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【特別推薦】rLaminin-521 培養(yǎng),，幫助實(shí)現(xiàn)人多能干細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)
康寧重組人層粘連蛋白rLaminin-521是由α5,、β2和γ1鏈組成的異源三聚體，由哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)表達(dá),。rLaminin-521可配合無血清,、無動(dòng)物源培養(yǎng)基，支持人多能干細(xì)胞（hPSC）的長(zhǎng)期自我更新,，包括胚胎干細(xì)胞（hESC）和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）,。rLaminin-521培養(yǎng)hPSC 無需添加ROCK 抑制劑，即可進(jìn)行PSC的單細(xì)胞擴(kuò)增 ，從而降低了hPSC培養(yǎng)的難度,，實(shí)現(xiàn)有效擴(kuò)大培養(yǎng),。
主要特點(diǎn)：
重組蛋白，成分明確,，安全
包被過程簡(jiǎn)單
提供基于100μg/管的多種包裝規(guī)格,，方便操作
與多種hPSC培養(yǎng)基和消化試劑兼容，適用范圍廣泛
支持未分化的hPSC擴(kuò)增
可用于無異源,，化學(xué)限定培養(yǎng)條件,，方便進(jìn)行臨床轉(zhuǎn)化
人多能干細(xì)胞（hPSC）培養(yǎng)
hPSC，包括人類胚胎干細(xì)胞和人類誘導(dǎo)多能干細(xì)胞,，具有無限的自我更新能力和分化潛能,。理論上這些細(xì)胞可以分化為人體各種細(xì)胞類型，從而成為再生醫(yī)學(xué)的細(xì)胞和組織的來源,。hPSC衍生的細(xì)胞也可以用作藥物篩選的模型,。常規(guī)的無飼養(yǎng)層hPSC培養(yǎng)使用團(tuán)塊方式進(jìn)行傳代，因?yàn)閱渭?xì)胞培養(yǎng)需要在培養(yǎng)基中額外添加ROCK抑制劑,。使用這些化學(xué)物質(zhì)的長(zhǎng)期影響尚不清楚,。團(tuán)塊傳代方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力，不便于擴(kuò)大培養(yǎng)規(guī)模,。
形態(tài)
在rLaminin-521（人）上的無異源培養(yǎng)基中培養(yǎng)的hESC表現(xiàn)出具有高核質(zhì)比的特征集落形態(tài),。
標(biāo)志物表達(dá)
通過免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)未分化hPSC的標(biāo)志物，成像分析顯示了Oct-4在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)（綠色）,。同時(shí)使用DAPI對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行了染色（藍(lán)色）,。
三譜系分化
在無異源培養(yǎng)基中培養(yǎng)10代，hESC分化為擬胚體（EB）并通過定量RT PCR檢測(cè)EB中的譜系特異性標(biāo)志物來評(píng)估hESC的多能性,。EBs表達(dá)3個(gè)譜系的標(biāo)志物,，表明細(xì)胞在多次傳代后保持多能性。
核型分析
在無異源培養(yǎng)基中rLaminin-521上培養(yǎng)的hESC保持正常的核型,。在細(xì)胞擴(kuò)增過程中進(jìn)行了多次核型分析,。
在rLamin-521（人）上評(píng)估的hPSC細(xì)胞系、培養(yǎng)基和解離試劑：
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