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光學(xué)性能：聚合物蓋玻片底部或玻璃底部，均具有高光學(xué)質(zhì)量,。聚合物蓋玻片底部的折射率（nd 589nm）為 1.52,，阿貝數(shù) 56，厚度 180μm（#1.5）,，在高分辨率顯微鏡下能提供清晰圖像,，且自發(fā)熒光低，對細(xì)胞成像干擾極小 ,。玻璃底部（如用于特定應(yīng)用的 1.5h 玻璃蓋玻片,，厚度 170μm±5μm）同樣具備出色光學(xué)性能，適用于全內(nèi)反射熒光（TIRF）,、單分子及超分辨率顯微鏡等成像技術(shù) ,。
理想細(xì)胞生長環(huán)境：經(jīng) ibiTreat 處理的表面為細(xì)胞提供了良好的粘附與生長條件，多數(shù)貼壁細(xì)胞無需額外包被即可在此表面良好生長 。對于有特殊需求的細(xì)胞培養(yǎng),，還可進(jìn)行細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）蛋白包被,。而未處理的疏水表面，可用于需特定包被的貼壁細(xì)胞培養(yǎng),；bioinert 表面則阻止細(xì)胞粘附,，適合懸浮細(xì)胞、細(xì)胞聚集體,、球體及類器官培養(yǎng) ,。
減少蒸發(fā)設(shè)計：培養(yǎng)皿蓋子設(shè)有鎖扣位置，能有效減少液體蒸發(fā),，為在非加濕環(huán)境下的長期細(xì)胞培養(yǎng)與研究提供穩(wěn)定條件,。同時，培養(yǎng)皿采用透氣塑料材質(zhì),，確保細(xì)胞培養(yǎng)過程中二氧化碳和氧氣等氣體的正常交換 ,。
操作便捷與通用性：標(biāo)準(zhǔn) 35mm 直徑規(guī)格，方便操作與適配各類實驗室設(shè)備 ,。高壁設(shè)計不僅增加了培養(yǎng)容積（2ml）,，還便于日常使用時的拿取與操作 。此外,，該培養(yǎng)皿與所有染色和固定溶劑兼容,，可滿足多種細(xì)胞實驗需求。
細(xì)胞培養(yǎng)與成像：適用于各類細(xì)胞系的培養(yǎng),，以及原代細(xì)胞培養(yǎng) ,。結(jié)合其高分辨率成像能力，可用于免疫熒光染色后細(xì)胞的寬場和共聚焦熒光顯微鏡觀察,，也適合活細(xì)胞的長時間成像研究,，實時監(jiān)測細(xì)胞生長、增殖,、分化等動態(tài)過程 ,。
轉(zhuǎn)染實驗：為細(xì)胞轉(zhuǎn)染提供穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境，可通過后續(xù)成像或分析技術(shù),，評估轉(zhuǎn)染效率與轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的功能變化 ,。
細(xì)胞定位與計數(shù)：帶有 500µm 網(wǎng)格（如 µ-Dish 35 mm, high grid - 500）的版本，便于對細(xì)胞或細(xì)胞簇進(jìn)行定位,，在計算轉(zhuǎn)染效率,、統(tǒng)計特定區(qū)域內(nèi)細(xì)胞事件數(shù)量等實驗中發(fā)揮重要作用 。
特殊顯微鏡應(yīng)用：使用特殊 DIC 蓋子,，可用于微分干涉相差（DIC）顯微鏡觀察 ,。玻璃底部的培養(yǎng)皿版本,，特別適用于 TIRF、單分子應(yīng)用以及超分辨率顯微鏡（如 STED,、SIM,、(F) PALM、(D) STORM）和熒光相關(guān)光譜（FCS）等顯微鏡技術(shù) ,。
培養(yǎng)皿檢查：收到培養(yǎng)皿后,，檢查包裝是否完好，單個培養(yǎng)皿有無破損,、污染跡象 ,。確認(rèn)產(chǎn)品規(guī)格、表面處理類型（如 ibiTreat,、uncoated,、bioinert 等）是否與實驗需求相符 。
試劑與耗材準(zhǔn)備：
細(xì)胞培養(yǎng)基：根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)胞類型,，選擇合適的培養(yǎng)基,，并添加相應(yīng)的血清、抗生素,、生長因子等成分 ,。培養(yǎng)基需提前過濾除菌，確保無菌狀態(tài) ,。
細(xì)胞：復(fù)蘇凍存細(xì)胞或從培養(yǎng)瓶中消化獲取對數(shù)生長期細(xì)胞,，制成細(xì)胞懸液 ,。通過細(xì)胞計數(shù)確定合適的接種密度,。
其他耗材：準(zhǔn)備無菌移液器吸頭、移液管,、離心管,、鑷子等耗材，所有耗材需保證無菌 ,。若需對培養(yǎng)皿進(jìn)行額外包被（如使用 ECM 蛋白包被未處理表面的培養(yǎng)皿）,，準(zhǔn)備相應(yīng)包被試劑 。
ibiTreat 表面培養(yǎng)皿：對于需在 ibiTreat 表面培養(yǎng)的細(xì)胞,，直接將適量細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)皿中 ,。例如，若細(xì)胞接種密度為每平方厘米 1×10?個細(xì)胞,，對于生長面積 3.5cm2 的 µ-Dish 35 mm 高壁培養(yǎng)皿,，可加入含有 3.5×10?個細(xì)胞的細(xì)胞懸液 。輕輕晃動培養(yǎng)皿,，使細(xì)胞均勻分布,，避免產(chǎn)生氣泡，然后將培養(yǎng)皿放入 37℃、5% CO?的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育 ,。
未處理表面培養(yǎng)皿（若需包被）：若使用未處理的疏水表面培養(yǎng)皿且需進(jìn)行 ECM 蛋白包被,，先將包被試劑（如多聚賴氨酸、纖連蛋白等）稀釋至合適濃度 ,。取適量稀釋后的包被試劑加入培養(yǎng)皿,，確保液體均勻覆蓋底部表面，室溫孵育 1-2 小時或按照試劑說明書要求的時間孵育 ,。孵育結(jié)束后,，用無菌 PBS 沖洗培養(yǎng)皿 2-3 次，去除未結(jié)合的包被試劑,，然后進(jìn)行細(xì)胞接種,，接種方法同 ibiTreat 表面培養(yǎng)皿 。
bioinert 表面培養(yǎng)皿：對于培養(yǎng)懸浮細(xì)胞,、球體或類器官的 bioinert 表面培養(yǎng)皿,，直接將細(xì)胞懸液或含有細(xì)胞聚集體的溶液加入培養(yǎng)皿 。同樣輕輕晃動使分布均勻后放入培養(yǎng)箱 ,。由于細(xì)胞不會粘附在 bioinert 表面,，在操作和觀察過程中需注意避免溶液過度晃動導(dǎo)致細(xì)胞聚集體位置改變 。
日常培養(yǎng)：將接種細(xì)胞后的培養(yǎng)皿放入細(xì)胞培養(yǎng)箱,，定期觀察細(xì)胞生長狀態(tài) ,。根據(jù)細(xì)胞生長速度，每隔 1-2 天更換一次培養(yǎng)基,，去除細(xì)胞代謝產(chǎn)物,，補充營養(yǎng)物質(zhì) 。觀察細(xì)胞時,，可在倒置顯微鏡下直接觀察培養(yǎng)皿中的細(xì)胞,，注意細(xì)胞形態(tài)、密度變化等 ,。
顯微鏡成像：
熒光顯微鏡成像：若進(jìn)行熒光染色實驗,，當(dāng)細(xì)胞生長至合適階段，按照免疫熒光染色流程進(jìn)行操作 ,。包括固定細(xì)胞（如使用 4% 多聚甲醛固定 15-20 分鐘）,、通透處理（0.1% Triton X-100 處理 10 分鐘）、封閉（5% BSA 封閉 30 分鐘）,、一抗和二抗孵育等步驟 ,。染色完成后，用 PBS 清洗干凈,，直接在熒光顯微鏡下觀察 ,。由于 ibidi µ-Dish 35 mm 高壁培養(yǎng)皿底部的低自發(fā)熒光特性,，可獲得清晰的熒光圖像 。
其他顯微鏡成像：如需進(jìn)行 TIRF,、DIC 等特殊顯微鏡成像,，根據(jù)相應(yīng)顯微鏡的要求，將培養(yǎng)皿放置在配套的載物臺上 ,。對于需使用特殊蓋子（如 DIC 蓋子）的實驗,，在成像前更換為相應(yīng)蓋子 。調(diào)整顯微鏡參數(shù),，獲取高質(zhì)量的細(xì)胞圖像 ,。
廢棄物處理：實驗結(jié)束后，含有細(xì)胞的培養(yǎng)基,、一次性耗材等廢棄物,，按照生物安全廢棄物處理規(guī)范進(jìn)行處理 。對于可能含原體或危險生物材料的廢棄物,，需先進(jìn)行高壓滅菌或化學(xué)消毒處理,，然后丟棄 。
培養(yǎng)皿處理：若培養(yǎng)皿為一次性使用產(chǎn)品,，直接丟棄至相應(yīng)廢棄物容器 ,。若培養(yǎng)皿可重復(fù)使用（但需確認(rèn)產(chǎn)品說明是否支持），先將培養(yǎng)皿中的液體倒出,，用清水沖洗干凈,，然后浸泡在合適的清潔劑溶液中，超聲清洗去除殘留細(xì)胞和雜質(zhì) ,。清洗后用蒸餾水沖洗多次,，烘干備用 。但需注意,，重復(fù)使用可能會影響培養(yǎng)皿的性能,，尤其是底部的光學(xué)性能和表面特性，對于對實驗精度要求的實驗,，建議使用新的培養(yǎng)皿 。
培養(yǎng)皿儲存：未使用的培養(yǎng)皿應(yīng)儲存在干燥,、清潔的環(huán)境中,，避免陽光直射和高溫 。對于已開封但未使用完的培養(yǎng)皿,，需密封保存,，防止灰塵和微生物污染 。
操作過程無菌要求：在整個細(xì)胞培養(yǎng)和實驗操作過程中,，嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范 ,。在超凈工作臺中進(jìn)行操作,，使用前用 75% 酒精擦拭臺面和雙手，對使用的耗材,、試劑等進(jìn)行表面消毒 ,。避免交叉污染，不同細(xì)胞系或?qū)嶒灥牟僮鲬?yīng)分開進(jìn)行,，使用不同的移液器和耗材 ,。
蓋子鎖扣使用：當(dāng)需要減少液體蒸發(fā)時（如在非加濕的顯微鏡載物臺上進(jìn)行長時間成像實驗），使用蓋子的鎖扣功能 ,。但在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)正常培養(yǎng)時,，無需一直使用鎖扣，以免影響氣體交換 ,。
避免底部刮擦：在操作培養(yǎng)皿過程中,，注意避免尖銳物品刮擦底部，尤其是用于高分辨率成像的聚合物蓋玻片底部或玻璃底部,，刮擦可能會導(dǎo)致底部光學(xué)性能下降,，影響成像質(zhì)量 。拿取培養(yǎng)皿時,，應(yīng)手持培養(yǎng)皿側(cè)壁,，避免接觸底部 。
特殊表面使用注意：對于 bioinert 表面的培養(yǎng)皿,，由于其阻止細(xì)胞粘附的特性,，在加入細(xì)胞懸液后，盡量減少培養(yǎng)皿的移動和晃動,，以免細(xì)胞聚集體分散 ,。同時，該表面不能進(jìn)行額外的蛋白包被等處理,，需嚴(yán)格按照其適用范圍使用 ,。
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