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表1. 普通款和熱敏款蛋白酶K特點比較
在分子生物學研究領域,，蛋白酶K憑借的蛋白降解性能，始終是核酸提取與樣本裂解等核心實驗步驟的關鍵工具,。其通過高效裂解細胞并降解蛋白質,，為核酸的快速釋放與純化奠定基礎。然而,，傳統(tǒng)蛋白酶K在實際應用中暴露出顯著的技術瓶頸：滅活過程復雜且風險高,。無論是采用苯酚/氯仿抽提的多步驟純化流程，還是高溫處理引發(fā)的樣本降解風險,，都可能導致實驗周期延長,、結果重現(xiàn)性降低，進而影響后續(xù)數(shù)據(jù)分析的準確性與可靠性,。
為突破這一技術壁壘,，翌圣生物成功研發(fā)并推出熱敏蛋白酶K（Thermolabile Proteinase K,，Cat#14809）產品,，該產品只需在55℃條件下加熱10分鐘即可實現(xiàn)滅活，無需額外的核酸純化步驟,，有效避免了酶殘留對下游實驗的干擾,。例如：Thermolabile Proteinase K應用于直擴PCR、DNA&RNA建庫等實驗中,，可省略多次純化流程,，有效降低核酸損耗，提升樣本利用率；應用于甲基化DNA分析過程中,，通過精準控制酶解條件,，避免因過度消化導致的甲基化位點破壞，確保實驗結果的準確性與可靠性,。
產品簡介
Thermolabile Proteinase K
Thermolabile Proteinase K（TLPK）是通過基因工程技術改造獲得的重組絲氨酸蛋白酶,，保持了與野生型版本相似的活性和特異性，具備廣泛的切割活性,，能夠高效水解多種類型的肽鍵,。在理化性質方面，TLPK展現(xiàn)出良好的緩沖液兼容性,，可在多種緩沖體系中保持活性,。其最適反應條件為pH 7.0-9.5、溫度20-40℃,，在此區(qū)間內能夠發(fā)揮最佳效能,。該酶具備優(yōu)異的熱敏感性，只需在55℃條件下溫育10分鐘即可全熱失活,。
消化能力強,、熱敏感
分別使用翌圣及進口品牌Supplier A的TLPK處理限制性內切酶PvuII后,，使用處理后的PvuII對λDNA進行處理，結果顯示翌圣TLPK可有效抑制PvuII活性,，且55℃條件下溫育10分鐘可使TLPK全熱失活,，對后續(xù)反應體系中的添加的蛋白無影響。
圖1.消化能力與熱敏感性能驗證
無核酸外切酶、切口酶,、RNase殘留
將0.12 U TLPK分別與核酸底物孵育,，并通過瓊脂糖凝膠電泳分析譜帶變化。實驗結果表明,，翌圣的3個批次TLPK均未檢測到核酸外切酶,、切口酶或RNase殘留,，為實驗結果的準確性和可靠性提供了有力保障。
圖2.核酸外切酶、切口酶,、RNase殘留結果驗證
為滿足多樣化實驗需求,，翌圣生物精心推出蛋白酶K系列產品，涵蓋普通型與熱敏型兩大品類,。普通型蛋白酶K適用于常規(guī)蛋白降解場景,，而熱敏型產品則憑借快速熱滅活特性，為下游分子生物學實驗提供高效解決方案,，為科研工作者提供精準適配的實驗工具選擇,。
產品名稱 | 產品編號 | 規(guī)格 | 產品特點 |
Proteinase K蛋白酶K | 10401ES | 100mg/1g/5 g/100g | 粉末狀，可以根據(jù)實驗要求,，配制成目標濃度 |
Proteinase K Solution蛋白酶K溶液(20 mg/mL) | 10412ES | 1 mL/10 mL/25 mL/500 mL | 液體,，免配制，使用起來更方便 |
Proteinase K Solution蛋白酶K溶液（低殘留） | 10410ES | 1 mL/5 mL/100 mL/1000 mL | 極低的背景菌殘留,，更適合病原微生物核酸提取 |
Thermolabile Proteinase K | 14809ES | 30 U/120 U | 熱敏款,，適用于反應后需在溫和條件下去除蛋白酶K活性的場景或熱敏感樣本的處理 |
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