手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
Illumina FC-121-3001--TruSeq DNA PCR-Free LT Library
免 PCR 文庫構(gòu)建技術(shù)：傳統(tǒng)的文庫構(gòu)建方法常依賴 PCR 擴增步驟,，然而這可能引入擴增偏好性，導(dǎo)致某些 DNA 片段過度或不足擴增,，影響測序結(jié)果的準確性和全面性 ,。TruSeq DNA PCR-Free LT Library 開創(chuàng)性地去除了 PCR 過程，有效規(guī)避了 PCR 帶來的偏差,，確保文庫中各類 DNA 片段的比例更接近樣本原始狀態(tài),。這意味著科研人員能夠獲得更均一、更能真實反映樣本基因組全貌的文庫,，為后續(xù)精準檢測各類遺傳變異（如單核苷酸多態(tài)性 SNP,、插入缺失 InDel 等）奠定了堅實基礎(chǔ)。
靈活的讀長適配能力：不同的研究項目對測序讀長的需求各異,。該試劑盒具備出色的靈活性，能夠適配多種讀長設(shè)置,，可滿足從較短讀長用于快速篩查,，到較長讀長用于解析復(fù)雜基因組區(qū)域的多樣化需求 。例如，在對微生物基因組進行測序時,，較短讀長即可滿足快速鑒定物種的需求,；而在研究動植物復(fù)雜基因組的結(jié)構(gòu)變異時，較長讀長能更好地跨越重復(fù)序列等復(fù)雜區(qū)域,，準確識別變異類型,，為深入探究遺傳機制提供有力支持。
高效的片段化與修復(fù)技術(shù)：試劑盒在 DNA 片段化過程中,，采用了優(yōu)化的物理或酶切方法,，能夠?qū)⒒蚪M DNA 精準地切割成適宜長度的片段 。這些片段隨后經(jīng)過末端修復(fù),、加 A 尾以及連接測序接頭等一系列精細操作,，確保每個 DNA 片段都能被有效捕獲和測序。這一高效的片段化與修復(fù)技術(shù),，不僅提高了文庫構(gòu)建的成功率,，還保證了文庫中 DNA 片段的質(zhì)量和完整性，為后續(xù)測序反應(yīng)的順利進行提供了保障,。
出色的覆蓋度：在對基因組中傳統(tǒng)上難以測序的區(qū)域，如高 GC 含量區(qū)域,、啟動子區(qū)域以及重復(fù)序列區(qū)域的覆蓋上,，TruSeq DNA PCR-Free LT Library 表現(xiàn) 。高 GC 含量區(qū)域由于其堿基組成特點,，在測序過程中易出現(xiàn)信號弱,、難以準確識別堿基的問題；啟動子區(qū)域的結(jié)構(gòu)和功能特殊性也增加了測序難度,；而重復(fù)序列則可能導(dǎo)致測序錯誤或丟失信息,。但該試劑盒憑借的技術(shù)設(shè)計，能夠有效克服這些挑戰(zhàn),，為科研人員提供更全面,、準確的基因組覆蓋信息，助力挖掘這些關(guān)鍵區(qū)域的遺傳信息,，例如在研究基因調(diào)控機制時,，準確解析啟動子區(qū)域的序列變異和甲基化狀態(tài)。
數(shù)據(jù)質(zhì)量高：得益于免 PCR 技術(shù)和優(yōu)化的文庫構(gòu)建流程,，該試劑盒生成的測序數(shù)據(jù)質(zhì)量 ,。數(shù)據(jù)質(zhì)量分數(shù)（如 Q30 分數(shù)）表現(xiàn)優(yōu)異，意味著在測序數(shù)據(jù)中,，堿基識別準確率達到 99.9% 以上的比例較高,。高質(zhì)量的數(shù)據(jù)減少了后續(xù)數(shù)據(jù)分析中的錯誤校正工作量,，提高了研究結(jié)果的可靠性。在疾病基因檢測,、腫瘤基因組分析等對數(shù)據(jù)準確性要求極為苛刻的領(lǐng)域,，該試劑盒的數(shù)據(jù)質(zhì)量優(yōu)勢能夠確保準確檢測到低頻變異，為疾病的精準診斷和個性化治療提供關(guān)鍵依據(jù),。
簡化實驗流程：試劑盒采用了一體化的設(shè)計理念,，所有試劑和耗材均精心配置，為全基因組測序應(yīng)用提供了簡便,、全面的文庫制備方案 ,。整個實驗流程摒棄了繁瑣的凝膠電泳步驟，減少了實驗操作步驟和時間,，同時降低了人為操作誤差的引入風(fēng)險,。例如，在樣本處理過程中,，磁珠法的應(yīng)用使得 DNA 片段的純化和篩選更加高效,、便捷，科研人員無需復(fù)雜的技術(shù)和大量的時間投入,，即可輕松完成文庫構(gòu)建,，大大提高了實驗效率，使研究工作能夠更快速地推進,。
基礎(chǔ)基因組學(xué)研究：在探索各類生物的基因組結(jié)構(gòu)與功能方面，TruSeq DNA PCR-Free LT Library 發(fā)揮著重要作用 ,。對于小型基因組,，如細菌基因組，該試劑盒能夠快速,、準確地完成測序文庫構(gòu)建,，助力科研人員深入了解細菌的遺傳特性、進化關(guān)系以及與環(huán)境的相互作用機制,。在人類基因組研究中,，它可用于全基因組重測序，精準檢測個體間的遺傳變異,，為研究人類遺傳多樣性,、疾病遺傳易感性等提供豐富的數(shù)據(jù)資源，有助于揭示復(fù)雜疾病的發(fā)病機制,，為個性化醫(yī)療和遺傳咨詢提供理論基礎(chǔ),。
腫瘤基因組學(xué)研究：在腫瘤研究領(lǐng)域，準確解析腫瘤基因組的變異對于腫瘤的診斷,、治療和預(yù)后評估至關(guān)重要 ,。該試劑盒能夠高效構(gòu)建腫瘤樣本的 DNA 文庫,，通過對腫瘤基因組的深度測序，科研人員可以全面檢測腫瘤相關(guān)基因的突變,、拷貝數(shù)變異等遺傳改變。例如,，在尋找腫瘤驅(qū)動基因時,，高覆蓋度和高質(zhì)量的數(shù)據(jù)能夠幫助識別出潛在的關(guān)鍵變異，為開發(fā)針對性的靶向治療藥物提供靶點,；在腫瘤分子分型中,，精準的基因組信息有助于更準確地對腫瘤進行分類，指導(dǎo)臨床醫(yī)生制定個性化的治療方案,，提高腫瘤治療效果,。
罕見病研究：許多罕見病由基因變異引起，且發(fā)病率低,、病例分散,，樣本獲取難度大 。TruSeq DNA PCR-Free LT Library 的低通量特性和高質(zhì)量數(shù)據(jù)產(chǎn)出,，使其成為罕見病研究的有力工具,。科研人員可以利用該試劑盒對少量的罕見病患者樣本進行深度測序,，精準檢測出致病基因的變異,，為罕見病的基因診斷、遺傳咨詢以及開發(fā)潛在的治療方法提供關(guān)鍵線索,，有助于改善罕見病患者的診療現(xiàn)狀,。
樣本要求：該試劑盒適用于多種類型的 DNA 樣本,，如基因組 DNA,、FFPE 樣本來源的 DNA 等 。但需注意,，樣本應(yīng)具備較高的質(zhì)量和完整性,，建議使用高質(zhì)量的純化 DNA，起始量一般在 0.1 - 1 μg 之間,，具體用量可根據(jù)樣本類型和實驗要求進行適當(dāng)調(diào)整,。在樣本處理前，需對樣本進行嚴格的質(zhì)量檢測,，確保其濃度,、純度以及完整性符合實驗要求，以保證文庫構(gòu)建的成功率和質(zhì)量,。
實驗操作流程：使用 TruSeq DNA PCR-Free LT Library 構(gòu)建文庫的操作流程相對簡便 ,。首先,，對 DNA 樣本進行片段化處理，可根據(jù)實驗需求選擇合適的片段化方法和條件,，以獲得理想長度的 DNA 片段,。隨后進行末端修復(fù)、加 A 尾以及連接測序接頭等步驟,，這些操作均在試劑盒提供的專用試劑和優(yōu)化的反應(yīng)條件下進行,。最后，通過磁珠法對文庫進行純化和篩選,，去除雜質(zhì)和未連接的接頭,，得到高質(zhì)量的文庫產(chǎn)物。整個過程需嚴格按照試劑盒說明書的操作步驟進行,，注意反應(yīng)條件的控制和試劑的使用量,，以確保實驗結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性。
系統(tǒng)兼容性：該試劑盒與多種 Illumina 測序儀器高度兼容,，包括 NextSeq 1000,、NextSeq 2000、HiSeq 2500,、NovaSeq 6000 等 ,。科研人員可根據(jù)自身實驗需求和實驗室設(shè)備條件,，靈活選擇合適的測序儀器進行文庫測序,。在測序前，需根據(jù)所選儀器的特點和要求,，對測序參數(shù)進行合理設(shè)置,，以充分發(fā)揮試劑盒和測序儀器的性能優(yōu)勢，獲得高質(zhì)量的測序數(shù)據(jù),。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品,，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品,。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”,。違反上述聲明者,，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品,，目的在于傳遞更多信息,，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé),，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體,、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責(zé)任,。
- 如涉及作品內(nèi)容,、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心