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通用型 Western Blot 抗體稀釋液

來源:上海易匯生物科技有限公司   2025年05月28日 14:25  
Western Blot 實驗作為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域的經(jīng)典技術(shù),其流程涵蓋蛋白樣品制備,、電泳分離,、轉(zhuǎn)印、封閉,、抗體孵育及檢測等多個關(guān)鍵環(huán)節(jié),。在這些步驟中,抗體的合理使用是獲得可靠結(jié)果的核心,,而抗體稀釋液作為承載抗體的 “載體”,,其性能直接影響抗體活性和實驗數(shù)據(jù)質(zhì)量。通用型 Western Blot 抗體稀釋液憑借其配方和性能,,為科研人員提供了簡化操作,、提升實驗效率的理想解決方案。
Western Blot 實驗的具體流程如下:首先是蛋白樣品制備,,從細胞或組織中提取總蛋白,并通過 BCA 法或 Bradford 法進行蛋白定量,;隨后將蛋白樣品進行 SDS-PAGE 電泳分離,,使不同分子量的蛋白在凝膠中按大小排列;完成電泳后,,通過濕轉(zhuǎn)或半干轉(zhuǎn)法將凝膠上的蛋白轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素(NC)膜或聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上,;接著使用封閉液對膜進行處理,以減少非特異性結(jié)合,;在抗體孵育環(huán)節(jié),,需將一抗和二抗用合適的稀釋液稀釋后與膜進行孵育;最后通過化學(xué)發(fā)光或顯色反應(yīng)對目標(biāo)蛋白進行檢測和分析,。而在抗體孵育這一關(guān)鍵步驟中,,通用型 Western Blot 抗體稀釋液的作用尤為重要。
一,、精準(zhǔn)配方,,保障抗體活性
通用型 Western Blot 抗體稀釋液采用優(yōu)化的緩沖體系,,以 Tris-HCl 或 PBS 為基礎(chǔ),精準(zhǔn)調(diào)控 pH 值至 7.2 - 7.4 的穩(wěn)定區(qū)間,,模擬細胞內(nèi)環(huán)境,,有效維持抗體的空間結(jié)構(gòu)與生物活性。配方中添加的牛血清白蛋白(BSA)和非離子型表面活性劑(如 Tween - 20),,通過雙重保護機制減少抗體的非特異性吸附和聚集:BSA 作為封閉劑,,能飽和膜上的空白位點,防止抗體與膜的直接結(jié)合,;Tween - 20 則降低液體表面張力,,避免抗體分子間相互作用導(dǎo)致的沉淀,確??贵w在稀釋后仍能保持高效的抗原識別能力,。
二、廣泛兼容,,適配多元實驗需求
該稀釋液打破傳統(tǒng)抗體稀釋液的局限性,,實現(xiàn)對多種類型抗體的廣泛兼容。無論是單克隆抗體,、多克隆抗體,,還是經(jīng)過熒光標(biāo)記、酶標(biāo)記的功能性抗體,,均能在其中保持穩(wěn)定活性,。同時,兼容硝酸纖維素(NC)膜,、聚偏二氟乙烯(PVDF)膜等不同材質(zhì)的轉(zhuǎn)印膜,,科研人員無需針對不同實驗體系更換稀釋液,顯著簡化操作流程,。例如,,在檢測磷酸化蛋白的實驗中,標(biāo)記磷酸化特異性抗體經(jīng)該稀釋液處理后,,仍能精準(zhǔn)識別目標(biāo)抗原,,確保實驗結(jié)果的特異性。
三,、降低背景,,提升結(jié)果清晰度
非特異性條帶和高背景信號是 Western Blot 實驗常見的難題。通用型抗體稀釋液通過優(yōu)化成分比例,,有效抑制非特異性結(jié)合,,降低背景干擾。實驗數(shù)據(jù)顯示,使用該稀釋液后,,背景信號強度較常規(guī)稀釋方法降低約 30% - 50%,,使目標(biāo)條帶更加清晰銳利,灰度值對比度顯著提升,。這一特性尤其適用于微量蛋白檢測或低豐度蛋白分析,,幫助科研人員更準(zhǔn)確地獲取實驗數(shù)據(jù),減少結(jié)果誤判風(fēng)險,。
四,、便捷易用,加速實驗進程
從實驗操作層面,,通用型 Western Blot 抗體稀釋液顯著提升了工作效率,。其即用型設(shè)計避免了科研人員自行配制稀釋液時的繁瑣計算和稱量步驟,開封后可直接使用,,節(jié)省時間成本,。同時,穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì)使其在 4℃環(huán)境下可長期保存,,減少浪費,。此外,配套的標(biāo)準(zhǔn)化使用指南,,為不同實驗場景提供推薦稀釋比例參考,,即使是新手科研人員也能快速掌握稀釋方法,縮短實驗摸索周期,。
通用型 Western Blot 抗體稀釋液憑借精準(zhǔn)的配方設(shè)計,、廣泛的兼容性、出色的背景抑制能力和便捷的使用體驗,,成為 Western Blot 實驗中的可靠助手,。無論是基礎(chǔ)科研中的蛋白表達分析,還是生物醫(yī)藥領(lǐng)域的藥物研發(fā),,它都能為科研人員提供穩(wěn)定,、高效的實驗支持,助力科研成果的高質(zhì)量產(chǎn)出,。



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