞生長因子失活而影響細(xì)胞狀態(tài),。
2.血清的用量
原則上血清添加量不宜太多,,通常添加5%、10%,、20%,。大部分細(xì)胞正常培養(yǎng)使用10%的血清濃度,,部分細(xì)胞原代提取時使用20%血清。具體某一株細(xì)胞適應(yīng)的血清濃度,,需要根據(jù)細(xì)胞特性、實驗?zāi)康拿鳌?/span>
3.胎牛血清什么時候需要熱滅活,?
這就涉及到什么是熱滅活,。熱滅活一般是以56℃,30 min來處理已解凍的血清,,因為此加熱步驟,可以使補(bǔ)體去活化,,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,,增強(qiáng)吞噬作用,,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活,。除了這些特殊實驗要求,常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)需要熱滅活嗎,?通常來說,,熱滅活對大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)都不是必須進(jìn)行的步驟,經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長作用很小,,甚至可能會因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量,,而造成細(xì)胞生長速率的降低,沉淀物增多等不好的影響,。
4.更換血清的正確步驟。
養(yǎng)細(xì)胞的小伙伴經(jīng)常會遇到同一個細(xì)胞需要更換血清的情況,。如果將另一款血清配制的培養(yǎng)基直接用于細(xì)胞培養(yǎng),,可能會發(fā)現(xiàn)以前增殖很快的細(xì)胞突然變慢甚至逐漸脫壁死亡了。這種情況下,,多數(shù)為細(xì)胞被以往的培養(yǎng)環(huán)境馴化,,突然更換一個新的營養(yǎng)環(huán)境,,哪怕是品質(zhì)更好的血清,也可能會出現(xiàn)不適應(yīng)的情況,。通常來說,,更換血清的時候我們會遵循梯度更換保證細(xì)胞可以適應(yīng),。血清開始使用時,如果是重新復(fù)蘇細(xì)胞,,建議用原培養(yǎng)體系進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇,,待細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)后再進(jìn)行測試,。測試時不建議直接100%換成新血清體系進(jìn)行培養(yǎng),應(yīng)按照比例梯度替換,。例如,,先換液按照新舊體系1:3,第二次換液1:1,,第三次換液3:1,,而后替換。針對一些對培養(yǎng)體系較為敏感的細(xì)胞,,需進(jìn)一步細(xì)化替換比例。
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胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)和小牛血清(Calf Serum, CS)是兩種常見的生物試劑,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)和生物學(xué)研究,。它們的主要區(qū)別在于哪些呢,?
1、來源
胎牛血清(FBS):來源于懷孕母牛的胎兒血液,。胎牛血清通常是在牛胎兒被取出后,通過心臟穿刺方式收集血液,,然后分離血清,。
小牛血清(CS):來源于出生后小牛的血液。通常收集3個月以下的小牛血液,,再經(jīng)過離心分離血清,。
2,、成分
胎牛血清(FBS):含有較高濃度的生長因子,、激素和低水平的免疫球蛋白。這些成分對細(xì)胞培養(yǎng)非常有利,,特別是對敏感細(xì)胞系的培養(yǎng),。
小牛血清(CS):含有相對較高的免疫球蛋白和低水平的生長因子,。由于小牛已經(jīng)暴露于外界環(huán)境,其血清中的免疫球蛋白水平較高,,可能會影響某些實驗結(jié)果。
3,、使用領(lǐng)域
胎牛血清(FBS):
廣泛用于各種細(xì)胞培養(yǎng),,包括哺乳動物細(xì)胞系、干細(xì)胞和初級細(xì)胞培養(yǎng),。由于其成分比較均勻和豐富的生長因子,它被認(rèn)為是優(yōu)質(zhì)的血清類型,。
小牛血清(CS):多用于培養(yǎng)耐受性較高的細(xì)胞系或在不需要高水平生長因子的實驗中使用,。也可以用于較低成本的應(yīng)用或?qū)嶒炛小?/span>
4、價格
胎牛血清(FBS):
由于其高質(zhì)量和廣泛的應(yīng)用,,FBS通常比小牛血清貴得多,。
小牛血清(CS):價格相對較低,,適用于預(yù)算有限的研究項目。
5,、優(yōu)缺點
胎牛血清(FBS):
優(yōu)點:成分均勻,,生長因子和激素含量高,適用于大多數(shù)細(xì)胞系,。
缺點:價格昂貴,有倫理爭議,。
小牛血清(CS):
優(yōu)點:價格較低,,可用于耐受性細(xì)胞系的培養(yǎng)。
缺點:免疫球蛋白含量較高,,可能影響某些實驗結(jié)果,。
6、總結(jié)
胎牛血清和小牛血清在成分,、來源和應(yīng)用上有顯著不同。胎牛血清更適合需要高質(zhì)量培養(yǎng)條件的實驗,,而小牛血清則適用于較為耐受的細(xì)胞系和成本敏感的實驗,。選擇哪種血清需要根據(jù)具體的實驗需求、預(yù)算和細(xì)胞類型來決定,。
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