樣品預(yù)處理

新鮮植物組織（如葉片、根,、莖等）切成小塊,，樣品的直徑要小于分散刀頭直徑的1/2。

若樣品較硬（如種子,、木質(zhì)部）,，可先進(jìn)行預(yù)破碎（可選擇WIGGENS的WMA系列組織到隨機(jī)）再均質(zhì)。

樣品與緩沖液比例建議 1:5~1:10（w/v）（如 1 g組織 + 5~10 mL 緩沖液）,。

均質(zhì)操作

根據(jù)樣品量選擇合適的均質(zhì)機(jī)和分散刀頭小量樣品,。（WIGGENS的D-130型均質(zhì)機(jī)可以在1.5ml離心管中處理樣品，處理量0.2-1ml,。 D500系列均質(zhì)機(jī)處理量0.5L-8L,。）

低速啟動(dòng)（5000~10000 rpm）初步破碎組織，避免飛濺,。

高速剪切（15000~25000 rpm）處理 10~60 秒（可間歇操作，如 10 秒開(kāi) / 10 秒停,，防止過(guò)熱）,。

推薦使用帶有擾流板的均質(zhì)杯，擾流板可以減少均質(zhì)時(shí)間提高均質(zhì)效率,。

清洗設(shè)備

均質(zhì)完畢后,，需要對(duì)分散刀頭和分散杯進(jìn)行清洗，防止殘留物堵塞或腐蝕,。推薦使用WIGGENS超聲波清洗機(jī),。

根據(jù)樣品特性進(jìn)行均質(zhì)操作

柔軟組織（如葉片）：較低轉(zhuǎn)速（10000~15000 rpm）即可。

纖維/堅(jiān)硬組織（如根,、種子）：需更高轉(zhuǎn)速（20000~30000 rpm）或延長(zhǎng)處理時(shí)間,。

多酚/多糖含量高的植物（如茶葉,、果實(shí)）：易氧化或形成粘稠勻漿，可添加 PVP（聚乙烯吡咯烷酮） 或 β-巰基乙醇 減少干擾,。

溫度控制

冰浴操作,，避免局部過(guò)熱導(dǎo)致蛋白變性。如樣品量較大,，可分批次處理,。

安全防護(hù)

戴 護(hù)目鏡/面罩，防止樣品飛濺,。

確保分散頭浸入液體,，避免空轉(zhuǎn)損壞設(shè)備。

樣品預(yù)處理：使用蒸餾水或緩沖液清潔植物組織（如葉片,、根等），切成小塊（約0.5 cm2）,，若組織較硬,，可先液氮冷凍后研磨成粉末，再轉(zhuǎn)入勻漿器,。

將組織塊或粉末與適量裂解緩沖液（如PBS,、Tris-HCl等，含蛋白酶抑制劑）加入勻漿器內(nèi)管中,，液體體積不超過(guò)1/3容量,。

可根據(jù)需要選擇手動(dòng)勻漿或電動(dòng)勻漿。手動(dòng)勻漿,，手握研杵垂直旋轉(zhuǎn),，上下輕柔研磨（10-20次），避免氣泡產(chǎn)生,；或左右旋轉(zhuǎn)研磨（適用于韌性組織）,；電動(dòng)勻漿：控制低速（500-1000 rpm），短時(shí)間間歇操作（避免過(guò)熱）,。

如有必要,，操作過(guò)程需要對(duì)勻漿器進(jìn)行預(yù)冷，操作要進(jìn)行冰上操作,，減少蛋白,，核酸等降解。

玻璃勻漿器切記操作傾斜或用力過(guò)猛,，容易導(dǎo)致玻璃勻漿器過(guò)度磨損或破裂

如果提取的細(xì)胞器破裂,，需要減少勻漿次數(shù)或更換間隙更大的勻漿器

使用后立即用去離子水沖洗,，酒精擦拭或使用超聲波清洗機(jī)清洗，防止殘留物干結(jié),。

雙杵玻璃勻漿器有不同的杵缽的間隙,，用于細(xì)胞器提取或核酸/蛋白提取