葡聚糖凝膠是一種珠狀的凝膠,,含有大量的羥基,,很容易在水中和電解質(zhì)溶液中溶脹,。親水基質(zhì)使其非特異性吸附最小化,,并在生物分子分離期間得到較高的回收率。葡聚糖凝膠G-100通常為白色珠?;蚍勰?,屬親水性凝膠。性穩(wěn)定,,不溶于水,、弱酸和堿溶液,遇強(qiáng)酸能使糖苷鍵分解,。其工作原理:
葡聚糖凝膠G-100利用分子篩作用,,根據(jù)被分離物質(zhì)的分子大小不同來(lái)進(jìn)行分離。大于凝膠孔徑的大分子被阻于凝膠相外,,沿著凝膠顆粒之間的間隙移動(dòng),,下移速度最快,故最先洗脫下來(lái),;中分子物質(zhì)部分進(jìn)入凝膠內(nèi)部,,洗脫速度為其次;而小分子物質(zhì)因全部進(jìn)入凝膠,,受到阻力*大,,故*后被洗脫下來(lái)。
應(yīng)用:葡聚糖凝膠G-100主要用于多肽分離,、脫鹽,、清洗生物提取液、分子量測(cè)定等科研實(shí)驗(yàn),。
使用前準(zhǔn)備:葡聚糖凝膠G-100以干粉形式存在,,使用前必須溶脹。通常在過(guò)量去離子水或緩沖液中,,室溫條件下膨脹24小時(shí),,或用熱水膨脹1小時(shí)。溶脹過(guò)程中,,如果上層有漂浮物,應(yīng)去除,。
使用注意事項(xiàng):在使用過(guò)程中,,避免使用高濃度的強(qiáng)酸強(qiáng)堿,,酸和堿的濃度應(yīng)低于0.15摩爾。堿會(huì)使流速變慢,。不同的樣品,,吸附和洗脫方法不相同,可以根據(jù)相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行,。
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