申克氏孢子絲菌的培養(yǎng)特點與染色反應(yīng)及診斷與治療,!
一,、菌種簡介
申克氏孢子絲菌(學(xué)名:Sporothrix schenckii)是一種常見的溫感二形性真菌,,也是Sporothrix屬的物種,。申克氏孢子絲菌是引起孢子絲菌病的病原菌,。廣泛分布于自然界,,自土壤、腐木及植物表面可分離出本菌,。申克氏孢子絲菌通過損傷的皮膚或粘膜感染人,,可引起皮膚、皮下發(fā)生慢性結(jié)節(jié)性或潰瘍性為特點的孢子絲菌病,。也可侵犯肺,、胃腸道、骨及中樞神經(jīng)系統(tǒng),。病原菌通過血流播散,,引起全身皮膚出現(xiàn)結(jié)節(jié)、膿腫,。
二,、形態(tài)和染色反應(yīng)
申克氏孢子絲菌是一種二形的真菌,在組織中和在37℃培養(yǎng)時生長成酵母形態(tài),,但在30℃培養(yǎng)時則生長成絲狀真菌,。在30℃培養(yǎng)時,它能形成纖細,、有橫隔的分支菌絲,,在短的支持菌絲上或直接在主菌絲的邊上長出卵圓形的臺軸分生孢子(sympodu—loconidia)。在膿汁中很難用顯微鏡找到此菌,。在組織中有特征性的形態(tài)是類似長形酵母的細胞,,有時候被描繪為“雪茄形”,長2-10/μm,,寬1-3μm,。
三、培養(yǎng)特點
此菌在所有常用的實驗室培養(yǎng)基上都能生長,,但在固體培養(yǎng)基上的生長比在液體中更為豐盛,。麥芽糖能促進生長。在馬鈴薯葡萄糖瓊脂上的生長也良好,,特征性的棕黑色色素也看得最清楚,。
在馬鈴薯斜面上于30℃培養(yǎng)時,第二天便出現(xiàn)帶白色的絲狀小菌落,,以后逐漸增大和變黑,,直到最后幾乎成了黑色為止。菌落的表面呈羊毛狀,,這是因為有好氣的短菌絲的緣故,。年老的培養(yǎng)物的表面有皺紋和卷曲。
在mycobiotic瓊脂上的生長與馬鈴薯上的生長相似,但菌落保持白色,,而且粘附得很緊,,因為菌絲體能深入到培養(yǎng)基里去。明膠緩慢地被液化,,生長大多靠近表面,,但沿穿刺線出現(xiàn)刺樣的生長,表面生長可能有點變黑,。Loeffler氏血清培養(yǎng)基在菌落下面稍凹陷,,但不出現(xiàn)全面的液化。
四,、流行病學(xué)和發(fā)病學(xué)
申克氏孢子絲菌是死的植物材料例如沼澤泥炭蘚上常見的腐生菌,,因此大多數(shù)病人是林業(yè)工作者、花匠和擺弄在地下潮濕條件下存放的撐木的礦工們,。分生孢子在土壤中也常見,。此菌通過皮膚傷口而侵入,通常的侵入部位是手,、腳和頭部,。馬和狗比別的動物受感染得更多。病變開始時是一個帶紅色小結(jié)節(jié),,可能淌出稀薄的漿液膿性液體,。然后感染經(jīng)淋巴管道而擴散。沿著這些管道形成了小結(jié)節(jié),,結(jié)節(jié)潰破出表面,,排出淡黃色的粘稠膿汁。淋巴結(jié)也腫大,。腿的皮下組織可能因淋巴液的積聚而增厚,,淋巴管道中的病變限制了淋巴液返回到全身淋巴循環(huán)去。病變散播到別的組織去,,在馬是罕見的,,但有時候可見于狗。
此菌在病變中為數(shù)稀少,,通常可在巨噬細胞里面找到它,。它是多形的,,長出許多的芽。
五,、免疫性
對抗感染的應(yīng)答,,既有體液的也有細胞介導(dǎo)的。在感染過程中,對抗酵母型的凝集素上升了,。大約50%的病例有補體結(jié)合抗體,。抗體效價的迅速上升表示預(yù)后良好,。老的液體培養(yǎng)物的濾液(孢子絲菌素——sporolrichin)可使病畜產(chǎn)生特異性的遲發(fā)型過敏反應(yīng),。
六、診斷
使用螢光抗體技術(shù)和PAS染色方法,,能最清楚地在組織和膿汁中看到申克氏孢子絲菌的微小,、球形和雪茄狀的酵母體。這些方法是快速的,,但是必須有標(biāo)本在腦心浸劑或mycobiotic瓊脂斜面上于37℃和30℃或室溫培養(yǎng)的培養(yǎng)物的支持,。典型菌落大約在一周后可以見到——起先是白色和光潔的, 以后變成棕色,。酵母型是在37℃培養(yǎng)時產(chǎn)生的,,這使申克氏孢子絲菌與由其他孢子絲菌引起的感染區(qū)別開,后者偶然也曾在人的皮下組織中引起病變,。
診斷也可以通過用組織浸漬物或滲出物腹腔內(nèi)接種小鼠來加以證實,。小鼠在接種后一周產(chǎn)生腹膜炎,在腹腔滲出液中有大量的雪茄狀,,多形,、正在出芽的酵母型。
七,、化學(xué)療法
建議用靜脈注射或口服碘化鉀來治療病馬,,但常發(fā)生治療失敗。也曾建議用灰黃霉素來治療病馬,。兩性霉素B對人的病例治療有效,。
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