菌種保藏（culture preservation，culture collection）是保持微生物菌株活力和遺傳性狀的關(guān)鍵技術(shù),。在分子生物學(xué)研究中,，經(jīng)過基因編輯或改造的菌種通常非常珍貴且微量，因此需要進(jìn)行妥善的保藏,。以下是具體的操作步驟：

菌種保藏：

1. 將待保存的菌液與配好的甘油混合液按1:1比例混合,，最終達(dá)到20%甘油濃度。配置40%（v/v）甘油滅菌水混合液,。

2. 取2ml離心管或保菌管,，加入500微升40%甘油-水混合液。

3. 用移液槍吸取500微升菌液,，將槍頭深入液面以下緩緩加入,。

4. 將離心管或保菌管放入-80℃冰箱保存。

5. 在保菌管上標(biāo)明日期,、菌種,、抗性等詳細(xì)信息，以便日后識(shí)別,。

菌液復(fù)蘇：

1. 復(fù)蘇保存的菌液可以進(jìn)行后續(xù)操作,。主要步驟如下：

2. 取含有抗性的LB培養(yǎng)基，每個(gè)培養(yǎng)管裝入約八毫升,。所有操作均在無菌操作臺(tái)進(jìn)行,，以防污染,。

3. 向每管加入100微升菌液，37℃,、180rpm搖12小時(shí),。

4. 氨芐抗性配置：1g氨芐青霉素鈉溶解于10ml滅菌水中，過濾后-20℃保存,。

5. LB培養(yǎng)基配置：10g氯化鈉,、10g胰蛋白胨、5g酵母提取物溶于一升體系中,，分裝到250ml錐形瓶,，每瓶100ml。Amp抗性：100ml培養(yǎng)基加入100微升氨芐抗性,。 

通過這些簡(jiǎn)單的步驟,，你可以有效地保藏和復(fù)蘇珍貴的菌種，為后續(xù)的分子生物學(xué)研究提供堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ),。