圖2 巨玫瑰葡萄

圖3 巨玫瑰葡萄植株

   葡萄園隨機(jī)選取兩行葡萄植株作為固定采樣點(diǎn),。采樣時(shí)兼顧果穗上中下及陰陽(yáng)面,，利用五點(diǎn)取樣法從每穗采集無(wú)損傷和病害的葡萄顆粒。采樣周期從葡萄轉(zhuǎn)色期至成熟期,。每隔3～5d進(jìn)行1次采樣,，每次采集 280 ～ 320 粒葡萄，并按照顏色和硬度進(jìn)行分組,，40 粒為一組,，分為7～8組。采樣周期內(nèi)共采集24批試驗(yàn)樣品,，共計(jì)178組,，每個(gè)樣品測(cè)定20顆巨玫瑰果粒的光譜信息，并將相應(yīng)的20顆巨玫瑰果粒－40℃冷凍保存進(jìn)行后續(xù)理化值測(cè)定,。

 圖4 光譜采集系統(tǒng)

   如圖所示,，為減少雜散光干擾，光譜采集在暗室中進(jìn)行,，以白板為背景放置葡萄樣本,。采集系統(tǒng)由鹵素?zé)簟⒐饫w探頭,、光纖光譜儀,、標(biāo)準(zhǔn)漫反射白板及樣本組成。其中鹵素?zé)艄庠?、暗室,、光纖探頭共同構(gòu)成手柄燈光譜采集模塊,，末端通過(guò)光纖和光譜儀連接。光譜儀使用奧譜天成（Optosky）的ATP3030高分辨率型微型光纖光譜儀,，積分時(shí)間1ms,，分辨率0.5nm，光譜范圍200-1100nm,。

   首先通過(guò)光譜采集模塊對(duì)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)漫反射白板,，采集其反射光譜作為標(biāo)準(zhǔn)參考數(shù)據(jù)，再將單粒葡萄樣本放在漫反射白板上并置于手柄燈暗室內(nèi),，搭配軟件反射率測(cè)量模塊,，最終獲得該樣本反射光譜。此外,，測(cè)量過(guò)程沿葡萄樣本赤道以120°間隔測(cè)量3次取平均值作為最終光譜數(shù)據(jù),。

圖5 成熟期葡萄反射率曲線

   為消除光譜儀及外界因素影響，去除前端部分光譜波段,，選擇波長(zhǎng)范圍 400～1100 nm進(jìn)行后續(xù)建模分析,。

   在原始光譜中葡萄樣品的可見(jiàn)-近紅外光譜雖存在重疊和交叉的情況，但整體上變化趨勢(shì)基本一致,。在光譜范圍500～720nm內(nèi),，光譜曲線存在一定的差異性，原因可能在于葡萄成熟品質(zhì)不同致使其果皮顏色存在差異,，進(jìn)而影響光譜的吸收,。光譜曲線在波長(zhǎng)720nm附近存在明顯的吸收峰，分析其原因可能與胡蘿卜素,、葉綠素的吸收有關(guān),。在光譜范圍850～920nm內(nèi)，光譜曲線出現(xiàn)吸收帶,，其原因可能與酚類和花青素,、纖維素和蔗糖等的吸收有關(guān)。此外,，光譜曲線在1000～1050nm范圍內(nèi)出現(xiàn)吸收帶,，可能與水和維生素等成分有關(guān)。

   光譜測(cè)量結(jié)束后,，將葡萄樣品置于－40℃的低溫條件下冷凍保存,，待分離葡萄皮、籽,，經(jīng)磨粉,、超聲處理、離心,、上清液提取后,，進(jìn)行總酚和單寧含量測(cè)定,。

圖6 總酚標(biāo)準(zhǔn)曲線

   總酚是葡萄皮、籽提取物中主要的酚類物質(zhì),，采用Folin－Ciocalteu方法測(cè)定并進(jìn)行適當(dāng)修改,。使用沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線（mg /g沒(méi)食子酸當(dāng)量）表征總酚含量。

圖7 丹寧標(biāo)準(zhǔn)曲線

   采用甲基纖維素沉淀法測(cè)定單寧含量,，并根據(jù)校準(zhǔn)曲線,，以mg /g的兒茶素當(dāng)量表征單寧含量。