手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
1 染色過強(qiáng)
原因 解決方法
a 抗體濃度過高或孵育時(shí)間過長 降低抗體滴度,、抗體孵育時(shí)間：室溫1小時(shí)或4度過夜
b 孵育溫度過高超過37度 一般在室溫20-28度
c DAB顯色時(shí)間過長或濃度過高 顯色時(shí)間不超過5-12分鐘,，以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)
2 非特異性背景染色
原因 解決方法
a 操作過程中沖洗不充分 每步?jīng)_洗3次每次5分鐘
b 組織中含過氧化物酶未阻斷 可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時(shí)間延長
c 組織中含內(nèi)原性生物素 正常非免疫動(dòng)物血清再封閉
d 血清蛋白封閉不充分 延長血清蛋白封閉時(shí)間
3 染色弱
原因 解決方法
a 抗體濃度過低,、孵育時(shí)間過短 提高抗體濃度,、孵育時(shí)間不能少 于60分鐘
b 試劑超過有效使用時(shí)間 應(yīng)更換試劑
c 操作中添加試劑時(shí)緩沖液未瀝干 每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液
使試劑稀釋 （應(yīng)防止切片干燥）
d 室溫太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4 度冰箱過夜
e 蛋白封閉過度 封閉不要超過12分鐘
4 染色陰性
原因 解決方法
a 操作步驟錯(cuò)誤 應(yīng)重試 設(shè)陽性對照
b 組織中無抗原 設(shè)陽性對照以驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果
c 一抗與二抗種屬連接錯(cuò)誤 仔細(xì)確定一抗二抗種屬無誤
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載,、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任,。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息,，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé),，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體,、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任,。
- 如涉及作品內(nèi)容,、版權(quán)等問題，請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利,。
采購中心